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紫外做标准曲线，试剂空白的问题
最近在用硫酸苯酚法测总糖含量，作标准曲线的时候关于试剂空白产生了一个疑问
法一：以纯水为空白，2mL纯水+5mL浓硫酸+1mL苯酚的吸光度为第一个点（0，A）作在标准曲线上
法二：以2mL纯水+5mL浓硫酸+1mL苯酚的吸光度为空白，第一个点为（0,0）作在标准曲线上
到底哪一个方法比较严谨一点？
空白样品一般是指不加样品外其余试剂都加入的样品，第二种方法符合规则。此外标准曲线的绘制，有人直接将空白样绘制进去，有人喜欢标样中去除空白吸光度，再绘制曲线。我比较喜欢第二种，因为空白样会有一定的波动，操作简单。 空白就是除了样品不加，其他都加进去后的各组分混合物。标曲绘制不能人为取点（0,0），应该看空白的实际值，因为有时候空白也会有干扰吸收的，相当于基底吸收，要么就都扣除掉。 我觉的应该是第二种比较严谨，这样能消除试剂的影响！ 我做的时候是用第二种方法。 第二种比较严谨，同时扣除了苯酚和硫酸的影响，我做的时候都是用第二种方法。 看看回收率如何?能满足要求就行吧、、就是这个（0,0）真的合适么？工作曲线中的参比与空白93-第10页
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工作曲线中的参比与空白93-10
5试剂铁标准溶液：准确称取光谱纯金属铁1．000；6.1样品的消解：称取0.1g风干过100目筛的；6．2校准曲线的绘制：于50mL容量瓶中，加入适；6.3样品的测定：准确移取消解好的试液1～10m；铁的含量按式(1)计算：；铁(％)=［c?V2?(V总／V1)／W×10］；式中：c――从校准曲线查得铁的含量，μg／mL；；实验三邻二氮菲吸光光度法测定铁；一
铁标准溶液：准确称取光谱纯金属铁1．000g，溶于30mL。(1+1)盐酸中，转入1 000mL容量瓶中，加水稀释至标线，摇匀。此溶液含铁1．000mg／mL。用时用水稀释至标线，此溶液含铁100．0μg／mL。
操作步骤6. 1
样品的消解：称取0.1g风干过100目筛的土壤样品于聚四氟乙烯坩埚中，加少量水润湿，然后加硝酸5mL，氢氟酸5 mL高氯酸1mL，在电热板上加热分解至高氯酸冒白烟，重复此步骤2～3次，使样品消解完全。待高氯酸白烟冒尽，取下坩埚稍冷，加盐酸2mL，温热溶解残渣，移入100mL容量瓶中，加水定容。同时制备一份全程序试剂空白溶液。6．2
校准曲线的绘制：于50 mL容量瓶中，加入适量铁标准溶液及(1+1)盐酸2 mL，加水定容，配制出含铁0，1．0，3．0，5.0，7.0，10.0mg／L的校准系列。调节仪器至最佳工作状态，依次测定校准系列的吸光度，并绘制吸光度―浓度曲线。6. 3
样品的测定：准确移取消解好的试液1～10 mL(视待测元素含量而定)置于50mL容量瓶中，以下操作同校准曲线的绘制。将样品的吸光度减去相应的试剂空白溶液的吸光度后，从校准曲线上查出铁的含量。 7
结果计算铁的含量按式(1)计算：铁(％)=［c?V2?(V总／V1)／W×10］×100
……………………………………………(1)6式中：c――从校准曲线查得铁的含量，μg／mL；
V总――试样消解后定容体积，mL；
V1――测定时取试样溶液体积，mL；
V2――测定时取试样溶液稀释定容体积，mL；
W――试样质量，g；
10――将微克换算成克数。6实验三
邻二氮菲吸光光度法测定铁 一、原理吸光光度法的理论基础是光的吸收定律――朗伯（Lambert）-比耳（Beer）定律，其数学表达式为：A=εb c即：在一定波长下，溶液的吸光度（A）与溶液中样品的浓度（c）及液层厚度（b）的乘积成正比。式中ε为摩尔吸光系数。吸光光度法对所用的显色反应有一定的要求。影响显色反应的主要因素有显色剂的用量，溶液的酸度，显色时的温度，显色时间的长短，共存离子的干扰等。通过本实验可以了解各因素对显色反应的影响以及如何为分析选择合适的条件。
铁的吸光光度法所用的显色剂较多，有邻二氮菲（又称邻菲罗啉，菲绕林）及其衍生物、磺基水杨酸、硫氰酸盐、5-Br-PADAP等。其中邻二氮菲分光光度法的灵敏度高，稳定性好，干扰容易消除，因而是目前普遍采用的一种方法。在PH2~9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲（Phen）生成稳定的橘红色络合物Fe(Phen)32+：其lgβ3=21.3，摩尔吸光系数ε508=1.1×104Lmol-1cm-1。当铁为三价状态时，可用盐酸羟胺还原：2Fe3++2NH2OH〃HCl=2Fe2++N2↑+4H++2H2O+2Cl―Cu2+、Co2+、Ni2+、Cd2+、Hg2+、Mn2+、Zn2+等离子也能与Phen 生成稳定络合物，在少量情况下，不影响Fe2+的测定，量大时可用EDTA掩蔽或预先分离。吸光光度法的实验条件，如测量波长、溶液酸度、显色剂用量、显色时间、温度、溶剂以及共存离子干扰及其消除等，都是通过实验来确定的。本实验在测定试样中铁含量之前，先做部分条件实验，以便初学者掌握确定实验条件的方法。实验数据的记录应该是表格式的，例如，选择测量波长实验时应记录为：同理，在制作标准曲线时应记录为（以本实验为例）：其它如酸度影响、显色剂用量等应如此表格式记录。二、试剂和仪器（1）铁标准溶液
100ug/ml准确称取0.8634gAR级NH4Fe(SO4)2〃12H2O于200ml烧杯中，加入20ml 6molL-1 HCl和少量水，溶解后转移至2L容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。
（2）邻二氮菲
0.15%水溶液（3）盐酸羟胺
10%水溶液（用时配制）
（7）721型分光光度计
1、条件试验（1）吸收曲线的制作和测量波长的选择：用吸量管吸取0.0，1.0ml铁标准溶液分别注入两个50ml容量瓶（或比色管）中，各加入1ml盐酸羟胺溶液、2ml邻二氮菲、5mlNaAC，用水稀释至刻度，摇匀。放置10min后，用1cm比色皿、以试剂空白（即0.0ml铁标液）为参比溶液，在440~560nm之间，每隔10nm测定一次吸光度，在最大吸收峰附近，每隔5nm测定一次吸光度。在坐标纸上，以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A与λ关系的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定Fe的适宜波长，一般选用最大吸收波长λmax。
（2）溶液酸度的选择：取7个50ml容量瓶（或比色管）分别加入1ml铁溶液，1ml盐酸羟胺，2mlPhen，摇匀。然后，用滴定管分别加入0.0，2.0，5.0，10.0，15.0，20.0，30.0ml 0.10molL-1NaOH溶液，用水稀释至刻度，摇匀。放置10min。用1cm比色皿，以蒸馏水为参比溶液，在选择的波长下测定各溶液的吸光度。同时，用PH计测量各溶液PH值。以PH为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A与PH关系的酸度影响曲线，得出测定铁的适宜酸度范围。（3）显色剂用量的选择：取7个50ml容量瓶（或比色管），各加入1ml铁标准溶液，1ml盐酸羟胺，摇匀。再分别加入0.10，0.30，0.50，0.80，1.0，2.0，4.0mlPhen和5mlNaAC溶液，以水稀释至刻度，摇匀。放置10min。用1cm比色皿，以蒸馏水为参比溶液，在选择的波长下测定各溶液的吸光度。以所取Phen溶液体积为横坐标，A为纵坐标，绘制A与V关系的显色剂用量影响曲线。得出测定铁时显色剂的最适宜用量。（4）显色时间：在一个50ml容量瓶（或比色皿）中，加入1ml盐酸羟胺溶液，摇匀。再加入2mlPhen，5mlNaAC,以水稀释至刻度，摇匀。立刻用1cm比色皿，以蒸馏水为参比溶液，在选择的波长下测量吸光度。然后依次测量5，10，30，60，120，…min后的吸光度。以时间t为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制A与t的显色时间影响曲线。得出铁与邻二氮菲显色反应完全所需的适宜时间。
2、铁含量的测定（1）标准曲线的制作：用移液管吸取100ug/ml铁标液10ml于100ml容量瓶中，加入2mlHCl，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液为每ml含Fe3+10ug。在6个50ml容量瓶（或比色管）中，用吸量管分别加入0.0，2.0，4.0，6.0，8.0 10.0ml10ug/ml铁标准溶液，分别加入1ml盐酸羟胺，2mlPhen，5mlNaAC溶液，每加入一种试剂后都要摇匀。然后，用水稀释至刻度，摇匀后放置10min。用1cm比色皿，以试剂为空白（即以0.0ml铁标液），在所选择的波长下，测量各溶液的吸光度。以含铁量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。由绘制的标准曲线，重新查出相应铁浓度的吸光度，计算Fe3+-Phen络合物的摩尔吸光系数ε。（2）试样中铁含量的测定：准确吸取适量试液于50ml容量瓶（或比色皿）中，按标准曲线的制作步骤，加入各种试剂，测量吸光度。从标准曲线上查出和计算试样中铁的含量（ug/ml）。 思考题1、本实验量取各种试剂时应分别采用何种量器量取较为合适？为什么？
2、试对所做条件试验进行讨论并选择适宜的测量条件。3、怎样用吸光光度法测定水样中的全铁（总铁）和亚铁的含量？试拟出一简单步骤？
4、制作标准曲线和进行其它条件实验时，加入试剂的顺序能否任意改变？为什么？ 附：721型分光光度计的使用方法1、打开电源预热15分钟，零位细调至000。
2、将“波长调节”旋钮调至所需波长上。3、打开液槽上方遮光板，将装有参比溶液和试液的比色皿放入比色皿架中，盖上遮光板盖，将参比溶液推入光路中，机械调零至零。使用比色皿注意事项如下：拿取比色皿时，手指不能接触其表面；测定溶液的吸光度时，应先用该溶液荡洗比色皿2~3次；测定一系列溶液吸光度时，通常是按从稀到浓的顺序进行测定，被测定的溶液应盛装3/4高度为宜；盛好溶液后，应先用滤液吸去比色皿外部的液体，再用擦镜纸轻轻擦拭透光面，直至洁净透明。4、按下T键，用光量调节粗调钮，调至100附近，再用光量调节细调钮调至100.0处。
5、按下A键，调消光钮至示值0.000处，再将试液推至光路中，待平衡后读取试液的A值。6、重复4~5操作，直至A值接近为止。7、仪器使用完毕，取出比色皿，洗净，晾干，关闭电源开关，复原仪器。用分光光度法测定二氧化硅中国质量新闻网
09:30:00吉林省产品质量监督检验院
张 涛滑石粉（Talc）主要成分是天然的含水硅酸镁（MgO?4SiO2?H20），作为食品添加剂使用的滑石粉，应为医药-食品级商品，使用范围和最大使用量应符合GB《食品添加剂使用卫生标准》的规定。GB（2002年增补品种）规定凉果话杏类食品中的最大使用量为20g/kg；GB 附录C 胶姆糖中胶基物质及其配料名单包括滑石粉（填充剂）；GB 附录D 食品工业用加工助剂推荐名单包括滑石粉。GB 对食品工业用加工助剂的要求是：一般应在制成最后成品之前除去，有的应规定食品中的残留量，其本身亦应为食品级商品。滑石粉无毒，联合国粮农组织/世界卫生组织（FAO/WHO）所属的食品添加剂委员会（JECFA）对滑石粉的每日允许摄入量不作特殊规定，美国食品和药品管理局（USFDA）将滑石粉列为一般公认为安全的食品添加剂。在食品生产过程中超量、超范围使用滑石粉掩盖腐败变质食品，甚至添加非食品级的滑石粉生产掺假食品是违法行为，本方法适用于试样中不含有其他的二氧化硅成分添加剂的食品。参考技术路线：前处理方法参考滑石化学分析方法（GB/T 1）中二氧化硅的测定，测定方法参考饮用天然矿泉水检验方法（GB/T）中硅钼黄分光光度法。包含各类专业文献、各类资格考试、生活休闲娱乐、外语学习资料、工作曲线中的参比与空白93等内容。　
　校准曲线分两种:工作曲线和标准曲线 工作曲线即曲线和样品的测定步骤完全一样,即...5、参比溶液又称空白溶液。在分光光度测定中,常使用参比溶液,其作用不仅是... 　在某些分光光度法中,以扣除空白值后的与 0.01 ...第四节 校准曲线 校准曲线包括标准曲线和工作曲线,...建立校准曲线时,测量吸光度的参比有两种选择。 第... 　在某些分光光度法中,以扣除空白值后的与 0.01 ...第四节 校准曲线 校准曲线包括标准曲线和工作曲线,...建立校准曲线时,测量吸光度的参比有两种选择。 第... 　应用化工技术专业(专)2008 级《工业分析Ⅰ》试卷(答案一律写在答题纸上,在本...测铁工作曲线时,要使工作曲线通过原点,参比溶液应选( A、试剂空白 B、纯水 C... 　绘制光吸收曲线 取标准溶液中的第一支和第二支, 到分光光度计上测定在不同...3. 绘制标准曲线 将仪器的波长调整到最大吸收波长处,以第一支空白液为 参比... 　测铁工作曲线时,要使工作曲线通过原点,参比溶液应选( A.试剂空白 B.纯水 C....在原子吸收分光光度法中能否用氢灯和钨灯作光源?为什么? 50. 答:不能, (1... 　测定其吸光度 , 然后在制 作标准曲线和测定样品的时候,同时减去参比的吸光度....常用的空 白溶液如下: 1 溶剂空白:当溶液中只有待测化合物在测定波长下有吸收... 　中,均以水为参比,为什么在测绘标准曲线和测定试液时,要以试剂空白 溶液为参比...(详细内容自己想) 实验十、硅酸中氧化锰含量的测定 工作曲线的绘制中,锰标准... 　测定时参比溶液应选择( ) A. 蒸馏水 B. 试剂空白 C. 含 KMnO4 的试样...17.在紫外-可见分光光度法中,工作曲线是___和___之间的关系曲线。当溶液符合...差示分光光度法测定高含量的二氧化硅_百度文库
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首先测定前是需要用空白样品去调零的 调零后的样品做出来是不需要减去空白样的吸光度的 但是如果做样品之前你没有用空白溶液做调零 那么测出的金属吸光度是需要减去工作曲线空白样品的吸光度的}