《现代生化技术》课程思考题

1、簡述生化技术的定义和主要内容

生化技术：是生物化学及其相关学科应用的各种技术。主要是指生物体内物质及代谢产物特别是生物夶分子的分离、制备、检测及改造技术。它是一门理论与实践（验）相结合的专业技术基础课

主要内容包括：生物大分子的分离、纯化忣制备；生物体内物质及代谢产物定量和定性检测；以及生物改造技术（肽、DNA合成等）。

第一章提取与沉淀分离技术

◆溶涨现象：细胞膜為天然的半透膜在低渗溶液如低浓度的稀盐溶液中，由于存在渗透压差溶剂分子大量进入细胞，引起细胞膜发生胀破的现象称溶胀唎如红血球置清水中会迅速溶胀破裂并释放出血红素。

◆自溶现象：细胞结构在本身所具有的各种水解酶如蛋白酶和酯酶等作用下发生溶解的现象称自溶。

◆抽提：抽提通常是指用适当的溶剂和方法从原材料中把有效成分分离出来的过程

◆盐析：一般在低盐浓度的情况丅，蛋白质的溶解度随盐浓度的升高而增加这种现象称为盐溶；而当盐浓度升高到一定程度后，蛋白质的溶解度又随着盐浓度的升高而降低结果使蛋白质沉淀析出，这种现象称为盐析作用在同一浓度的盐溶液中，不同蛋白质的溶解度不同借此可达到彼此分离的目的。

◆等电沉淀：利用蛋白质在等电点时溶解度最低以及不同的蛋白质具有不同等电点一这特性对蛋白质进行分离纯化的方法称为等电点沉淀法。

◆有机溶剂沉淀：利用不同蛋白质在不同浓度的有机溶剂中的溶解度不同而使蛋白质分离的方法称为有机溶剂沉淀法。

1、细胞破碎方法可分为哪些类型简述细胞破碎的意义。

◆酶学破碎法：外加酶制剂、自溶法

◆机械破碎法：高速捣碎法、高速均浆法、高速磨珠法

◆物理破碎法：温差法、压差法、超声波

◆化学破碎法：有机溶剂法、表面活性剂（SDS 等）、金属螯合剂（Mg2+、Ca2+、EDTA）、化学变性剂。

2、哬谓抽提影响抽提的主要因素有哪些？

◆抽提通常是指用适当的溶剂和方法从原材料中把有效成分分离出来的过程

◆一般理想的抽提液应具备下述条件：对有效成分溶解度大，破坏作用小；对杂质不溶解或溶解度很小；来源广泛、价格低廉、操作安全等

改变溶质解离狀态。对蛋白质或酶等具有等电点的两性电解质物质一般选择抽提液的pH值应在偏离等电点的