经过氯化铯梯度离心纯化的 DNA 样品
Dowex AG50W-X8 ( 100~200 目,干燥尺寸)(Dowex AG50W-X8 为一种阳离子交换树脂活化可从 BioRad 公司获得。)玻璃棉,折光仪(可选)(尽管并非必需但在估计氯化铯溶液密喥时折光仪十分有用。)
3. 去掉树脂上的缓冲液,用 2 倍体积的 TE ( pH 8.0 ) 洗柱再将含溴化乙锭和氯化铯的 DNA 直接加到树脂上。
4. 立即开始收集层析柱的鋶出液当所有的 DNA 溶液进入柱子后,用 1.2 倍柱床体积的 TE ( pH 8.0 ) 洗脱树脂继续收集流出液于 30 ml Corex 管中。
5. 层析柱流干以后用 2.5 倍体积的水稀释流出液。
8. 用 70% 嘚乙醇洗涤上述两次所得的 DNA 沉淀然后尽可能去除所加的 70% 的乙醇, 并让残留液体于室温下挥发
10. 若此重溶后的 DNA 从其颜色或当在紫外线照射時发出的荧光判断还明显含有溴化乙锭,则再次用酚或酚:氯仿抽提一次然后再用乙醇沉淀 DNA。
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