国内图书分类号：Q812 学校代码：10213 国際图书分类号：577.15 密级：公开 工学硕士学位论文 玉米谷氨酰胺转胺酶异源表达系统构建及 酶学性质的研究 硕 士 研 究 生： 李宁娟 导 师： 张兰威 敎授 申请学位级别： 工学硕士 学 科 、 专 业： 食品科学 所 在 单 位： 食品科学与工程学院 答 辩 日 期： 2009 年 6 月 授予学位单位： 哈尔滨工业大学 当酰基受体为赖氨酸的ε-氨基时TGase催化蛋白分子之间或之内形成ε-( γ- 谷胺酰)赖氨酸键，使得蛋白发生交联从而改变其结构和理化性质，甚至帶 来新的功能因此，TGase在工农业、食品、化妆品和医药领域中有着极为广 泛的应用 本实验根据GeneBank 公布的玉米TGase基因的cDNA序列，利用分子生物 学掱段将玉米谷氨酰胺转胺酶(TGase)基因克隆到两种不同的异源表达系统中 进行异源表达并对玉米TGase 的酶学性质进行了初步研究。 首先采用Trizol法从玉米幼苗叶片中提取玉米叶片的总RNA RT-PCR扩增 得到了玉米TGase ，将其克隆到PMD-18T 载体上经过PCR 、酶切和测序鉴 定，克隆得到的玉米TGase基因与GeneBank上公布的TGZ15(AJ421525) 的同源 性为 100%完全一致。 利用生物信息学软件对玉米TGase 进行了序列分析通过ChloroP 1.1 、 DNAStar和Oimga 2.0 对该序列编码的蛋白的亲疏水性、二级结构和Motif进行 了预测。TGase氨基酸序列的 1-47 个氨基酸编码一个叶绿体转运肽TGa