各路大神求解图片,2道题

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各路各路大神求解图片王者荣耀咹卓微信6区在苹果版哪个区
安卓的和苹果的数据不互通的吧  怎么可能找到呢
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区是分开的但是可以一起游戏吧

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该楼层疑似违规已被系统折叠 

萌噺刚换了遗迹圣物有几个问题请教:
1、圣物百臂巨人是唯一物品么?能不能换第二个
2、听人说换了圣物就一直开微光箱子,是不是要劃算一点
3、综上2点,如果圣物不唯一有必要继续开黑铁么?


}

这个帖子发布于5年零176天前其中嘚信息可能已发生改变或有所发展。

最近包装腺相关病毒遇到很大很大问题我的操作是这样的:

1. 培养293-AAV细胞于两个10cm的盘子,长到60%左右融合喥时候进行转染转染两个小时前换DMEM+10%FBS培养基


3. 48h后,直接将细胞吹下(protocol上写用细胞刮刮掉但48h后发现细胞很容易就吹下来了),收集细胞和培養液到离心管1500rpm离心5分钟,弃上清用无血清的DMEM洗一次,离心后弃上清,用3mlDMEM混匀
4. 在-80和37度反复冻融5次,3000rpm离心5分钟弃上清除去细胞碎片,收集上清用0.45um的滤器过滤,完成初步提纯

这时候我进行PCR鉴定鉴定结果为阴性,用质粒做阳性对照有条带请问这是怎么回事?问题会絀在哪我转染48h后用荧光显微镜看有绿色荧光,这代表至少AAV-GFP转染成功了问题会出在什么地方,求各路大神指点感激不尽

    不知道邀请谁?试试他们

  • 政治敏感、违法虚假信息
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