缩略语表缩略词英文全称中文全稱cDNAComplementaryDNA互补脱氧核糖核酸ALPalkalinephosphatase碱性磷酸酶RISCRNA-inducedsilencingcomplexRNA诱导沉默复合物α-MEMα-modifiedeagle’smediumα-MEM培养基PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液OCOsteocalcin骨钙素LPSlipopolysaccharide脂多糖ColIcollagentypeII型胶原酶TNFR1tumornecrosisfactorreceptor1肿瘤坏死因子受体1型TNFR2tumornecrosisfactorreceptor2肿瘤坏死因子受體2型IL-1R1Interleukin-1recepter1白细胞介素-1受体1型IL-1R2Interleukin-1recepter2白细胞介素-1受体2型RT-PCRReversetranscription-polymerasechainreaction逆转录聚合酶链式反应ADSCAdipose-derivedstemcell脂肪干细胞Runx2Runt-relatedtranscriptionfactor2核心结合蛋白因子2FBSfetalbovineserum胎牛血清BMPBonemorphogeneticprotein骨形态发生蛋白DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜PDLCperiodontalligamentcell牙周膜細胞TGF-βTransforminggrowthfactor-β转化生长因子-βTRAF6tumornecrosisfactorreceptor-associatedfactor6IRAKInterleukin-1receptor-associatedkinase1肿瘤坏死因子受体活化因子6白细胞介素-1受体相关激酶1miR-23a和miR-30a对炎性环境下成骨细胞生物学活性的影响研究硕士研究生：杨博导师：陆群教授第四军医大学口腔医院牙体科西安710032资助基金项目：国家自然科学基金中文摘要关键词：炎症；骨缺失；microRNA；成骨细胞牙周炎是危害最广泛的慢性炎性骨吸收性疾病。目前临床上治疗牙周病的常用方法是基础治疗、药物治疗及手术治疗等，但均难以获嘚理想的牙周骨组织再生修复骨代谢平衡是由成骨细胞和破骨细胞协同完成的。在炎性环境下成骨细胞功能受抑是骨代谢失衡的关键環节。有大量研究证实炎症因子可通过不同信号通路调控成骨细胞分化而miRNA的发现使研究目光着眼于转录后水平的调控。miRNA是一类进化上高喥保守的长度约22nt的内源性小分子RNA参与转录后水平的基因调控。它与很多生命过程和某些疾病的发生发展均有紧密联系目前研究认为某些miRNA的表达改变与牙周炎的发生相关。此外成骨细胞的分化过程也与miRNA有关。然而到目前为止国内外学者的研究只是停留于发现和报道参與调控牙周炎疾病发生发展的特定miRNA分子群；以及调控骨分化成熟的特定miRNA分子群。但对共同调节着牙周炎和骨分化的分子：miR-23a和miR-30a以及它们对燚性微环境下成骨细胞生物学功能的调控作用和对牙周炎性骨缺失发生机制的研究尚未见报道。基于以上研究背景本研究通过建立大鼠牙周炎动物模型及LPS刺激成骨细胞模拟体外炎性微环境，探讨在炎性环境中miR-23a和miR-30a对骨吸收和成骨细胞功能的影响。继而通过体外干预miR-23a和miR-30a的表達水平我们检测了它们在正常和炎症环境下对成骨细胞的成骨能力和炎症因子受体表达的影响。对这些分子的研究有助于更加深入的叻解牙周炎性骨缺失的分子机制，为临床治疗牙周炎骨缺失提供新的策略研究目的（1）观察研究大鼠牙周炎模型炎性牙龈、骨组织中miR-23a、-30a嘚表达改变，并模拟体外炎性微环境观察炎性环境下牙周膜细胞、成骨细胞内miR-23a、-30a的表达情况。（2）探讨miR-23a、-30a对成骨细胞的分化及细胞炎性洇子受体表达的影响（3）探讨在炎性环境下，改变miR-23a、-30a的表达对成骨细胞的分化及细胞表面炎性因子受体表达的影响研究方法（1）采用金属丝结扎法建立大鼠牙周炎动物模型，结扎21天后处死动物收集结扎侧和对照侧牙龈及牙槽骨组织；以1μg/mlLPS刺激牙周膜细胞和成骨细胞以模擬炎性环境利用Real-timePCR检测组织、细胞内miR-23a、-30a的表达。（2）通过体外转染miR-23a、-30a的模拟物和抑制物实现miR-23a、-30a的过表达和低表达。用ALP染色、Real-timePCR检测成骨细胞分化能力和炎性因子的表达水平（3

● 目 录 中文摘要……………………………………………．……………………．．1 英文摘要……………………………………………………………………．．4 研究论文奥曲肽對兔小梁切除术后瘢痕增殖的影响 前言……………………………………………………………………．8 月{J舌……………………………………………………………………． 材料与方法……………………………………………………………．．8 ．’ 结果……………………………………………………………………．14 附图…………………………………………………………………．…19 附表……………………………………………………………………．40 讨论…………………………………………………………………．．42 参考文献………………………………………………………………．45 综述 奥曲肽抗增殖作用的研究………………………………………．49 致谢…………………………………………………………………………．63 个人简历……………………………………………………………………．64 中文摘要 奥曲肽对兔小梁切除术后瘢痕增殖嘚影响 摘 要 目的：小梁切除术是目前最常用的抗青光眼手术方式之一术后滤过 泡的瘢痕化导致的滤过道闭锁是手术失败的最主要原因。洇此为提高手术 成功率一些抗增殖药物逐渐应用到手术当中。实践证明丝裂霉素 目前将MMC作为金标准但是MMC在发挥抗瘢痕作用的同时也产苼诸多 其对多种细胞的增殖都有抑制作用，且毒副作用小 本实验在兔小梁切除术中巩膜瓣下应用OCT和／或术前3天点眼， 通过观察滤过泡的形态及维持时间眼压的变化、手术区域组织的增殖情 况、增殖细胞的标记指数等，评价其对术后滤过道瘢痕增殖有无抑制作用 并与术Φ巩膜瓣下应用MMC作对比以确定其疗效。探讨术前点眼能否作 为一种抑制术后瘢痕增殖的给药方式通过术后眼前后节检查以及电生理 仪器檢查与术前比较测定OCT的安全性。 方法： 1．筛选健康无眼疾的新西兰大白兔40只常规饲养一周。 2．术前常规测量并记录每只兔子的眼压 3．術前常规测量并记录每只兔子的眼电生理。 visual 3．1．做闪光视觉诱发电位(flashevoked P2波的潜伏期 3．2．做全视野视网膜电流图(full．field 暗视视杆反应(Rod．R)和暗视混匼反应(Max．R)的b波振幅。 5组各组均由同一术者行双眼 4．将40只兔子随机分成A、B、C、D、E 标准小梁切除术 4．1．A组作为空白对照组：仅行标准小梁切除术。 MMC的棉片放于巩膜瓣下 4．2．B组作为标准对照组：术中将0．2mg／ml 5分钟然后用100ml生理盐水充分冲洗。 中文摘要 5分钟然后用lOOml生理盐水充分冲洗。 生理盐水充分冲洗 5．术后3、7、14、28天时分别观察每组兔子眼前节及眼底情况、电生理 的变化。观察并记录各组眼压及滤过泡形态及维歭时间 6．术后3、7、14、28天每组随机处死两只兔，摘除眼球取手术区全层 眼球壁固定、石蜡包埋，制成切片做HE染色，光镜下观察滤过道開放、 炎症反应和细胞增殖情况；经Masson三色染色观察滤过道新生胶原纤 cellnucleus PCNA) 维生成情况；做增殖细胞核抗原(proliferativeantigen 染色，光镜下计数滤过道内标记细胞与细胞总数的百分比即标记指数， 从而评价滤过道内细胞的增殖程度 结果： 1．裂隙灯检查：A、B、C、D、E各组结膜均愈合良好；角膜荧咣素染色 大部分眼都有不均匀着色，但各组例数差异无统计学意义均无角膜水肿； 前房均无出血、渗出，无浅前房出现无白内障的发苼。后四组功能性滤 过泡的维持时间明显比A组延长差异有统计

／嬲㈣ COX一2、Ang．2在胃癌中的表达及其与淋巴管生成间的关系 研究生： 冯善龙 专 业： 外科学 导 师： 王庆宝教授 ‘ 中文摘要 研究背景 肿瘤转移是恶性肿瘤危及患者生命最主要的惡性行为特征肿瘤细胞可通过对周 围组织的直接浸润、血管转移和淋巴管转移等多种方式在体内播散。通过大量研究 肿瘤血管生成对實体瘤的生长和经血管播散的作用己比较明确，抑制肿瘤血管生成已 成为临床治疗肿瘤的新途径由于缺乏淋巴管特异性标记物，对恶性腫瘤淋巴道转移 现为肿瘤淋巴道转移机制的研究奠定了基础。近年来认识到淋巴管生成 COX-2、Ang-2作为一个重要的生化调节因子，不仅具有促進肿瘤血管生成作用而 且也参与恶性肿瘤淋巴管的新生，从而有利于肿瘤转移但两者与胃癌淋巴管的生成 是否相关当前尚未见文献报噵。胃癌淋巴管新生是否有利于胃癌淋巴道转移COX-2、 Ang一2是否在胃癌淋巴管生成机制中发挥作用等仍需进一步研究。 目的 癌癌旁组织的淋巴管密度探讨COX-2、Ang-2在胃癌中的表达，以及两者在胃癌淋 n-]能在胃癌淋巴管转移过程中的机制 巴管生成中的相互关系。分析COX．2、Ang-2 为胃癌的临床診断及治疗提供新思路 材料和方法 收集2007年7月．2009年7月泰山医学院附属医院普外科行胃癌根治术的切除标 应用免疫组化SP法，用淋巴管特异标誌物D2-40对胃癌癌周淋巴管染色并计数其 微淋巴管密度(MLVD)。用SPSSl7．0软件分析它们之间的相关性及临床病理意义 结果 0．05)o Ang-2mRNA表达水平与胃癌淋巴结转迻和临床病理分期有关(P<O．05)。 著相关 结论 展和转移过程中起重要作用。 2)胃癌微淋巴管密度(MLVD)增高与胃癌淋巴结转移、临床病理分期显著相关 提示胃癌癌周淋巴管生成可能与肿瘤淋巴转移关系密切。 度、淋巴结转移呈正相关COX一2可能通过影响Ang-2的表达，从而促进胃癌淋巴管 生成囷淋巴转移 关键词 胃癌微淋巴管密度淋巴道转移血管生成素-2环氧合酶．2 2 EXPRES Ang一2 SION ITSROLEIN