微生物实验讲义
实验五、环境因素对微生物的影响
----温度、渗透压和生物因素对微生物的影响
一.实验目的：
1. 了解温度对微生物生长的影响；
2.了解渗透压对微生物的影响；
了解某一抗生素（链霉素）的抗菌范围，学习抗菌谱试验的基本方法。
二.实验原理：
温度是影响微生物生长与存活的最重要因素。自然界的微生物可根据对温度的适应性分为低温型、中温型和高温型。但不管哪一种温度型的微生物，都有生长温度范围。分为最高、最适和最低生长温度。在最适宜温度里生长良好：超过最高温度细胞死亡；低于最低温度细胞被抑制或死亡。
温度对微生物影响的实际应用：应用上利用高温进行杀菌；低温抑制微生物；最适温度培养微生物的活动。
高温加热灭菌法有火焰灼烧；煮沸消毒；干热空气灭菌；高压蒸汽灭菌等。高温
干热致死机理：主要由于细胞内蛋白质受热变性，蛋白质结构发生变化而凝固等。高温热致死的影响因素有致死温度、高温时间和微生物的耐热性能。一般情况下，病原微生物细胞最不耐热，而霉菌和放线菌的孢子、细菌芽孢最耐热。
低温下多数微生物处于被抑制状态。病原菌和一些微生物在低温下也易死亡。其致死机理为细胞内外水份结成冰，冰晶对细胞造成损伤破坏作用。因此，应用上低温可以用来保存食品，和在有一定措施条件下进行保存菌种。
2.渗透压的影响：在等渗溶液中，（环境渗透压和细胞内渗透压相同或相近，细胞在等渗环境中生长好，如0.85％氯化钠——生理盐水），微生物正常生长。在高渗溶液（如高盐、高糖溶液中），细胞失水收缩，从而抑制了微生物体内的生理生化反应，抑制其生长繁殖。而在低渗溶液中，由于细胞壁的保护作用，微生物受低渗的影响不大。
不同类型的微生物对渗透压变化的适应能力不尽相同，大多数微生物在0.5％3％的盐浓度范围内可正常生长，10～15％的盐浓度能抑制大部分微生物的生长，但对嗜盐细菌而言，在低于15％的盐浓度环境中不能生长，而某些极端嗜盐菌可在盐浓度高达30％的条件下生长良好。
本实验选择了金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作为实验菌种，其中大肠杆菌耐高渗透压的能力较差，在3%以下的NaCl下能正常生长，以5%的NaCl下即受到抑制；金黄色葡萄球菌有较强的耐盐能力，它在10%的NaCl溶液中仍能正常生长，因此实验选择了0.85%、5%、15%的NaCl溶液浓度作为实验浓度。
抗生素的影响：抗生素是某些微生物在生长代谢过程中产生的能抑制或杀死其它微生物的次生代谢产物。每种抗生素都有它固定的抗菌范围和抗菌谱，例如青霉素只对革兰氏阳性菌具有抗菌作用，多粘菌素只对革兰氏阴性菌有作用，这类抗生素称为窄谱抗生素；另一些抗生素对多种细菌具有作用，例如四环素、土霉素对许多革兰氏阳性菌和阴性菌都有作用称为广谱抗生素。
本实验选择了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌作为实验菌种，选择了链霉素作为实验抗生素。通过实验观察这种抗生素的抑菌范围。
实验用品：参考实验教材上的实验用品。
四. 实验内容（三人一组）：
1、每组分别倒制含有0.85%、5%、15%的NaCl浓度的肉膏蛋白胨培养基平板，于实验桌上静置待其凝固。其中含有0.85%NaCl浓度的倒制两块平板。【每组共四块平板，0.85％的2块、5%、15%的各一块】
从斜面上刮取大肠杆菌、枯草芽孢杆菌分别放入10mL无菌水中，制备成菌悬液，于沸水浴中煮沸10min后备用。
取一块已经凝固的0.85％NaCl浓度的平板分成6等分，分别用接种环接种没有经沸水浴的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌斜面，和经过沸水浴的大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌菌悬液；并在平板底相相应地标记好，于37℃倒置培养2天观察平板上的细菌生长情况。从而观察它们对温度敏感性的差异，思考产生这种差异的原因。
将已经凝固的5%、15%的NaCl浓度的肉膏蛋白胨培养基平板用记号笔分区划分为两等分，分别接种大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，并在平板底相相应地标记好，于37℃倒置培养2天观察平板上的细菌生长情况。从而观察它们对渗透压敏感性的差异。
用无菌镊子取无菌滤纸条一条，浸入链霉素溶液中，润湿，并在容器内壁沥去多余溶液，再将滤纸条贴在已经凝固的另一块0.85％NaCl浓度的平板上。
&注意：滤纸条上含有的溶液不要太多，而且在贴滤纸条时不要在培养基上拖动滤纸条，避免抗生素溶液在培养基中扩散时分布不均匀。
无菌操作，用接种环，从滤纸条边缘分别垂直向外直线接种大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌。于37℃倒置培养2天观察并记录平板上的细菌生长情况。
注意：划线接种时要尽量靠近滤纸条，但不要接触，避免将滤纸条上的抗生素溶液与菌种混合。
引子：青霉素是抗菌素的一种，是从青霉菌培养液中提制的药物，是第一种能够治疗人类疾病的抗生素。　
青霉素的发现者是英国细菌学家弗莱明。1928年的一天，弗莱明在他的一间简陋的实验室里研究导致人体发热的葡萄球菌。由于盖子没有盖好，他发觉培养细菌用的琼脂上附了一层青霉菌。这是从楼上的一位研究青霉菌的学者的窗口飘落进来的。使弗莱明感到惊讶的是，在青霉菌的近旁，葡萄球菌忽然不见了。这个偶然的发现深深吸引了他，他设法培养这种霉菌进行多次试验，证明青霉素可以在几小时内将葡萄球菌全部杀死。弗莱明据此发明了葡萄球菌的克星—青霉素。
1929年，弗莱明发表了学术论文，报告了他的发现，但当时未引起重视，而且青霉素的提纯问题也还没有解决。
　　1935年，英国牛津大学生物化学家钱恩和物理学家弗罗里对弗莱明的发现大感兴趣。钱恩负责青霉菌的培养和青霉素的分离、提纯和强化，使其抗菌力提高了几千倍同，弗罗里负责对动物观察试验。至此，青霉素的功效得到了证明。
由于青霉素的发现和大量生产，拯救了千百万肺炎、脑膜炎、脓肿、败血症患者的生命，及时抢救了许多的伤病员。青霉素的出现，当时曾轰动世界。为了表彰这一造福人类的贡献，弗莱明、钱恩、弗罗里于1945年共同获得诺贝尔医学和生理学奖。
链霉素发明于1944年。是一种从灰链霉菌的培养液中提取的抗菌素。它的抗结核杆菌的特效作用，开创了结核病治疗的新纪元。从此，结核杆菌肆虐人类生命几千年的历史得以有了遏制的希望。
1.物理因素对微生物的影响
b.干燥：干燥指没有水分或缺少水分的环境。微生物对干燥较为敏感。病原菌在干燥的环境下会较快死亡；一些微生物在长期干燥环境中缓慢死亡；部分抗干燥微生物仍能存在，但生命受到抑制。因此，干燥广泛应用于控制微生物，保存食品等。
C.渗透压：指溶液中水分子由于渗透作用所产生的压力。
等渗：环境渗透压和细胞内渗透压相同或相近，细胞在等渗环境中生长好。如0.85％氯化钠（生理盐水）就是等渗透压环境。
高渗：环境渗透压高于细胞内渗透压。细胞脱水，严重时细胞质膜分离死亡。高渗透压环境可用于制造与保藏食品，如高盐和高糖食品不易变质就是这个道理。
低渗：环境渗透压低于细胞内渗透压。细胞大量吸水而膨胀，甚至破裂死亡。&
d.超声波：指人耳朵听不见的声波。波长在9～20千赫/秒以上对微生物有破坏作用。超声波致死机理：振荡使细胞受到损伤，以及介质发热产生较高的温度对细胞的致死作用。超声波常用于提取细胞内的DNA、酶等进行遗传工程的分析。
e.辐射：能量通过空间传递的电磁波。在射线中，有紫外线、r射线等。微生物对射线极为敏感。
紫外线：波长比最短的可见光还要短，其杀菌波长在260nm时杀菌力最强。紫外线杀菌机理是细胞中DNA遭到破坏，形成胸腺嘧啶二聚体。紫外线杀菌特点：杀菌力强，穿透力弱，受伤的细胞具有光复活作用。应用上可作为空气及物体表面消毒杀菌，菌种育种等。
x 射线、r射线等具有更强的致死作用。
f.过滤除菌：硅藻土过滤器用于水体等液体过滤；棉花纤维过滤器用于发酵工业的空气过滤；超细玻璃纤维过滤器用于超洁净工作台空气的微生物过滤等。
2.化学因素对微生物生命活动的影响
化学物质浓度决定着影响作用：浓度合适是微生物的营养物；浓度高时成为抑制剂或成为杀菌剂。
微生物生长在适宜的酸碱度环境中，如细菌、放线菌、藻类、原生动物等最适pH多为6.5～8.5（7.5左右）；酵母、霉菌最适pH多为4～6；少数微生物能在pH&2或pH&10环境中生长，这些微生物称为极端微生物。
酸碱影响微生物生长的机理：细胞中DNA、ATP、蛋白质易遭到酸碱破坏，酸碱还影响细胞膜与酶蛋白的电荷，影响物质吸收和催化。
酸碱在控制微生物上的应用：乳酸、醋酸、碱等可作为消毒剂。如石灰水（2％CaO3的水溶液）、NaOH、NaCO3等常作为厂房、环境等卫生的消毒剂。
b.重金属盐类
重金属离子对微生物有毒害作用。杀菌机理是与细胞蛋白质结合使之变性，或金属离子与酶SH基结合而使酶失去活性。
HgCL2（升汞），浓度在1:500～1:2000对细菌杀菌作用强。但对金属有腐蚀作用，对人与动物有剧毒，因此少用。
Ag盐：AgNO3是温和的杀菌剂，0.1～1％可用于消毒皮肤。
Cu盐：CuSO4对真菌与藻类杀伤力强，供水系统常使用CuSO4
指本身能放出游离氧或能使其它化合物放出氧的物质。氧化剂能导致微生物细胞物质氧化，代谢紊乱而死亡。
高锰酸钾：0.1～0.3％用于清洁后的物体表面（皮肤、蔬菜及水果等）消毒。酸性下杀菌有效，碱性下产生MnO2沉淀（杀菌减弱）。需现配现用。
Cl2、漂白粉、氯胺等含氯氧化剂，用于饮用水、厂房、工具等消毒。Cl2消毒剂量0.2～1ppm；漂白粉（次亚氯酸钙）Ca(OCl)2常用浓度为0.5～1.2％。实践中常以10％石灰水5份和5％漂白粉1份混合应用于环境、厂房等场地卫生的喷洒消毒。
d.有机物（酚、醇、醛）
酚类为强消毒杀菌剂。2～5％的苯酚（石碳酸）常作为实验室玻璃器具以及环境等卫生消毒杀菌。
醇类杀菌随分子量增加杀菌效果提高。但分子量大的醇对人体有毒害作用，且不易与水结合。60～75％乙醇是常用消毒剂。碘＋乙醇（碘酒）杀菌效果更好。
甲醛：纯甲醛是气体。35～40％甲醛水溶液为福尔马林。福尔马林杀死细菌与真菌效能强，是制作动物、植物标本的防腐剂。5％甲醛可以喷洒、熏蒸，用于空气、接种室等环境的消毒杀菌。
e.表面活性剂：指具有降低表面张力效应的物质。如肥皂、新洁尔灭等都是皮肤良好的消毒剂。
f.染料：染料也具有抑菌或杀菌作用。碱性染料杀菌能力强于带负电荷的酸性染料。
g.氧化还原电位（E值）：近年来用于给排水工程的科学研究与指导废水处理的运转工作中。它反映了微生物生长代谢环境的氧化还原电位。好氧处理系统如氧不足，电位低，兼性或厌氧微生物则生长代谢，水体处理质量下降。
l&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
好氧微生物：&&
E值&& +0.3～0.4V才能生长
l&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
厌氧微生物：&&
E值& &+0.1V才能生长
l&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
兼性厌氧微生物：E 值
&+0.1V进行好氧呼吸；E值&+0.1V进行厌氧呼吸。
实验六、 微生物生理生化反应观察
一.实验目的：初步了解微生物生化鉴定与分类的原理与方法；掌握淀粉水解实验、明胶水解实验和糖发酵实验的原理和方法。
二.实验原理：
本实验通过不同微生物对大分子物质的水解、糖发酵实验等几个实验，来让同学们了解不同微生物的生化功能的多样性。
微生物对淀粉的水解：由于微生物对淀粉这种大分子物质不能直接利用，必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用.胞外酶主要为水解酶,通过加水裂解大的物质为较小的化合物,使其能被运输至细胞内.如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精,双糖和单糖；而淀粉遇碘液会产生蓝色，因此能产淀粉酶的微生物在淀粉培养基上培养用碘处理会产生无色区域，据此可分辨微生物能否产生淀粉酶。
2. 微生物对明胶的水解：
微生物可以利用各种蛋白质和氨基酸作为氮源外,当缺乏糖类物质时,亦可用它们作为碳源和能源.明胶是由胶原蛋白经水解产生的蛋白质,在25℃以下可维持凝胶状态,以固体形式存在.而在25℃以上明胶就会液化.有些微生物可产生一种称作明胶酶的胞外酶,水解这种蛋白质,而使明胶液化,甚至在4℃仍能保持液化状态.
糖发酵试验：是常用的鉴别微生物的生化反应,在肠道细菌的鉴定上尤为重要.绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异.有些细菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸,醋酸,丙酸等)和气体(如氢气,甲烷,二氧化碳等);有些细菌只产酸不产气.例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气;
金黄色葡萄球菌可分解、、、，产酸不产气。伤寒杆菌分解葡萄糖产酸不产气,不能分解乳糖;普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气,不能分解乳糖.发酵培养基含有蛋白胨,指示剂(溴甲酚紫),和不同的糖类.当发酵产酸时,溴甲酚紫指示剂可由紫色(pH6.8)变为黄色(pH5.2).气体的产生可由生化试管中有无气泡来证明.
实验用品：参考实验教材上的实验用品。
四.实验内容（三人一组）：
1.淀粉水解实验：每组接种三支淀粉生化管（分别接种大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌），37℃培养2天，加卢革氏碘液观察和记录每管颜色变化，得出结论。
2.明胶水解实验：每组接种三支明胶生化管（分别接种大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌），20℃培养2天，[明胶在25度以上就会液化]，从20℃取出即观察和记录各管的明胶水解情况，得出结论。
3.葡萄糖发酵试验：每组接种二支葡萄糖生化管（一支接种大肠杆菌、一支接种金黄色葡萄球菌、每种生化管留下2支作为空白对照），37℃培养2天，观察和记录每管培养前后颜色变化，得出结论。
4、乳糖发酵试验：每组接种二支乳糖生化管（一支接种大肠杆菌、一支接种金黄色葡萄球菌），每种生化管留下2支作为空白对照。37℃培养2天，观察和记录每管培养前后颜色变化，得出结论。
五、实验注意事项：
淀粉水解实验，在观察时需要加卢革氏碘液以便观察淀粉的水解情况；
接种均在无菌条件下操作，接种完毕以后用灭菌好的棉花塞住管口防止污染；
生化管用砂轮切割玻璃后接种。
引子：在所有生活细胞中存在的化学反应称之为代谢。代谢过程主要是酶促反应过程。微生物产生的酶可能是在胞内也可能是在胞外。各种微生物在代谢类型上表现很大的差异，如表现在对大分子糖类和蛋白质的分解能力，以及分解代谢的最终产物的不同，反映出它们具有不同的酶系。
微生物生理生化反应的多样性在自然界产生了两种结果：第一是使自然界的有机分子都有可能得到分解；第二是使不同微生物之间有了互相作用和互相依赖得基础。例如,一种微生物能利用另一种微生物所分解的产物，或者一种微生物的产物可以抑制或者杀死另一种微生物。由于微生物代谢类型多样性,使得微生物在自然界的物质循环中起着重要作用,同时也为人类开发利用微生物资源提供更多的机会与途径.。此外,微生物代谢类型多样性具体表现在生化反应的多样性,因此人们在微生物的分类鉴定工作中,常利用其生化反应作为重要依据.
常用于微生物分类鉴定的生理生化特征
不　同　类　群　的　区　别
光能自养、光能异养、化能自养、化能异养及兼性营养型
对氮源的利用能力
对蛋白质、蛋白胨、氨基酸、含氮无机盐、N2等的利 用
对碳源的利用能力
对各种单糖、双糖、多糖以及醇类、有机酸等的利用
对生长因子的需要
对特殊维生素、氨基酸、X因子、V因子等的依赖性
好氧、微好氧、厌氧及兼性厌氧
对温度的适应性
最适、最低及最高生长温度及致死温度
对PH的适应性
在一定PH条件下的生长能力及生长的PH范围
对渗透压的适应性
对盐浓度的耐受性或嗜盐性
对抗生素及抑菌剂的敏感性
对抗生素、氰化钾(钠)、胆汁、弧菌抑制剂或某些染 料的敏感性
各种特征性代射产物
与宿主的关系
共生、寄生、致病性等
实验七、 微生物遗传实验
----抗药性突变株的分离
一.实验目的：掌握微生物变异的原理，学习用梯度平板法分离抗药性突变株
二.实验原理：基因突变可分为自发突变和诱发突变。许多物理、化学、生物因素对微生物都有诱变作用。
基因中碱基顺序的改变可导致微生物细胞的遗传变异。这种变异有时能使细胞在有害的环境中存活下来，抗药性突变就是一个例子。微生物的抗药性突变是DNA分子的某一特定位置的结构改变所致，与药物的存在无关，某种药物的存在只是作为分离某种抗药性菌株的一种手段，而不是引发突变的诱导物。因而在含有一定抑制生长药物浓度的平板上涂布大量的细胞群体，极个别抗性突变的细胞会在平板上生成菌落。将这些菌落挑取纯化，进一步进行抗性试验，就可以得到所需要的抗药性菌株。抗药性突变常用作遗传标记，因而掌握分离抗药性突变株的方法是非常重要的。
&为了便于选择适当的药物浓度，分离抗药性突变株常用梯度平板法。本实验用梯度平板法分离大肠杆菌抗链霉素突变株。
实验用品：参考实验教材上的实验用品。
四.实验操作：
（1）取一个已经灭菌的空平皿，把培养皿斜放(一边垫起)，在无菌条件下倒入不含药物的底层培养基（10mL
LB培养基）；
（2）待平板中的培养基凝固后将平皿放平，再倒入含有链霉素的上层培养基（10mL
LB培养基，含有链霉素100μg/mL）；
备注：这样便得到链霉素浓度从一边到另一边逐渐降低的梯度平板。
（3）取一支大肠杆菌液体培养物，用移液管移取0.2mL菌液到梯度平板上，进行涂布。
（5）将平板倒置于37℃培养2天；观察经一次培养的梯度平板上大肠杆菌的生长情况。
（6）选择平板上1～2个生长在梯度平板中部的单个菌落，用无菌接种环接触单个菌落朝高药物浓度的方向划线。
（7）将平板倒置于37℃培养2天；观察经二次培养的梯度平板上大肠杆菌的生长情况。
五.注意事项：
1.玻璃涂布棒在火焰上灼烧后要待其冷却后再进行涂布，以免烫死细胞；可以蘸上乙醇后在火焰上灼烧，以缩短冷却的时间。
六．思考题：
梯度平板中部的单个菌落被划线，并二次培养的目的是什么？
放线菌、霉菌及真菌的形态观察
一．实验目的：学习并掌握观察放线菌、霉菌及酵母菌形态的基本方法；初步了解放线菌、霉菌及酵母菌的形态特征。
二．实验原理：
1．放线菌：是一类主要呈菌丝状生长和孢子繁殖的陆生性较强的革兰氏阳性细菌，广泛分布于含水量低、有机质丰富的微碱性土壤中。放线菌的菌落形态特征为：形成干燥、不透明、表面呈致密丝绒状，上有一层彩色“干粉”的菌落。菌落与培养基连接紧密，难以挑取，菌落正反面颜色不一致，在菌落边缘的琼脂平板上有变形的现象，有泥腥味。放线菌在显微镜下一般气丝在上，基丝在下，气丝色暗，基丝较透明。有的放线菌只产生基丝而无气丝。本实验采用压片法来观察放线菌的菌丝形态。
2．酵母菌：是一种不运动的单细胞真核微生物。酵母的菌落形态与细菌的相仿，一般呈较湿润、较透明，表面光滑，容易挑起，菌落质地均匀，正反面以及边缘与中央部位的颜色较一致，酿酒酵母散发酒精味。由于酵菌细胞比细菌的大，细胞内有许多分化的细胞品，细胞间隙含水量较少，不能运动，帮菌落较大、较厚，外观较稠和、不透明，菌落颜色多为乳白色或矿烛色。一些不产假菌丝的其菌落更隆起、边缘极圆整；产假菌丝的其菌落较扁平，表面和边缘较粗糙。子囊孢子是子囊菌类真菌有性生殖产生的有性孢子。在酵母中，能否形成子囊孢子以及其形态是酵母分类鉴定的重要依据之一。本实验以酿酒酵母为材料，采用孔雀绿和复红染料处理来观察酵母的子囊孢子的形态，在显微镜下，子囊孢子呈绿色、菌体和子囊呈粉红色。
3．霉菌：也呈菌线体形态，但霉菌的菌丝和孢子比放线菌的粗得多。霉菌的菌落形态较大，质地蔬松，外观干燥，不透明，菌落与培养基间连接紧密，不易挑取，菌落正反面，边缘与中心的颜色、构造通常不一致，有霉味。菌丝的孢子较大，在低倍镜下即可清晰观察到有隔或无隔菌丝和孢子及巨大的孢子囊。
三．实验用品：参考实验教材上的实验用品。
四．实验内容：
1．用接种铲或解剖刀将平板上的菌苔连同培养基切下一小块，菌面朝上放在一载玻片上。另取一洁净载玻片置火焰上微热后，盖在菌苔上，轻轻按压，使培养物（气丝、孢丝或孢子）粘附在后一块载玻片中央，有印迹的一面朝上，通过火焰2～3次固定。
2．取经产孢培养的酵母斜面培养物，在洁净的载玻片上按常规涂片、干燥固定。滴加孔雀绿染液染色1min。用95％乙醇脱色30s，水洗。用番红复染30s，水洗，用吸水纸吸干。晾干后用油镜观察。（子囊孢子呈绿色，菌体和子囊呈粉红色）
3．先观察霉菌的菌落形态，然后在载玻片上滴加一滴乳酸石炭酸棉蓝染液，用解剖针从霉菌菌落边缘处挑取少量已经产孢子的霉菌菌丝，先置于50％的乙醇中浸一下洗去脱落的孢子，再放在载玻片上的染液中，用解剖针小心的将菌丝分散开。盖上盖玻片，置于低倍镜下观察，必要时换高倍镜。
4．仔细观察以上三种菌的菌落形态和显微形态差异并把观察结果记录在实验报告上。画出菌体形态图。
五．注意事项：用解剖针挑菌和制片时要细心，尽可能保持霉菌自然生长状态；加盖玻片时勿压入气泡，以免影响观察。
1．显微镜下酵母区别于一般细菌的形态：
a.酵母有一个大液泡，而细菌没有。
b.酵母有出芽繁殖现象和留下的芽痕，而一般细菌没有。
c.酵母没有鞭毛。
d.酵母细胞比细菌大几倍到几十倍。
2．显微镜下细菌、放线菌、酵母与霉菌的形态差异：
a.细菌一般呈球状、杆状等，体积较小，看不到内部结构。
b.放线菌在显微镜下呈菌丝体存在。菌丝较霉菌的细菌丝无分隔，成熟的气生菌丝分隔形成孢子丝或孢子囊。
c.霉菌呈菌丝体，菌丝粗且有分隔，有特异化的营养菌丝----分生孢子梗和巨大的分生孢子囊，分生孢子囊上有成串的黑色孢子。
d.酵母细胞由于出芽繁殖而形态各异，细胞较大，有分化的细胞器，尤其是大液泡，含水量较多，有芽痕。
3．气生菌丝的形态：颜色较深，直径较粗，未成熟的气生菌丝无分隔。
备注：霉菌的营养体是分枝的丝状体。其个体比细菌和放线菌大得多，分为基内菌丝和气生菌丝。气生菌丝中又可分化出繁殖丝。不同霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子。
霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，且孢子容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片的特点是：细胞不变形，具有杀菌防腐作用，且不易干燥，能保持较长时间，溶液本身呈蓝色，有一定染色效果。利用培养在玻璃纸上的霉菌作为观察材料，可以得到清晰、完整、保持自然状态的霉菌形态；也可以直接挑取生长在平板中的霉菌菌体制水浸片观察。
观察黑霉菌的多核有隔菌丝、分生孢子梗、顶囊、小梗、散落的褐色分生孢子和成串排列在小梗上的游离端的分生孢子和形态。
&酶联免疫吸附试验
目的 掌握试剂盒的运用，巩固ELISA的原理、操作
原理 ELISA原理（双抗体夹心法）
乙肝表面抗体测定试剂盒，微量加样器（100μl），注射器，止血带，离心机，碘酒，试管，恒温水浴箱，滴管，烧杯
方法 1、抽取静脉血2.5ml，离心至血清析出
2、对照试剂盒说明书进行操作：加样、温育、洗涤、加样、终止反应
结果观察 阳性孔呈蓝色，阴性孔呈无色
结果分析与结论 阳性者有免疫力
采血时注意避免溶血；加血清时避免将纤维蛋白带入
已投稿到：
以上网友发言只代表其个人观点，不代表新浪网的观点或立场。环境工程微生物学复习题2013_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
评价文档：
&&¥10.00
&&¥10.00
&&¥10.00
&&¥5.00
喜欢此文档的还喜欢
环境工程微生物学复习题2013
阅读已结束，如果下载本文需要使用
想免费下载本文？
把文档贴到Blog、BBS或个人站等：
普通尺寸(450*500pix)
较大尺寸(630*500pix)
你可能喜欢
20080份文档给水排水工程2_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
文档贡献者
评价文档：
喜欢此文档的还喜欢
给水排水工程2
给​水​排​水​工​程​课​件
把文档贴到Blog、BBS或个人站等：
普通尺寸(450*500pix)
较大尺寸(630*500pix)
大小：2.83MB
登录百度文库，专享文档复制特权，财富值每天免费拿！
你可能喜欢
20080份文档微生物复习题_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
评价文档：
喜欢此文档的还喜欢
微生物复习题
微​生​物​复​习​题
阅读已结束，如果下载本文需要使用
想免费下载本文？
把文档贴到Blog、BBS或个人站等：
普通尺寸(450*500pix)
较大尺寸(630*500pix)
你可能喜欢丝状细菌在给排水工程中的作用？它们在代谢过程中有什么特征？_百度知道
丝状细菌在给排水工程中的作用？它们在代谢过程中有什么特征？
使污泥结构松散，以防止其他生物附着，非结构丝状菌的数量很少，并减少水流对细胞的冲刷，出水水质变差，防止单个细胞状态时被微型动物吞食。而胶团菌的附着使絮体具有一定的沉降性而不易被出水带走、良好的生态条件，有利于摄取低浓度底物；细丝状形态的比表面积大丝状微生物是一大类菌体相连而形成丝状的微生物的统称。 根据丝状菌在构成污泥絮体方面的作用，造成污泥出水水质下降，沉淀压缩性能变差，能分泌粘液。如果没有足量的丝状菌、丝状真菌，同时抗剪切力亦将变差，可以将丝状菌分为结构丝状菌和非结构丝状菌丝。胶团菌与结构丝状菌之间是相互依存关系，在丝状菌过度生长的情况下，丝状菌在数量上可能超过胶团菌，保持一定的细胞密度，沉降性下降，质量变轻，为絮体形成较大颗粒同时保持一定的松散度提供了必要条件。许多丝状微生物表面具有胶质的鞘，所这两大类微生物在活性污泥中形成了特殊的共生体。但是，粘液层能够保证一定的胞外酶浓度。在正常运行条件下，使处理出水浑浊，并且由于胶团菌的包附使得结构丝状菌获得更加稳定，则污泥絮体的强度将会降低、丝状藻类等，长丝状形态有利于其在固相上附着生长，丝状微生物形成了絮体骨架。结构丝状菌对于保证污泥絮体的强度有很大作用，具有结构丝状菌的絮体占优，其中还含有特定的抗体。丝状微生物的功能与结构形态密切相关，其中包括丝状细菌，产生污泥膨胀
其他类似问题
给排水工程的相关知识
等待您来回答
下载知道APP
随时随地咨询
出门在外也不愁}