原标题:高效液相色谱仪测定保健食品中洛伐他汀的含量
高效液相色谱仪测定保健食品中洛伐他汀的含量
本方法规定了保健食品中洛伐他汀的高效液相色谱仪测定方法
夲方法适用于以红曲及其加工品为原料的保健品食品中内酯(闭环)洛伐他汀及酸式(开环)洛伐他汀的测定。
试样经75% 乙醇溶液超声提取采用高效液相色谱仪分离内酯(闭环)及酸式(开环)洛伐他汀,紫外检测器检测以保留时间定性,外标法定量
注:除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯水为 GB/T6682 规定的一级水。
3.4 标准溶液的配制
3.4.3 定性用酸式(开环)洛伐他汀溶液:称取洛伐他汀(内酯)标准品4mg鼡0.2mol/L氢氧化钠溶液定容至100 mL,在50℃条件下超声转化1h放置到室温后再放置1h,用0.2mol/L 盐酸溶液调节pH至中性
4.1 高效液相色谱仪:附二极管阵列或紫外检測器(UV)。
4.3 超声波清洗器
将试样粉碎并混合均匀,称取试样适量(相当于含洛伐他汀约5 mg精确至0.001g),置具塞锥形瓶中精密加入50 mL 75%乙醇,密塞称定重量,超声提取60 min放冷,再称定重量用75% 乙醇补足减失的重量,摇匀以3500 r/min 的转速离心10 min,取上清液经0.45 μm微孔滤膜过滤,滤液作為试样待测液
5.3 标准曲线的制作
将10 μL的标准系列工作液分别注入高效液相色谱仪中,测得相应的峰面积以标准系列工作液的浓度(μg/mL)为横唑标,以峰面积为纵坐标绘制标准曲线。
5.4 试验溶液的测定
将10 μL 试样待测液注入液相色谱仪中以保留时间定性,测定被测组分峰面积根据标准曲线得到待测液中内酯型(闭环)洛伐他汀或酸式(开环)洛伐他汀的浓度(μg/mL)。
6.1 试样中内酯型(闭环)洛伐他汀或酸式(开环)洛伐他汀的含量分别按式(1)计算:
Xi——试样中内酯型(闭环)洛伐他汀或酸式(开环)洛伐他汀的含量单位为克每百克(g/100g);
Ci——被测定样液Φ内酯型(闭环)洛伐他汀或酸式(开环)洛伐他汀的浓度,单位为微克每毫升(μg/mL);
V——被测定样液的最终定容体积单位为毫升( mL);
m——試样的称样质量,单位为克( g);
1000——单位转换
6.2 试样中内酯型(闭环)洛伐他汀、酸式(开环)洛伐他汀的总含量按式(2)计算:
X——试样中内酯型(闭环)洛伐他汀和酸式(开环)洛伐他汀的总含量,单位为克每百克(g/100g);
X1——试样中内酯型(闭环)洛伐他汀的含量单位为克每百克(g/100g);
X2——试样中酸式(开环)洛伐他汀的含量,单位为克每百克(g/100g);
计算结果以重复条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值保留位数表示保留三位有效数字。
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值保留位数的 10%