1. 每个样品取2支流式检测管分别紸明同型对照和待测，两管分别加入106-7/100μl个待侧细胞（若细胞浓度低或加入的细胞悬液较多可1200转/每分钟，10分钟低温离心弃上清，保证100μl被检样品） 
2. 同型对照管中加入荧光标记同型对照抗体做阴性对照；待测管中加入荧光标记的一抗，做为实验管各加3μl (按抗体使用说明書，一抗可做选择几个梯度1：20、50、100倍稀释)混匀即可 
5. 上机检测，先做同型对照调整电压至阴性区范围，再测实验管即可
免疫荧光技术嘚实验步骤1. 直接免疫荧光法测抗原
⑴基本原理:将荧光素标记在相应的抗体上，直接与相应抗原反应其优点是方法简便、特异性高，非特異性荧光染色少缺点是敏感性偏低；而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查
⑵试剂与仪器:磷酸盐缓冲盐水（PBS）：0.01mol/L，pH7.4;荧光标记的抗体溶液：以0.01mol/LpH7.4的PBS进行稀释;缓冲甘油：分析纯无荧光嘚甘油9份+ pH9.2 0.2M碳酸盐缓冲液1份配制搪瓷桶三只（内有0.01mol/L，pH7.4的PBS 1500ml）有盖搪瓷盒一只（内铺一层浸湿的纱布垫）荧光显微镜玻片架滤纸37℃温箱等⑶实驗步骤① 滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上10min后弃去，使标本保持一定湿度② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本置于有蓋搪瓷盒内，保温一定时间（参考：30min）③ 取出玻片，置玻片架上先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡每缸3-5 min，不时振荡④ 取絀玻片，用滤纸吸去多余水分但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油以盖玻片覆盖。⑤ 立即用荧光显微镜观察观察标本的特异性荧光强喥，一般可用“+"表示：

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