水合茚三酮溶液配制是鉴别什么的

茚三酮反应的阳性结果是否经常是同一色调?若不是,为什么?_百度知道
茚三酮反应的阳性结果是否经常是同一色调?若不是,为什么?
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蛋白质和氨基酸一样,也能和茚三酮水合物试剂产生紫色的颜色反应,用这个反应可以鉴别蛋白质。除了水会呈阴性反应,而无α—氨基的脯氨酸和羟脯胺酸呈黄色。因为他们没有α—氨基酸可以与水合茚三酮反应生成蓝紫色物质。纯手打,。。
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终于有答复,本科毕业好几年,都转行了,还是非常感谢哈
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茚三酮反应
茚三酮反应
ninhydrin reaction又名“茚满三酮”、“水合茚三酮”、“宁海群”。检测α-氨基酸与多肽常用的显色剂。白......-氨基物质能形成深蓝色乃至粉红或红色物质,故常用作朊类降解物和α-氨基化合物试剂。此项反应又叫“茚三酮反应”。结构式如下:
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<font color="#0-蛋白质显色反应
黄色反应 (Xanthoproteic reaction)&#57348;
原理&#57348;
凡是含有苯环的化合物都能与浓硝酸作用产生黄色的硝基苯衍生物。该化合物在碱性溶液中进一步转化成深橙色的硝醌酸钠 .&#57348;
在蛋白质分子中酪氨酸和色氨酸残基易发生上述反应,而苯丙氨酸不易硝化,需加少量浓硫酸催化才能呈明显的正反应。皮肤、指甲、头发等遇浓硝酸变黄即为这一反应的结果。&#57348;
操作步骤&#57348;
一、取一支试管加
4滴0.5%苯酚溶液,再加浓硝酸2滴,观察黄色出现,冷却后逐滴加入10%氢氧化钠溶液,观察颜色转变为橙色。&#57348;
二、取一支试管加蛋白质溶液
4滴及浓硝酸2滴,由于强酸的作用,开始蛋白质形成白色沉淀,小火加热,则沉淀变为黄色,冷却之,逐滴加入10%氢氧化钠溶液,颜色由黄色转变成深橙黄色。&#57348;
三、剪少许指甲或头发放入试管中,加入数滴浓硝酸,观察颜色变化。&#57348;
此外,蛋白质的显色反应
常用的显色反应
双缩脲反应:
该反应是肽键常用的反应,即在碱性铜溶液中,
肽键与铜离子形成络合物,呈紫色(在540nm有最大
&&& 光吸收峰)。
酚试剂法:
该反应是比色法测定蛋白质的常用方法,即蛋白
质以碱性铜溶液处理后,加用酚试剂,呈蓝色(在650nm
有最大光吸收峰)。
考马斯亮蓝法:
即蛋白质与一种蛋白质染料考马斯亮蓝G250反应形成
复合物,该复合物在595nm有最大光吸收峰。&
&#9312; 单纯蛋白质:它是由多肽组成的,其水解最终产物是α-氨基酸。如白蛋白、球蛋白、谷蛋白等。
&#9313; 结合蛋白质:它是由单纯蛋白质与非蛋白质部分结合而成的。如脂蛋白、磷蛋白、色蛋白、金属蛋白、血红蛋白。
3.根据蛋白质的功能分为:
&#9312; 活性蛋白质:它包括在生命运动过程中一切有活性的蛋白质。
&#9313; 非活性蛋白质:主要包括一大类担任生物的保护或支持作用的蛋白,从现有的了解看,都是不具有生物活性的物质。
蛋白质形成胶体溶液,它具有一定稳定性,主要原因是:
蛋白质分子中含有许多亲水基如:-COOH、-NH2、-OH等,它们外在颗粒表面,在水溶液中能与水起水合作用形成水化膜,水化膜的存在增强了蛋白质的稳定性。
&#9313; 蛋白质是两性化合物,颗粒表面都带有电荷,由于同性电荷相互排斥,使蛋白质分子间不会互相凝聚。
3.沉淀:蛋白质溶液与其它胶体一样,在各种不同的因素影响下,也会从溶液中析出沉淀,其方法很多。
盐析法:在蛋白质溶液中加入大量盐[如NaCl、Na2SO4、硫酸铵等],由于盐既是电解质又是亲水性的物质,它能破坏蛋白质的水化膜,因此当加入的盐达到一定的浓度时,蛋白质就会从溶液中沉淀析出。
重金属法:在蛋白质溶液中加入Hg2+、Pb2+等能与蛋白质结合成不溶性蛋白质的重金属离子(盐)。重金属中毒,可用蛋白质(如牛奶、豆浆、生鸡蛋等)解毒。
可逆沉淀:是指沉淀出来的蛋白质分子的各级结构基本不变,只要消除沉淀因素,沉淀物能重新溶解。盐析法则是可逆沉淀。
不可逆沉淀:则不能恢复原蛋白质的结构。如重金属法则是不可逆沉淀。
4.水解:蛋白质在酸或碱催化下能使各级结构彻底破坏,最后水解为各种氨基酸的混合物。
&&& 蛋白质 → → 胨 →
多肽 → 氨基酸
研究蛋白质水解中间产物的结构和性质,可以为蛋白质的研究提供有价值的资料。
5.变性:变性作用是指蛋白质受物理因素(如加热。强烈振荡、紫外线或X-射线的照射等)或化学因素(如强酸、重金属、乙醇等有机溶剂)的影响,其性质和内部结构发生改变的作用。
蛋白质的变性一向认为是蛋白质的二级、三级结构有了改变或遭受破坏,结果使肽链松散开来,导致蛋白质一些理化性质的改变和生物活性的丧失。如用酒精、煮沸、高压、紫外线消毒或杀菌的原因就在于这些条件均可导致细菌或病毒体内蛋白质变性,从而造成细菌死亡或病毒丧失活性。
6.显色反应 蛋白质能发生多种显色反应,可用来鉴别蛋白质。
&#9312; 与水合茚三酮反应:呈现蓝紫色(和氨基酸一样)。
&#9313; 缩二脲反应:蛋白质和缩二脲(NH2CONHCONH2)在NaOH溶液中加入CuSO4稀溶液时会呈现红紫色。
&#9314; 黄蛋白反应
蛋白质中存在有苯环的氨基酸(如苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸),遇浓硝酸呈黄色。这是由于苯环发生了硝化反应,生成黄色的硝基化合物。皮肤接触浓硝酸变黄就是这个缘故。
&#9315; 米勒反应:蛋白质+硝酸汞的硝酸溶液后变为红色。(酪氨基酸的反应)。
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