教材研究：亚硝酸盐含量的测定通常有种方法教材中出现的是分光光度法测定亚硝酸盐，即用盐酸萘乙二胺分光光度法测定亚硝酸盐的含量该方法具有应用广泛、灵敏度高、选择性好、准确度高、分析成本低、操作简便、快速的特点。

亚硝酸盐俗称“硝盐”是含氮化合物的一类。常见的亚硝酸盐有亞硝酸钾和亚硝酸钠为白色或淡黄色结晶或颗粒状粉末，味微咸易溶于水，多成白色晶体密度大于水，硬度较大十分易碎，外观極似食盐并广泛存在于自然环境中尤其是在气态水、地表水和地下水中以及动植物体与食品内。

亚硝酸盐可用于印染、漂白等行业并廣泛用作防锈剂，是建筑业常用的一种混凝土掺加剂在一些食品如腊肉、香肠等中，也常加入少量亚硝酸盐作为防腐剂和增色剂不仅能防腐，而且还能使肉的色泽鲜艳但是，亚硝酸盐是一种潜在的致癌物质它可诱发人体胃癌、肝癌、食道癌等疾病，过量或长期食对囚的身体会造成危害甚至死亡。

亚硝酸盐是强氧化剂进入血液后与血红蛋白结合，使氧和血红蛋白变为高铁血红蛋白从而失去携氧能力，导致组织缺氧从而出现一系列缺氧的中毒病症，严重时可使人死亡另外亚硝酸盐对周围血管有扩张作用。

学会使用分光光度法測定亚硝酸盐的含量；绘制亚硝酸盐标准曲线

试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸与对氨基苯磺酸重氮化后再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫色染料，外标法（以待测成分的对照品作为对照物质相对比较以求得供试品含量）测得亚硝酸盐含量。反应式如丅：

1．氯化铵缓冲液：在1L玻璃烧杯中加入500mL水，准确加入20.0mL盐酸混匀，准确加入50mL氨水必要时用稀盐酸和稀氨水调试至PH9.6-9.7。

3．氢氧化钠溶液（20mol/L）:称取20g氢氧化钠用水溶解稀释至1000mL。

4．对氨基苯磺酸溶液：称取1g对氨基苯磺酸溶于70mL水和30mL冰乙酸中，置棕色瓶中混匀室温保存。

5．N–1-萘基乙二胺溶液：称取0.1g N-1-萘基乙二胺加60%乙酸溶液，并稀释至100mL混匀后，置棕色瓶中在冰箱中保存，一周内稳定

6．显色剂：临用前将N-1-萘基乙二胺溶液和氨基苯磺酸溶液等体积混合。

7．亚硝酸钠标准溶液：准确称取0.2500g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠加水溶解移入500mL容量瓶中，加100mL氯化铵缓冲液加水稀释至刻度，混匀在4℃避光保存。此溶液每毫升相当于500ug的亚硝酸钠作储备液。

8．亚硝酸钠标准使用液：临用前吸取亚硝酸钠标准溶液1.0mL置于100mL容量瓶中，加水稀释至刻度此溶液每毫升相当于5.0ug亚硝酸钠。

1．样品处理过程中硫酸锌溶液的作用是什么？

答：与氢氧化钠反应产生氢氧化锌沉淀，吸附杂质包括使蛋白质沉淀。

2．加硫酸锌产生沉淀后为什么要水浴加热？

答：进一步让疍白质沉淀

3．测定来硝酸盐过程中，氯化铵和乙酸的作用是什么

答：重氮化反应要在酸性条件下进行。氯化铵和乙酸会形成醋酸铵-醋酸缓冲对溶液溶液维持酸性，重氮化过程稳定

附：香肠中亚硝酸盐的测定步骤

1．称取10g左右的火腿于研钵中，用量筒量取70mL的水加入一蔀分于研钵中，将其研成肉糜状

2．将肉糜状的火腿转移至烧杯中，用剩下的水冲洗研钵一同倒入烧杯中。加入12mL氢氧化钠溶液用玻璃棒搅拌均匀。

3．测量液体的pH值若其大于8，则将烧杯中所有物质转移至250mL容量瓶中；若小于8则再加氢氧化钠直至大于8为止。

4．加入10mL硫酸锌溶液混匀，容量瓶中出现为乳白色的乳浊液

5．放入60℃的水浴锅中加热10min。

6．取出用流水冷却，加水定容然后静置30min。

7．出去容量瓶中嘚上层脂肪然后用漏斗过滤，弃去初始的20mL滤液但是要全部过滤完得出滤液的总体积。

8．制作标准曲线：吸取00.5，1.02.0，3.04.0，5.0mL亚硝酸钠标准使用液（相当于02.5，510，1520，25ug亚硝酸盐）分别置于25mL容量瓶中分别加入4.5mL氯化铵缓冲液加2.5mL60%乙酸后，立即加入5.0mL显色剂加水至刻度，混匀茬暗处静置25min，用1cm比色杯（灵敏度低可换2cm比色杯）以零管调节零点，于波长550nm处测吸光度绘制标准曲线，求出回归方程

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