温度对鱼类耗氧量的测定能量代謝和耗氧量的影响 一、实验目的 了解外界水温对鱼类耗氧量的测定耗氧量的影响掌握溶氧量测定的基本方法。 二、实验原理 在一个流水系统中当不同温度的水以一定的速度流过呼吸室时，由于鱼类耗氧量的测定的呼吸作用消耗了水中的溶解氧。通过测定呼吸室进水口囷出水口溶解氧和水流量即可计算出某一温度下鱼的耗氧量。 本实验采用温克勒（Winkler）滴定法测定水中的溶氧量 Winkler法测定溶解氧的原理是：在—定量的水样中加适量MnS04和KI-NaOH试剂。生成的Mn(OH)2被水中的溶解氧氧化为褐色沉淀[主要是MnO(OH) 2]、溶液酸化后、沉淀溶解同时析出与溶解氧等当量的遊离碘，用Na2S2O3溶液滴定用淀粉试剂指示终点。各步骤反应式如下： 三、实验对象 鯽鱼 四、仪器与器械 酸式滴定管、滴定架、有塞广口瓶、錐形瓶、移液管、水槽、鱼类耗氧量的测定呼吸室（可是塑料盒或广口瓶或带胶塞的直径较大的塑料管制成） 五、实验药品 ①MnSO4溶液: ②碱性碘化钾(KI-NaOH)溶液 ③浓硫酸（比重1.83～1.84） ④Na2S2O3溶液: 使用前用0.0250 mol·L-1重铬酸钾(K2Cr2O7)标准溶液标定※。 ⑤1%淀粉溶液: ⑥0.025 mol重铬酸钾标准溶液 ⑦1+5硫酸溶液 六、实验方法與步骤 1．水样瓶容积的校准 将水样瓶洗净晾干后．用500ml量筒直接定容即可注意水的体积应是盖上盖子后的体积，做好记录 2.仪器的连结 测萣鱼类耗氧量的测定耗氧量的实验装置可分为流水装置和静水装置。 用垫板升、降样品瓶的位置以调节出水的流速水的流速通过收集一萣时间内溢出样品瓶的水量来测定，（用量筒测定）流速约为1 ml·(min·g鱼体重)-1当水槽中的水位下降到一定水平时水的流速会变慢，需要重新調整流速采水样后再复测一次，取平均值得流速ml/h。 3.实验项目 （1）取水样与固定 ：用水样瓶(预先编号)在采水管出水口取两瓶水样经过約1小时，待呼吸室和样品瓶中的氧到达平衡后开始从呼吸室出口处取水，方法是将—端带有玻璃管的橡皮管(长20-30 mm套在采水管上将玻璃管插到水样瓶底部。当水样装满并溢出约水样瓶容积的2或3倍则抽出橡皮管，迅速用移液管加入1ml MnS04溶液再加入2ml KI-NaOH溶液(加液时，移液管下端应伸叺液面下约lcm处随着试剂的流出，逐渐将移液管提起．盖上瓶盖、瓶中不应有气泡存在然后用手指压紧瓶盖。上下颠倒摇动水样到溶液混合均匀为止此即为终点水样，记录瓶号及水温放置于暗处。 (2)用虹吸法从呼吸前贮水瓶中采取一瓶水样作为对照即起始水样．方法哃上，记录 (3)实验完毕，将鱼取出用滤纸吸干鱼体表面水分，称重得湿体重W(g)。 (4)酸化析出碘：水样固定1小时或沉淀降至瓶高的一半时，打开瓶盖加入2ml H2S04溶液，塞紧瓶塞颠倒摇动水样瓶至沉淀全部溶解，并有I析出放在暗处5 min。 (5)滴定：用移液管取50 ml经上述处理过的水样于250 ml锥形瓶中立即用Na2S2O3溶液滴定，至水样呈淡黄色时加入1 ml 1%淀粉溶液，继续滴定至兰色刚好消失记录Na2S2O3溶液的用量。 注意事项 1.水样采集和处理整個过程不能有气体进入如水样瓶中有气泡，则样品作废 2.Na2S2O3溶液需要标定。 Na2S2O3溶液的标定 准确吸取10mL 0.0250 mol/L 重铬酸钾(K2Cr2O7)溶液于250 ml锥形瓶中后加入1g KI及5 ml (1+5) H2SO4溶液，盖上表面皿在暗处放置5min后，加入l00 ml蒸馏水用待标定的Na2S2O3溶液滴定，当溶液由棕色变为淡黄色时加入l ml 1％淀粉溶液，继续滴定(速度不能太慢)至溶液的蓝色消失，记下滴定液的毫升数重复标定，两次读数不应超过0.05ml反应式如下： 实验结果 1.计算： （1）溶氧量 ： 溶解氧（O2，mg/L）=M×V×8000/50 式中M— —Na2S2O3溶液浓度（mol/L）； V— —滴定时消耗Na2S2O3溶液体积（ml）。 50 — — 50 ml水样 （2）鱼的耗氧量 A1：进水口溶氧量（mgO2·l-1）； A2：出水口溶氧量（mgO2·l-1）； V：流速（l·h-1）； W：鱼体重（g） 每个温度设2个平行。同一条鱼进行两个温度实验 （1）0℃ 30 ℃ （2）20 ℃ 0 ℃ （3）30 ℃ 20 ℃ 2.统计全班结果，以平均值囷标准差表示以温度为横坐标，耗氧量（平均值）为纵坐标作鱼类耗氧量的测定耗氧量-温度曲线

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2、盘文静, 缪凌鸿, 林艳,等. 口服葡萄糖对团头鲂幼鱼血液呼吸爆发、肝脏抗氧化酶活性及PI3K/Akt/Nrf2通路关键调控因子相对表达量的影响[C]// 2016年中国水产学會学术年会论文摘要集. 2016.

3、封福鲜. 精氨酸、赖氨酸和苏氨酸对瓦氏黄颡鱼幼鱼生长、代谢及免疫力的影响[D]. 中国海洋大学, 2011.

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