mRNA及其蛋白表达量在肥厚与非肥厚腰椎黄韧带中的表达进行检测,探讨其在腰椎黄韧带肥厚中的作用背景:黄韧带肥厚的分子机制还不清楚,有研究发现,腰椎黄韧带细胞进行培養后牵拉后TGF-β1分泌增加,然而多因子在黄韧带肥厚中的作用还未见相关报道。方法:组织实验:对照组6例、腰椎黄韧带肥厚组6例、突出组6例,对各組黄韧带中bFGF、TGF-β1、CTGF及胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、V的mRNA含量用RT-PCR的方法进行检测,用Western
Blot法检测bFGF、FGF-β1、CTGF产物在各组黄韧带中的表达细胞实验对黄韧带进行培养,加入不同浓度的bFGF、FGF-β1干预后对细胞检测胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、V的mRNA含量,用培养液以Elisa法检测胶原蛋白Ⅰ、Ⅲ、V产物的表达。结果:组织学研究发现,bFGF、TGF-β1
mRNA在肥厚组中的表达均明显高于突出组和对照组(P0.05,P0.05),在突出组中的表达稍低于对照组,但两组比较没有统计学意义(P0.05);CTGFmRNA在三组之间表达无统计学差异(P0.05);Western
blot檢测发现bFGF、TGF-β1在肥厚组中均有明显表达,且多于对照组COLⅠmRNA在肥厚组中的表达均明显高于对照组和突出组(P0.05,P0.05),在突出组和对照组没有统计学意义(P0.05);COLⅢ、V
mRNA在三组中的表达无统计学差异(P0.05)。细胞实验发现:TGF-β1、bFGF对COLⅠ、ColAⅢmRNA表达有显著意义(p0.01),两个因素对COLⅠRNA有交互作用,TGF-β1占主要作用;对ColAⅢmRNA没有交互作用,bFGF占主要作用细胞培养液检测各型胶原蛋白产物发现:bFGF、bFGF对COLⅠ表达有显著意义,(p0.01),两个因素没有交互作用,两个因素中bFGF占主要作用;TGF-β1对COLⅢ有显著意義(p0.01),bFGF对COLⅢ无显著意义(p0.05)。结论:bFGF、TGF-β1在腰椎黄韧带肥厚形成过程中有重要作用,引起黄韧带肥厚的主要胶原产物为COLⅠ、Ⅲ,前者主要引起COLⅢ的增多,而後者主要影响COLⅠ的增多
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