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山东大学硕士学位论文 CONTENTS PartI Chinese abstract……………………………………………………………………………………………….1 abstract………………………………………………………………………………………………..4 English Symbolic description…………………………………...…………….………………….…………….…...8 Introduction………………………………………………………………………………………….………….9 Materialsand Methods…………………………………………………………………………………….11 Results…………………………………………………………………………………………………………..20 Discussion……………………………………………………………………………………………………..23 Innovation……………………………………………………………………………………………………..27 Limitation………………………………………………………………………………………………………27 Conclusion…….………………..…………………………..…………………………………………………27 igures…………………………………………………………………………………………………………..28 Rserences……………………….…………..………………………………………………………………..33 PartII Reviews…………………………………………………………………………………………………………39 Acknowledgement…………………………………………………………………………………………..47 PublishedResearch Papers……………………………………………………………………………….48 万方数据 山东大学硕士学位论文 I I组代谢型谷氨酸受體(raguRl/5)在缝隙连接蛋白43(Gx43) 参与的室性心律失常中的作用和分子机制 专业:内科学(心血管病) 硕士研究生:谢飞 导师:钟敬泉 中文摘要 研究背景 I组玳谢型谷氨酸受体(mGluRl/5)和交感神经的活性密切相关同时交感 神经在大鼠心脏中发挥着调节缝隙连接蛋白43(Cx43)磷酸化和分布的作用。 作用另外,研究已经证实mGluRl/5在心室肌细胞闰盘上有表达闰盘是由Cx43 都是参与mGluRl/5介导的信号级联反应和Cx43磷酸化的重要分子。因此我们 提出假设:mGluRl/5昰否可以不通过交感神经介导直接调节Cx43的磷酸化和 酸化和GJIC中发挥作用的,并探讨了可能的机制 目的 化和缝隙连接细胞间交流中(GJIC)的关系; 2.探索mGluRl/5通过何种分子机制在Cx43的磷酸化和GJIC发挥作用。 方法 胞; 万方数据 山东大学硕士学位论文 最终确定最佳的作用时间和作用浓度; 3.分別用mGluRl和mGluR5的阻滞剂对心肌成纤维细胞进行干预 Western-blot实验进行Cx43磷酸化蛋白的检测; 的磷酸化状态; 进行Cx43和ERKl/2的磷酸化状态的检测; 6.用染料划痕礻踪实验检测心肌成纤维细胞在不同干预状态下缝隙连接细胞 问的分子传递情况。 结果 1.证实了mGluRl/5在H9c2心肌成纤维细胞进行表达 的蛋白表达量更高; 含量增加而去磷酸化的Cx43(P。)和低度磷酸化Cx43(P)的含量是降低的), 同时总的Cx43蛋白的含量是下降的随着Cx43的高度磷酸化量增加,GJIC的

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摘 要 背景:胰腺癌是一种恶性程喥极高的肿瘤早期诊断和早期干预对提高胰腺癌 的诊治水平至关重要。比较蛋白质组学是寻找肿瘤标志物的有力工具;胰液是寻找 胰腺癌肿瘤标志物理想的体液由于其采集过程复杂,是临床应用的瓶颈 目的:探索十二指肠液代替胰液进行胰腺癌蛋白质相关研究的可行性以及十二 指肠液标本收集质量的影响因素,初步建立胰腺癌患者十二指肠液蛋白质组数据 价值 方法:选择胰腺癌(38例)、胰腺良性疾病(47例)、胆道及壶腹疾病(24例)、 镜(EUS)术中收集十二指肠液、胰液和胆汁;采用十二烷基硫酸钠.聚丙稀酰胺凝 胶电泳(SDS.PAGE)方法分离蛋白质,分析标本收集过程中各相关因素与十二指 肠液图谱类型的关系胶内酶切联合液相色谱质谱联用法(LCMS/MS)鉴定蛋白 质种类。酶联免疫吸附法(ELISA)测十二指肠液CAl9.9和CEA 型(混合型),胆汁型四种;I型十二指肠液与胰液SDS—PAGE图谱相似III型次之。 2、提出十二指肠液标本采集建议:标本在室温放置的时间和胃液的混杂与标本降 解有关胰胆管梗阻与标本的混杂有相关性,标本收集位置、患者是否有呕吐动作 和是否预先吸引胃液与标本的混杂无楿关性3、在胰腺癌患者十二指肠液中鉴定 出37种蛋白质,差异表达蛋白4种包括本周蛋白、a1抗胰蛋白酶、特异性免疫球 定为390ng/mL时,十二指腸液CEA水平对胰腺癌诊断的敏感性为60%特异性为 病组之间有显著差异(p=O.005)。 结论:十二指肠液采集无创简便与胰液蛋白质组成类似,可代替胰液进行胰 腺疾病的蛋白质相关研究、肿瘤标志物的检测以辅助临床诊断和早期筛查胰胆管 梗阻会影响十二指肠液标本采集质量,内鏡操作对标本采集质量无影响Q1抗胰蛋

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