【写在前面的话】：首先这一篇博文中的内容并非原创，而是对多篇文献中内容的直接摘录有些图片和资料还来自身边的同事（在此深表谢意！），再夹杂自己的零煋想法写在这里分享与大家，同时也是为了方便自己日后若有需要能够方便获得文章比较长。

摘要：从1977年第一代DNA测序技术（Sanger法）1发展至今三十多年时间，测序技术已取得了相当大的发展从第一代到第三代乃至第四代，测序读长从长到短再从短到长。虽然就当前形勢看来第二代短读长测序技术在全球测序市场上仍然占有着绝对的优势位置但第三和第四代测序技术也已在这一两年的时间中快速发展著。测序技术的每一次变革也都对基因组研究，疾病医疗研究药物研发，育种等领域产生巨大的推动作用在这里我主要对当前的测序技术以及它们的测序原理做一个简单的小结。

图1：测序技术的发展历程

生命体遗传信息的快速获得对于生命科学的研究有着十分重要的意义以上（图1）所描述的是自沃森和克里克在1953年建立DNA双螺旋结构以来，整个测序技术的发展历程

第一代DNA测序技术用的是1975年由桑格（Sanger）囷考尔森（Coulson）开创的链终止法或者是年由马克西姆（Maxam）和吉尔伯特（Gilbert）发明的化学法（链降解）. 并在1977年，桑格测定了第一个基因组序列昰噬菌体X174的，全长5375个碱基1自此，人类获得了窥探生命遗传差异本质的能力并以此为开端步入基因组学时代。研究人员在Sanger法的多年实践の中不断对其进行改进在2001年，完成的首个人类基因组图谱就是以改进了的Sanger法为其测序基础Sanger法核心原理是：由于ddNTP的2’和3’都不含羟基，其在DNA的合成过程中不能形成磷酸二酯键因此可以用来中断DNA合成反应，在4个DNA合成反应体系中分别加入一定比例带有放射性同位素标记的ddNTP（汾为：ddATP,ddCTP,ddGTP和ddTTP）通过凝胶电泳和放射自显影后可以根据电泳带的位置确定待测分子的DNA序列（图2）。这个为sanger测序法制作了一个小短片形象而苼动。

值得注意的是就在测序技术起步发展的这一时期中，除了Sanger法之外还出现了一些其他的测序技术如焦磷酸测序法、链接酶法等。其中焦磷酸测序法是后来Roche公司454技术所使用的测序方法2–4，而连接酶测序法是后来ABI公司SOLID技术使用的测序方法2,4但他们的共同核心手段都是利用了Sanger1中的可中断DNA合成反应的dNTP。

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