据魔方格专家权威分析试题“PCR技术(聚合酶链式反应)是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核..”主要考查你对 多聚酶链式反应扩增DNA片段 等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下:
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在解旋酶作用下边解旋边复制 | 80~100℃高温解旋,双链完全分开 |
DNA解旋酶、DNA聚合酶 | |
②四种脱氧核苷酸为原料 ③子链延伸的方向都是从5'端到3'端 |
1、DNA分子复制的人工控制
解开螺旋:在80~100℃时DNA双螺旋打开,形成兩条DNA单链称为变性。
恢复螺旋:在50~60℃左右时两条DNA单链重新形成双螺旋结构,称为复性
复制条件:缓冲液,DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶、两种dna复制需要引物吗
控制仪器:PCR仪(温度周期性自动调节仪)。
2、PCR的含义是多聚酶链式反应
3、PCR技术反应的条件:①穩定的缓冲溶液环境;②DNA模板;③合成dna复制需要引物吗;④四种脱氧核甘酸;⑤DNA聚合酶;⑥温控设备
4、PCR技术最突出的优点是快速、高效、靈活、易于操作。
5、TaqDNA聚合酶的特点是:耐高温
1、DNA含量的测定——分光光度法
DNA在260nm的紫外线波段有一强烈吸收峰,峰值大小与DNA的含量是正相關 |
2μLPCR反应液加入98μL蒸馏水,即将样品进行50倍稀释 |
以蒸馏水作为空白对照在波长260nm处,将紫外分光光度计的赌注调节至零 |
取DNA稀释液100μL至比銫杯中测定260nm处的光吸收值 |
2、DNA聚合酶不恩能够从头合成DNA,只能从DNA的3'端开始延伸DNA链因此DNA复制需要dna复制需要引物吗。
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