求限定性核酸内切酶？？_机械行业_百科问答
求限定性核酸内切酶？？
提问者:钱时伦
限制性核酸内切酶
限制性核酸内切酶是能够识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶，简称限制酶。凭据限制酶的布局,辅因子的需要切位与作用方法，可将限制酶分为三品种型，分离是第一型（Type I）、第二型（Type II）登科三型（Type III）。Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。III型限制性内切酶同时具备润饰及认知切割的作用。 目次 限制性内切酶的定义：限制性内切酶的由来限制酶的漫衍限制性内切酶的分类和性子用处定名范例第一型限定酶第二型限制酶第三型限制酶 限制性内切酶的界说：　　是识别DNA的特异序列，并在辨认位点或其四周切割双链DNA的一类内切酶。限制性内切酶的由来　　一样平常因此微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组限制性核酸内切酶成，第四个字母表示菌株(品系)。比方，从Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性内切酶称为Bam H，在统一品系细菌中失去的识别不同碱基顺序的几种差别特异性的酶，可以编成不同的号，如HindII、HindIII,air force 1 low shoes，HpaI、HpaII，MboI、MboI等。 限制性内切酶（restriction endonuclease）:一种在特别核甘酸序列处水解双链DNA的内切酶。Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。 　　别号 Endodeoxyribonuclease简称限制酶 　　酶反应 限制性内切酶能破裂DNA分子在一限定命目标专一部位上。它能识别外源DNA并将其降解。 　　单元定义 在指明pH与37℃，在0.05mL反映混淆物中，1小时消化1&g的&DNA的酶量为1单位。 　　性状成品不含非埋头的核酸水解酶(由10单位内切酶与1&g &DNA，保温16小时所得的凝胶电泳图谱的不乱性表现)。限制酶的分布　　限制性核酸内切酶分布极广，险些在全部细菌的属、种中都发现至多一种限制性内切酶，多者在一属中就有几十种，例如在嗜血杆菌属中(Haemophilus)现已发现的就有22种。有的菌株含酶量极低，很难分离定性；然而在有的菌株中，酶含量极高．如E. coli的pMB4(EcoRI酶)和H. aegyptius(Hal III酶)便是高产酶菌株。据报导从10g的H. aegyptius的细胞中，能分离提纯出可消化l0g&噬茵体DNA的酶量。到现在为止，细菌是限制性内切酶，尤为是特异性无比强的I类限制性内切酶的重要来源。限制性内切酶的分类和性质　　根据酶的功效特征、巨细及反合时所需的帮助因子，限制性内切酶可分为两大类，即I类酶和II酶。最先从大肠杆菌中发现的EcoK、EcoB就属于I类酶,NFL Jerseys Sale。其分子量较大；反应历程中除需Mg2+外，还必要S-腺苷-L甲硫氨酸、ATP；在DNA分子上不特异性的酶解片断，这是I、II类酶之间最显明的差别。因而，I类酶作为DNA的阐发东西代价不大。II类酶有EcoR I、BamH I、Hind II、Hind III等。其分子量小于105道尔顿；反响只要Mg2+；最紧张的是在所识另外特定碱基顺序上有特异性的切点，于是DNA分子颠末II类酶作用后，可发生特异性的酶解片断，这些片段可用凝胶电泳法举行分离、辨别。 　　限制性内切酶识别DNA序列中的回文序列。有些酶的切割位点在回文的一侧(如EcoR I、BamH I、Hind等)，因而可形成粘性末端，另一些II类酶如Alu I、BsuR I、Bal I、Hal III、HPa I、Sma I等，切割位点在回文序列中心，造成平坦末了。Alu I的切割位点如下： 　　5'-A G^C T-3' 　　3'-T C^G A-5' 　　在已发明的限制性内切酶中,mlb jerseys cheap,[记忆-从此全部删除]　　　　　?过年了！难忘的一年? - Qzone日志，近百种酶的识别顺序已被测定,air force one low。有不少泉源不同的酶有相同的碱基识别顺序，这种酶称为&异源同功酶&(isochizomer，同切限制内切酶；同裂酶)。应当细致的是，这些酶固然有相同的识别顺序，但它们的切点并不彻底同样。例如Xma I和Sma I都识别六核苷酸CCCGGG，但Xma I的切点在cCCGGG，而Ema I的切点则在CCCGgGG，前者切割DNA分子，形成带有CCGG粘性末真个DN*断，尔后者并不构成粘性末端。固然，也有识别顺序和切点都相同的酶，如Hap II、Hpa II、Mno I，都在识别次序CCGG内有一相同的切点，Hal III和BsuR I同样在识别顺序GGCC内有一雷同的切点。用途　　用于DNA基因组物理图谱的组建；基因的定位和基因分散；DNA分子碱基序列分析；比力相关的DNA分子和遗传工程。 　　限制酶一般不切割本身的DNA分子，只切割外源DNA,mlb jerseys。命名　　限制酶的命名是依据细菌种类而定，以EcoRI为例： 　　EEscherichia(属)cocoli(种)RRY13(品系)I起首发如今此类细菌中发现的顺序类型　　根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式，可将限制酶分为三种类型，分手是第一型（Type I）、第二型（Type II）中举三型（Type III）,致每一个人，凡是皆有可能。 - Qzone日志。第一型限制酶　　同时具有修饰(modification)及认知切割(restriction)的作用；尚有认知(recognize)DNA上特定碱基序列的本领，通常其切割位(cleavage site)间隔认知位(recognition site)可达数千个碱基之远。例如：EcoB、EcoK。第二型限制酶　　只具有认知切割的作用，修饰作用由其余酵素进行。所认知的地位多为短的回文序列(palindrome sequence)；所剪切的碱基序列通常即为所认知的序列。是遗传工程上,人生原理 - Qzone日记，适用性较高的限制酶种类。例如：EcoRI、HindIII。第三型限制酶　　与第一型限制酶雷同，同时拥有修饰及认知切割的作用。可认知短的不合错误称序列，切割位与认知序列约距24-26个碱基对。例如：EcoPI、HinfIII。 词条图册更多图册 扩大浏览： 1 http://nar.oxfordjournals.org/cgi/content/full/31/7/1805 2 国民卫生出书社 生归天学 第七版 凋谢分类： 生物化学，酶，生物学，份子生物学 &限制性核酸内切酶&相干词条：
回答者:周伟
Mail: Copyright by ；All rights reserved.临床执业医师模拟试题题库
本试题来自：（2010年临床执业医师模拟试题，）A1/A2型题下列哪项不是限制性内切酶识别序列的特点A．特异性很高B．常由4～6个核苷酸组成C．一般具有回文结构D．少数内切酶识别序列中的碱塞可以有规律地替换E．限制性内切酶的切口均是黏性末端正确答案：有， 或者
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基因工程的工具 ——限制性核酸内切酶的特点及作用
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第三章 基因工程工具酶
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内容提示：限制性核酸内切酶
溶菌酶、蛋白酶k等
二、基因工程工具酶的来源
多数来自微生物或噬菌体感染的微生物
限制性核酸内切酶
限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）:是一类能识别双链dna中特定核苷酸序列，并使每
条链的一个二磷脂键断裂的内脱氧核糖核苷酸酶．
限制性核酸内切酶的命名
微生物的属名的第一个大写字母+种名的前两个小写字母+菌株（型）代号字母的缩写
ecor i ----escherichia coli 中r型菌株提
取的第一种内切酶（该基因位于escherichia
coli 中抗药性r质粒上）
hind iii -----haemophilus influenzae
中d菌株中提取的第三种限制性内切酶
1.2 限制性内切酶的种类
目前在细菌中已发现600多种限制性内切酶，
根据其性质不同可分为i、ii和iii等三大类．
* i类和iii类限制性内切酶同时具有核酸内切酶
活性和甲基化活性，属于限制-修饰酶．
* ii类限制性核酸内切酶与所对应的甲基化酶是
分离的，属于不同的酶分子，而且这类酶的识
别切割位 点比较专一，广泛应用于dna的重
组，被称为分子手术刀．
ii类限制性内切酶的作用机制
限制性内切酶的识别序列
二重旋转对称识别序列（二重互补对称）
找出限制酶的识别序
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