人 淋巴细胞的方便来源是外周血分离的原则是收率较高，纯度较好失活较低。

人外周血中各种细胞的密度不同人红细胞密度为.cn

GE Ficoll-Paque 淋巴细胞分离液ficoll是高分子量蔗糖聚合物和泛影酸钠溶液Ficoll-Paque密度梯度介质利用简单快速离心程序从少量或大量血液中有效提取高产和高纯度的活单核细胞。Ficoll-Paque PLUS是无菌即用型产品推荐用于单个核细胞的常规分离。

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GE Ficoll-Paque 淋巴细胞分离液ficoll是高分子量蔗糖聚合物和泛影酸钠溶液Ficoll-Paque密度梯度介质利用简单快速离心程序从少量或大量血液中有效提取高产和高纯度的活单核细胞。Ficoll-Paque PLUS是无菌即用型产品推荐用于单个核細胞的常规分离。

1. 经过严格的质量控制测试
2. 分离所得的细胞存活细胞率>90%
3. 正确存储条件下稳定性至少保持3年

1. Ficoll-Paque PREMIUM,1.077 g/ml单个核细胞分离液适用血液、骨髓和脐带血来源的人单个核细胞分离制备临床研究和细胞治疗生产级别。后续可以通过培养分离得到间充质干细胞
2. Ficoll-Paque PREMIUM 1.073,1.073 g/ml 单个核细胞分离液適用密度较低的人单个核细胞的富集，如间充质干细胞和单核细胞同样应用于临床研究和细胞治疗。
3. Ficoll-Paque PLUS 用于人外周血的单个核细胞分离僅供科研使用。

GE Ficoll-Paque 获得的单个核细胞（含淋巴细胞）悬液具有以下特点：

1. 分离所得的细胞中95 ± 5%为单个核细胞
2. 分离所得的细胞存活细胞率 > 90%
3. 可回收原始的血液样本中60 ± 20%的单个核细胞

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  物理状态：无色液体

  成分：Ficoll-Paque PLUS是一种无菌的、即用型的试剂含有Ficoll PM400、泛影酸钠和②钠钙EDTA。密度已经被优化用于分离外周血的人淋巴细胞。

  人外周血、骨髓和脐带血淋巴细胞分离

骨  髓、胎盘间充质干细胞分离

 密度梯度離心原理

见图以人外周血为例，血液加入Ficoll-Paque密度梯度分离液后离心分层从上到下分四层：

单个核细胞层：淋巴细胞、单核细胞、血小板（骨髓和脐带血等样本还有间充质干细胞）

红细胞和多形核粒细胞比重较大，为1.092左右而淋巴细胞和单核细胞比重较小，为1.075～1.090Ficoll-Paque密度1.077g/mL介于兩者之间，并且分离液中的Ficoll PM400是一种高聚糖能促进红细胞凝集。

使用新鲜血液确保所分离的单个核细胞的活性样本也要加热到18°C - 20°C。

1. 10mL离惢管加入2mL抗凝血和等量的平衡盐溶液

2. 颠倒或吸管混匀血液和缓冲液。

见图去掉聚丙烯盖，插入注射器针头

去掉聚丙烯盖，拉起铝环拉开金属密封，移除银环拿掉橡胶密封，无菌操作吸取需要的Ficoll-Paque分离液

稀释过的血液样本小心铺到Ficoll-Paque分离液上面。

注意：铺样本时小心鈈要和Ficoll-Paque分离液混合

用无菌吸管吸掉上层血浆和血小板，不要碰到单个核细胞层（图4图5）。

无菌吸管转移单个核细胞层到无菌离心管

1. 預估转移的单个核细胞的体积。加入至少3倍体积的平衡盐溶液（约6mL）

2. 用吸管轻柔重悬细胞。

注意：高速离心会加速单个核细胞的回复泹是，低速离心（60-100g）能去除血小板

8. 使用下游所需液体重悬细胞沉淀。

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