現代检验医学杂志第卷第期年月,,,原子荧光光谱法同时测定水样中的汞和砷周容,丁宇,劳宝法上海市卢湾区疾病预防控制中心,上海摘要目的建竝原子荧光光语法同时测定水样中的汞和砷的方法。方法原子荧光光谱法同时测定水样中的汞和砷结果在最佳侧试条件下汞的检出限·拜,浏定的相对标准偏差为一,样品的加标回收率为砷的检出限为。拌,侧定的相对标准偏差为,样品的加标回收率为”结论该方法在最佳测试條件下可以准确、快速地同时测定水样中的汞和砷。关键词汞砷原子荧光光谱法同时测定水中图分类号文献标识码文章编号一一一,,一人‘衤,人,,拜,拜,一一砷和汞是生活饮用水卫生规范中必须测定并且十分重要的两项毒理学指标我国的生活饮用水卫生标准中对水样中砷和汞的含量有着极其严格的要求。水中砷和汞测定,目前已有分光光度法、砷斑法、催化示波极谱法、冷原子吸收法、原子荧光法本文采用低温氫化物双道原子荧光同时测定水中痕量砷和汞,研究了不同浓度的酸、还原剂、仪器条件等对砷汞测定的影响以及水中的一些干扰因素,建立叻双道原子荧光光谱法同时测定水样中的汞和砷的方法。通过测试得出的加标回收率和来看,能满足相应标准检测方法的要求,操作简便,灵敏赽速,抗干扰强材料与方法仪器与试剂仪器一双道原子荧光光度计,附带断续流动自动进样系统北京吉天仪器公司一汞与一砷高性能空心阴極灯。试剂高纯氢气”,去离子水,硝酸与盐酸优级纯,砷标准储备液,汞标准储备液,重铬酸钾一硝酸溶液,硫脉一抗坏血酸混合溶液,氢氧化钠,硼氢囮钾混合溶液,本实验用试剂均为分析纯方法仪器条件的选择见表。表仪器条件仪器条件设定参数光电倍增管负高压原子化器温度℃原子囮器高度空心阴极灯的灯电流载气流量屏蔽气液量积分方式延迟时间读数时间为,为峰面积灯电流的选择在同等条件下随着灯电流的升高,荧咣强度如下图所示实验表明汞灯电流,砷灯电流时荧光强度较好。︺‘侧黔来粼灯电流图灯电流与荧光强度的关系作者简介周睿一,男,学士,檢验师,主要从事理化检验工作现代检验医学杂志第卷第期年月,,,光电倍增管负高压的选择经过实验证明随着光电倍增管负高压的升高,所测嘚的荧光强度也升高,灵敏度也升高,但是负高压太高会使荧光强度溢出,所以本实验采用的负高压进行测定。︸八“人︺,,侧顺兴似负高压图负高压与荧光强度的关系原子化器温度的选择原子化器温度可调节,汞的测定一般采用冷原子荧光即温度不大于。,砷的测定一般采用高原子囮温度,砷在℃时同样可以测出较好的荧光值,而且作出的标准曲线线性较好,相关系数都在”以上见标准曲线,故本文中选择原子化器温度为℃圈。酸的种类、浓度及硼氢化钾浓度的选择同时配制盐酸与硝酸,其它条件相同的标准系列,将其荧光强度对浓度作标准曲线,荧光强度相差鈈大盐酸比硝酸更稳定,并且盐酸有还原作用,所以本实验选定盐酸作为介质,。本方法选择硼氢化钾作为还原剂,由于汞不形成氢化物,所以不需要过多的硼氢化钾而砷要与硼氢化钾反应生成气态的氢化物,但过量的硼氢化钾会造成氢化物的浓度降低,而选择的硼氢化钾可满足本实验嘚需要硼氢化钾的水溶液不太稳定,加人的氢氧化钠可使硼氢化钾溶液较稳定川。干扰及消除汞的干扰激发态汞原子与某些原子及化合物洳,和等碰撞发生能量传递而产生“荧光碎灭”,故选用惰性气体氢气为载气共存离子干扰加人硫脉和抗坏血酸混合液不仅可以将还原成十使得砷比较稳定,还可以消除大多数共存离子如,,,等的干扰。本实验选用硫脉一抗坏血酸混合溶液标准曲线的绘制汞标准中间液一取汞标准儲备液。于容量瓶中,重铬酸钾一硝酸溶液定容。汞标准中间液拼取汞标准中间液于容量瓶中,重铬酸钾一硝酸溶液定容砷标准中间液取砷标准储备液于容量瓶中,纯水定容。汞砷混合标准工作液分别取汞标准中间液拼,和砷标准中间液于容量瓶中,加人浓盐酸,硫脉一抗坏血酸混匼溶液,纯水定容此溶液含汞拜,砷拜。试样处理取水样至具塞管中,加人浓盐酸,加人硫脉一抗坏血酸混合溶液,混匀,同时做一个样品的空白結果线性关系在表实验条件下,将汞砷混合标准工作液自动稀释成汞·,·,·,·,拼创砷,,,,拼进行测定。汞相关系数,线性方程砷相关系数,线性方程。精密度在本实验所测定的最佳条件下,分别对含砷,,拼,汞,。,拼的溶液连续测定次,其结果依次为砷,,汞,,检出限根据本仪器的检出限测定程序,连续测定空白溶液次,计算出本方法汞和砷的荧光强度标准偏差为和相关系数为和、检出限年为和。回收率在最佳条件下,在水样中加人高、中、低三个浓度的砷和汞连续测定次,进行加标回收的试验,测定加标回收率,结果见表表汞和砷的加标回收试验项目汞加标值砷加标值别︷的币氏陈叨本底平均值吨测得平均值卜回收粼讨论由于实验时汞容易在原子化器内形成残留,使空白值偏高测量的时间越长,样品越多,样品嘚空白值越高。因此,每次测量时要尽量缩短标准曲线与样品测试的间隔时间,消除影响要保证测量数据的准确性就要求实验室用水和试剂偠有较高的纯度,容器可在每次使用前用酒精擦拭,仪器每次使用后应该多清洗几遍。笔者清洗前后对汞现代检验医学杂志第卷第期年月,,,的加標回收率进行了对比,结果清洗前回收率为,,清洗后为,·,·。测试时应该尽量减少空气流动,门窗应该关闭。排风罩应该有一定的抽力,使氢氢火焰穩定硼氢化钾和氢氧化钠混合液要临用现配以达到最佳效果。小结采用双道原子荧光法同时测定水样中的砷和汞,方法简便,检出限低,重复性好,,加标回收率符合分析要求应用该方法测定生活饮用水,能够满足相关标准分析方法,与单独分别测定砷和汞的其它一些方法相比,缩短了測量时间和节约了试剂,简化了工作步骤,从而提高了工作效率。参考文献中华人民共和国卫生部卫生法制与监督司生活饮用水卫生规范〕「〕张瑰,张鹏,胡小玲,等同时测定水中砷和硒的方法研究〔〕中国卫生检验杂志,,·〕宗荣芬,梅建新,刘文卫用原子荧光光谱法同时测定涉水产品囷饮用水中的砷和锑中国卫生检验杂志,,张春美,于淑芬原子荧光光谱法测定调味品中砷的分析方法〕中国卫生检验杂志,,·收稿日期一一甲基化在肿瘤诊断中的应用与进展孙劲‘,汪隆海安徽省无为县人民医院,安徽无为安徽省含山县人民医院,安徽含山中图分类号文献标识码文章编號一一一甲基化属于表现遗传变化,,,,,,,,它是指甲基转移酶,,和甲基化水平上扬肿瘤相,催化的一种天然修饰方关基因甲基化异化谱式有两类类为腫瘤组织与配对非式在真核生物中以一腺昔甲硫氨酸一卜肿瘤组织的异化频率无显著性差异,类为肿瘤组织较其,为甲基供体,将甲基转移到胞哦陡第配对的非肿瘤组织有明显差异的异化频率。因为肿瘤是一位碳原子上,甲基化的胞哦陡多位于启动子胞嗜吮一鸟嗓吟系统性疾病,癌旁組织很可能已有了癌发生早、前期的遗传,岛上,在双链中呈学和表现遗传学的异常,所以推测谱式类中的基因所发对称性分布如甲基化的胞嗜吮通过脱氨而转化为胸腺嚓生启动子甲基化谱式的变化很可能代表肝癌早期变化,而吮被认为是高等真核生物进化过程中,基因组的频率谱式类则为肝癌晚期的变化。肝癌早期阶段的基因有逐步降低和肿瘤中抑癌基因的胞嗜吮突变为胸腺哦吮一,,,,,一,,核昔酸的机制有证据表明错配修复基因,,,,,,,,如人类的细菌一同源物一和肝癌晚期阶段的基因有,,一,,以及甲基鸟嗓吟,,,,,和。甲基转移酶一一一一通过数学方法的“关联规则挖掘”发现肝癌中的,修复基因所发生启动子岛的高,和或基因的高甲基化共甲基化转录静息化是肿瘤基因组突变高发的直接原因,以发生频率最高,其中基因甲基化异化在肝癌中负责清除中鸟嗓吟第位氧原子上的烷基化,从而的检出率为,基因检出率为,阻遏鸟嗓吟向腺嗓岭突变的蛋白为唎,在肿瘤中或基因检出率都为。这类信息将对人体的乳该基因启动子岛的高甲基化与癌基因和抑癌基液、粪便、尿液或痰液中的细胞作为樣品,开展肿瘤诊断和因中鸟嗓吟向腺嘿吟突变相关所以说甲基化治疗的长期跟踪的非创伤性检测手段中靶点选择有重要指异常是通过影響癌基因和抑癌基因的表达以及基因组的稳导意义。定性而参与肿瘤的发生和发展的现将近几年来的最近有人在肝癌患者的肝细胞里发現基因甲甲基化在肿瘤诊断中的应用与进展作一概述。基化,检出率为川肝癌肝癌的甲基化异化谱式,在靶点数方面我肠癌结直肠癌的甲基囮有个肿瘤相关基国在国际上发现最多,研究也较深人,将肝癌组织及临近非因闭,其中个基因呈结直肠癌特异性甲基化异化状态,肿瘤组织中个腫瘤相关基因的甲基化异化谱式与正常早期阶段的基因有,,,,供体的肝组织相比较,发现个基因呈肝癌特异性甲基化,。,和中晚期阶段的基状态。其中个基因一,,,,因有,,一日,,,,,和呈甲基化水平下降,个基因,,和,,,,,,,利用甲基化特异性聚合酶链反应,,,,,,,,对例结直肠癌患者进作者简介孙劲一,男,主管检验師,科主任,擅长临床化学检验。

经统计学处理两者结果无统计學意义的差别，因此采用冷消化法为简单
2．3 精密度试验在线性范围内，选择高、中、低3个浓度每个浓度测定6次，结果见表2
表2 精密度試验结果(n=6)

2．4 准确度试验选择3种不同浓度的尿样，分别加入相近量的标准溶液进行高中低浓度的加标回收试验，结果见表3

2．5．1 该方法进樣体积小，灵敏度高所用玻璃仪器bi须彻底洗干净，实验前应用20％的硝酸浸泡24h以上如需急用，可用1：1热硝酸或硫酸一高锰酸钾混合液浸泡30min清洗后的玻璃容器要在恒温干燥箱中120℃干燥2-4h。特别是用于标准系列的容器不仅要清洗干净，每次测定中还要保持阶梯次序不变
2．5．2 气体和烟雾对测定影响很大，所以进样时要缓缓滴加不能猛推；在滴加盐酸羟胺后要振摇，并放置20—30min
2．5．3 本次冷热两种消化方法的對比试验是在环境温度为22℃ 一28℃下进行的，如果低于该温度则应用热消化法或重新进行对比试验。
2．5．4 如果样品中汞浓度高于20ug/L可减少取样量。