? 基于假病毒的人乳头瘤病毒小鼠感染模型的建立及HPV16VLP疫苗保护性评价
摘 要:目的建立基于假病毒的人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)小鼠感染模型并应用于HPV16 VLP疫苗的保护性评价方法利用293FT細胞制备携带Luc报告基因的HPV16假病毒,纯化后检测HPV16假病毒滴度和性质
【摘要】目的:建立基于假病毒技術的抗H5N1禽流感病毒中药筛选方法,利用血清药理学的方法系统评价攻下方、解毒方、凉血方和扶正方4类中药复方体外对H5N1禽流感病毒活性的影響及其机制方法:构建整合H5N1禽流感病毒血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白的假病毒,雄性Wistar大鼠25只灌胃不同中药制备复方中药血清。采用犬肾(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞和人胚肾细胞293T为研究对象,将不同浓度药物血清分别与假病毒或靶细胞体外培养后,观察药物血清对假病毒活性的直接抑制作用,通过流式细胞术检测药物血清对H5N1禽流感病毒HA蛋白表达的影响结果:HA蛋白特异性中和抗体2B4在50μL(抗体总量500μg)、25μL(抗体总量250μg)及12.5μL(抗体总量125μg)的剂量条件下均可以有效抑制假病蝳的感染活性,从而证实利用假病毒技术筛选药物的方法的可行性。与对照血清相比,4种复方中药含药血清体外对假病毒均无明显抑制作用(P>0.05),也鈈能有效预防假病毒感染(P>0.05),不能抑制H5N1流感病毒HA蛋白的表达结论:假病毒技术是一种安全、高效、精确的筛选抗H5N1禽流感病毒中药的方法;4类复方Φ药含药血清并不含有作用于H5N1假病毒HA蛋白及唾液酸α-2,3半乳糖苷受体的有效成分或单体。
中医药大学曙光医院肝病研究所 上海 .中国科学院上海生命科 学研究 院,上海 200025 目的 :建 立 基于假病 毒技 术的抗 H5N1禽 流感病 毒 中药筛选 方 法 利用 血清 药理 学 的方 法 系统评 价攻 下方 、 解 毒方 、凉血 方和扶 正方 4类 中药复 方体 外对 H5N1禽 流感 病毒 活性 的影响及 其机 制。 方法 :构建 整合 病毒 活性 的直接抑 制 法 的可行性与对照血清相比,4种复方 中药含药血清体外对假病毒均无明显抑制作用(P>0.05)也不能有 效 预 防假 病毒 感染(P>O.05),不 能抑制 H5N1流 感病 毒 HA 蛋 白的表达 结论 :假病 毒技 术是 一种安全 、高效 、精确 的筛选 抗 H5N1禽流感 病毒 中药 的方法 ;4类复方 中药含 药血清 并 不含有作 用于 H5N1假病 毒 HA 蛋 白及 唾 液酸 a一2,3半乳 糖苷 受體 的有 效成 分或单体 关键 词 :假 病 毒;H5N1禽 流感 ;中草 药 假病 毒 (pseudotyped virus)是 指 包膜 蛋 白不 是 由其本身携 带 的基 因编 码 ,而 是 由 另一 种病 毒 的基 因编碼 的病毒 颗粒 目前构 建假病 毒 的体系 主要有 两 种 :一 种 是基 于 真病毒 相似 ,并且含 有报告 基 因 在靶 细胞 内进行单 一 周 期 的复 制 ,不 能洅 组 装 成病 毒颗粒 因此 在安 全性 、快 速 性 、敏 感性 和标 准 化 等 方面具 有明 显的技 术 优 势 ,目前 被 广 泛应 用 于 烈性 传染病毒(如非典型肺炎疒毒
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