进行western blotblot成像是选择CCD还是选择扫描式的呢?

  三种检测方法最先出现的是Southern blot是1975年由英国人Southern创建,用于研究DNA图谱的基本技术;

blotting的变形对双向电泳后蛋白质分子的印迹分析称为Eastern印迹法.所谓的双向电泳是先用等电聚焦-聚丙烯酰胺凝胶电泳(IEF-PAGE)分离蛋白质,然后也是将蛋白质的分离区带、以电驱动转移方式进行了印迹但是对Eastern blot这种叫法并没有得到大家嘚认可,所以现有的印记部分主要是前三种

表1 三种检测方式应用范围与原理

  实验步骤:DNA提取—琼脂糖凝胶电泳—凝胶预处理—转膜—探针标记—封闭—杂交—洗膜—压片—放射自显影。

      泳道14为DNA maker泳道1-12为未知样本,泳道13为空白对照将端粒限制酶片段转移到尼龙膜上,並通过化学荧光检测系统成像根据端粒DNA的迁移距离与已知分子量的DNA标记物进行比较,分别分析含有不同DNA样本的每条通道端粒限制酶片段嘚长度

  ,一经采纳将给予稿费】

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western blot blot实验怎么进行上样呢?就是每个孔該加些什么,因为从来没接触过这个实验,所以很迷茫呀!
首先要设计上样的顺序,一般是让与抗体有反应的样品和没有反应的样品间隔开,这样条帶之间反差比较明显.比如你的检测样能够与抗体反应,上样就是maker—阳性对照—阴性对照—检测样(N个),如果检测样比较多,可以在检测样...
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