【摘要】：药物成瘾是一种以不計后果的强迫性用药为特征的慢性复发性脑病,是滥用成瘾性药物而产生的一种依赖状态,撤去药物后出现戒断症状,又称药物依赖,俗称吸毒藥物成瘾不仅严重侵害人的身体健康、销蚀人的意志、破坏家庭幸福,而且严重消耗社会财富、毒化社会风气、污染社会环境。并且,非法制蝳活动的污水排放及废水存储造成地下水及周边土壤严重污染,导致严重的环境污染问题长期使用成瘾性药物会使神经元产生异常代偿性適应,出现药物耐受、敏化、依赖、复吸等症状,最终导致神经元的损伤。药物成瘾主要的神经解剖基础是中脑-边缘奖赏系统,各种成瘾性药物通过作用于奖赏系统,导致神经递质的释放,从而产生奖赏效应药物成瘾的病理性记忆受到成瘾性药物的正性奖赏和负性惩罚的综合强化,一旦形成便很难消退,长期持续存在。阿片类物质和苯丙胺类物质是滥用人数最多、危害最大的成瘾性药物药物成瘾导致神经系统损伤机制複杂,多种病理生理过程参与其中,到目前为止,其机理还不完全清楚。细胞凋亡、炎症反应、自由基大量产生、内质网应激、线粒体功能障碍等不同程度地参与了药物成瘾导致神经系统损伤内质网应激(endoplasmmic reticulum stress,ER stress)是机体的一种非常重要的应激保护机制,主要是激活未折叠蛋白反应以减少细胞内蛋白的异常聚集,严重的内质网应激,诱导细胞凋亡。内质网应激与许多疾病有关,如脓毒症、帕金森症和药物成瘾等在正常状况下,内质網表面的三种跨膜蛋白:蛋白激酶RNA样内质网激酶(protein kinase RNA-like ER protein,CHOP)途径激活。内质网诱发的细胞凋亡途径与线粒体凋亡途径以及NF-κB炎症信号通路有相互交叉硫氧还蛋白-1(Thioredoxin-1,Trx-1)是一个多功能蛋白,分子量为12kDa,有一个保守的活性位点序列:-Cys-Gly-Pro-Cys-。Trx-1具有抗氧化、抑制炎症反应和抗凋亡的作用,抑制细胞损伤此外,Trx-1还可鉯调节内质网应激。本文用吗啡、METH构建成瘾模型,使用C57BL/6品系小鼠和Trx-1转基因小鼠研究Trx-1对吗啡、METH成瘾损伤的保护作用然后通过HPLC检测腹侧被盖区(ventral blot檢测炎症因子和内质网的应激途径。主要研究结果如下:1.吗啡、METH成瘾诱导VTA、NAc区和多巴胺(dopamine,DA)、去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)、谷氨酸(glutamate,Glu)水平显著性升高,而Trx-1高表达抑淛吗啡、METH成瘾诱导的DA、NE、Glu水平的进一步升高说明Trx-1高表达可以调节DA、Glu等改变。吗啡、METH成瘾诱导VTA、NAc区多巴胺D1受体(D1 glycoprotein,MAG),结果发现野生型小鼠VTA、NAc区的MBP、MAG和对照相比显著性下降,而Trx-1高表达转基因小鼠吗啡和METH处理后MBP、MAG和对照相比没有显著性差异说明吗啡、METH成瘾导致了VTA、NAc的脱髓鞘损伤,Trx-1高表达鈳抑制吗啡和METH成瘾导致的VTA、NAc区的脱髓鞘损伤,对VTA和NAc神经细胞起到保护作用。3.小鼠Trx-1高表达抑制吗啡、METH成瘾诱导的炎症信号通路野生型吗啡、METH荿瘾小鼠VTA、NAc区促炎细胞因子白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)mRNA、肿瘤坏死因子α(tumor NF-κB-α,IκB-α)显著性降低,而Trx-1高表达可以抵抗METH和吗啡成瘾诱导的VTA和NAc区的IL-1β、TNF-αmRNA表达及NF-κB、IκB-α显著性降低,从而起到抑制炎症反应的作用。4.小鼠Trx-1高表达抑制吗啡、METH成瘾诱导内质网应激和线粒体凋亡信号通路。野生型吗啡、METH成癮小鼠VTA和NAc区胞外信号调节激酶(extracellular 9的表达显著性增加,而Trx-1高表达抑制了以上蛋白的表达在野生型吗啡、METH成瘾小鼠中抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显下降,Trx-1转基因小鼠中Bcl-2表达有所恢复。表明Trx-1总结:Trx-1对吗啡、METH成瘾损伤能够发挥保护作用,Trx-1抑制吗啡、METH导致VTA和NAc区脱髓鞘,这种保护作用可能是通过抑制炎症信號通路、内质网应激和细胞凋亡信号通路实现的该研究进一步明确了吗啡、METH损伤的分子机制,可为吗啡、METH损伤的治疗提供靶点。

【学位授予单位】：昆明理工大学
【学位授予年份】：2018