家里老人物件翻出来的一个物件。懂得老师帮我看看，谢谢。

点击联系发帖人 时间：2018-09-18 19:27

老人物件

该楼层疑似违规已被系统折叠

各位老师好帮我看看，谢谢了我现在想换一个单位，另外一个单位让我去岗位比我现在的高一点，我能去吗我去好还是不去好。

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哪位老师帮峩看看谢谢了

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不可，错误决断走了还会走。但是看起来又有身兼多职的象

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你现在是管理人员啊只不过有点辛苦

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现在单位还不错，虽然没有大的发展混日子不成问题，工资也还可以新单位，有在升一步的迹象不过也只是口头现在。一些细节没有谈好祥测私，不喜勿扰

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Dual reporter做的很多了给你讲一下开始摸條件的原则

1）刚开始按10：1做，然后根据具体的情况进行修正和调整

2）根据你细胞系的转染效率来进行摸索，主要根据renilla的信号值进行调整我们多用Vigofect做转染，一般好的时候Renilla的值在4位数-6位数左右，这个时候我们认为其是理想的

3）一定程度上，我们研究发现Renilla的值和细胞的VARIABILITY關系很密切，当细胞状态不好或者特定细胞系在此转染方法下的转染效率不高时，请一方面调整Renilla的比例目的是保证其作为inner control的绝对信号鈈能太低，另一方面考虑调整Plasmid的总量，调整转染的条件

4）10：1基本这个比例比较适合初始摸条件使用然后摸一个gradient，将Renilla用10.75, 0.5, 0.25这样，看看整體情况Renilla的信号变化如何如果能达到4位数左右，基本这个量就可以用于最终的实验了

不知道说清楚没有了转染这个东西，需要自己去多體会的~

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