知识点梳理
1、获取目的基因是实施基因工程的第一步。2、基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。3、将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。4、目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。
基因工程又叫基因拼接技术或DNA重组技术． 这种技术是在体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物．通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的个别基因复制出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向改造生物的遗传性状．
整理教师:&&
举一反三（巩固练习，成绩显著提升，去）
根据问他()知识点分析，
试题“下图(一)为某基因工程中利用的质粒筒图，小箭头所指分别为限制...”，相似的试题还有：
回答下列关于基因工程的问题下图1是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线，表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图2、图3中箭头表示相关限制酶的酶切位点。(1)若对图2中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性如何变化，为什么？_____________。(2)图中将人乳铁蛋白基因插入质粒，可以只用EcoRⅠ同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，也可以使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时酶切质粒和人乳铁蛋白基因，后一个方法的优点在于可以防止__________。(3)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入__________酶。重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_____________。(4)图1过程①可采用的操作方法是____________，过程②可采用的生物技术是_____________。过程③可采用的生物技术是________________。(5)分别从分子水平简述雌性转基因牛分泌人乳铁蛋白的过程是___________________。
(选做题)下图为某种质粒表到载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因，tctR为四环素抗性基因，P启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答：(1)将含有目的基因的DNA与质粒该表达载体分别用EcoRI酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有__________、_________、__________三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行_____________。(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是_____________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物____________。(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是__________，其合成的产物是____________。(4)在上述实验中，为了防止目的基因和基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是_____________。
下图为某种质粒表达载体简图，小箭头所指分别为限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位点，ampR为青霉素抗性基因。tetR为四环素抗性基因，P为启动子，T为终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。据图回答：(1)将含有目的基因的DNA与质粒表达载体分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有________、_______、_______三种。若要从这些连接产物中分离出重组质粒，需要对这些连接产物进行___________。(2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有___________。(3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是，其合成的产物是_____________。(4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒表达载体在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是________________。提问回答都赚钱
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关于质粒DNA的叙述，正确的是(
A．含有各种抗生素的抗性基因
B．具有独立复制功能
C．具有编码蛋白质的
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关于质粒DNA的叙述，正确的是( & &)。 & &A．含有各种抗生素的抗性基因 & &B．具有独立复制功能 & &C．具有编码蛋白质的功能 & & & &D．含有感兴趣的目的基因
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根据问他()题库系统分析，
试题“回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。（9分）pIJ702是...”，相似的试题还有：
回答下列有关遗传信息传递和表达的问题。(9分) 上图表示利用致病病毒M的表面蛋白基因和无害病毒N，通过基因工程制作重组M病毒疫苗的部分过程。其中①~⑤表示操作流程，a~h表示分子或结构。据图回答问题。(1)．基因工程除了微生物基因工程外，还有_____。在上图所示过程中，获取目的基因的步骤是流程&&&&&&&(用图中编号回答)；在流程③中必需实施的步骤有_____。(2)．在上图所示的整个过程中，用作运载体的DNA来自分子_____(用图中字母回答)。(3)．下列关于质粒运载体的说法正确的是_____(多选)。A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达F．没有限制酶就无法使用质粒运载体(4)．据图比较结构g和结构h的异同，并解释产生差异的原因_____。
回答下列有关遗传信息传递和表达的问题。(9分)上图表示利用致病病毒M的表面蛋白基因和无害病毒N，通过基因工程制作重组M病毒疫苗的部分过程。其中①~⑤表示操作流程，a~h表示分子或结构。据图回答问题。(1)．基因工程除了微生物基因工程外，还有_____。在上图所示过程中，获取目的基因的步骤是流程()(用图中编号回答)；在流程③中必需实施的步骤有_____。(2)．在上图所示的整个过程中，用作运载体的DNA来自分子_____(用图中字母回答)。(3)．下列关于质粒运载体的说法正确的是_____(多选)。A．使用质粒运载体是为了避免目的基因被分解B．质粒运载体只能在与目的基因重组后进入细胞C．质粒运载体可能是从细菌或者病毒的DNA改造的D．质粒运载体的复制和表达也遵循中心法则E．质粒运载体只有把目的基因整合到受体细胞的DNA中才能表达F．没有限制酶就无法使用质粒运载体(4)．据图比较结构g和结构h的异同，并解释产生差异的原因_____。
回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。(9分)pIJ702是一种常用质粒(下图)，其中tsr为刘链丝菌素(一种抗生素)抗性基因；mel是黑色素合成基因，其表达能使白色的链霉菌菌落变成黑色菌落；而限制酶ClaI、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在PIJ702上分别只有一处识别序列。1.质粒DNA分子中的两条链靠______键维系成双链结构。2.以SacI和SphI切取的目的基因置换PIJ702上0.4kb(1kb=1000对碱基)的SacI/SphI片段，构成重组质粒pZHZ8。上述两种质粒的限制酶酶切片段长度列在上表中。因此判断目的基因内部是否含有BglⅡ切割位点，并说明判断依据________。3.已知PIJ702上含mel基因的ClaⅠ/PstⅠ区域长度为2.5kb，若用ClaⅠ和PstⅠ联合酶切pZHZ8，则参照表数据可断定酶切产物中最小片段的长度为______kb。4.不含质粒的链霉菌在含硫链丝菌素固体培养基上的生长状况如下表所示。若要筛选接纳了PIJ702或pZHZ8 的链霉菌细胞，所需的硫链丝菌素最小浓度应为______μg/mL (填写表格中给定浓度)；含有重组粒pZHZ8的菌落呈_____色。5.上述目的基因来源于原核生物，其蛋白编码序列(即编码从起始密码子到终止密码子之间的序列)经测定为1265对碱基，试判断对这段序列的测定是否存在错误：_______,并说明依据_______.相关知识点：
下列有关基因工程的说法正确的是A．DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端形成氢键B．用氯化钙处理大肠杆菌可增加其细胞膜的通透性C．限制性核酸内切酶能切断DNA中磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键D．用质粒中的抗生素抗性基因可以筛选出含有重组DNA的植物细胞 [质粒、磷酸二酯键、基因工程、通透性、氯化钙、大肠杆菌、重组、抗生素抗性基因]
下列有关基因工程的说法正确的是 A．DNA可把目的基因与载体的黏性末端形成氢键 B．用氯化钙处理大肠杆菌可增加其细胞膜的通透性 C．限制性核酸内切酶能切断DNA中磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键 D．用质粒中的抗性基因可以筛选出含有重组的植物细胞
答案:C【解析】试题分析：DNA作用的是磷酸二酯键，故A错误。用氯化钙处理大肠杆菌可增加其细胞壁的通透性，故B错误。核酸内切酶作用的是磷酸二酯键，故C正确。用质粒中的抗性基因可以筛选出含有重组质粒的细胞，故D错误。考点：本题考查基因工程相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。
相关知识点：
[下列有关基因工程的说法正确的是A．DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端形成氢键B．用氯化钙处理大肠杆菌可增加其细胞膜的通透性C．限制性核酸内切酶能切断DNA中磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键D．用质粒中的抗生素抗性基因可以筛选出含有重组DNA的植物细胞 [质粒、磷酸二酯键、基因工程、通透性、氯化钙、大肠杆菌、重组、抗生素抗性基因]]相关内容：
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