用过的ELISAELISA常用的试剂盒盒被我放在4℃一周,才想起来,会不会失效了。。。

板条不显色或者无相应数值

ELISA常用嘚试剂盒使用顺序混乱或操作步骤出错

严格遵循实验说明重复实验

确保ELISA常用的试剂盒来自同一ELISA常用的试剂盒盒

板条要封好,干燥剂失效偠及时更换

ELISA常用的试剂盒过期或者不同的批次混用

洗液配制错误、洗涤浸泡时间过长

按照说明书要求洗涤,并正确配制洗液

按照说明书偠求严格计算好时间

确保吸取不同液体更换新的枪头和盛放器皿

根据ELISA常用的试剂盒体积大小回温时间相应延长,确保ELISA常用的试剂盒完全囙温

使用错误波长读数或者酶

确保450 nm波长读数,检查酶标仪是否故障

使用完毕的部分请立即放回冰箱勿置于过热环境时间太长

背景值或吸光度(OD值)

使用了质量差的水配制ELISA常用的试剂盒

使用双蒸水或去离子水配制ELISA常用的试剂盒

洗涤不当或者洗板机洗板效果不好

增加1-2次洗涤,每孔至少加入250μL洗液

酶标仪失灵如OD值读数很高而颜色很浅

使用校正微孔板检查酶标仪,检查光源

实验室温度过高反应时间过长

测定操作温度是否合适,时间是否计算正确

ELISA常用的试剂盒混淆被污染或者配制不当

确保使用正确的ELISA常用的试剂盒,准确配制避免污染

加入標准品和样品等的时间不一致

使用多道枪加样,同种ELISA常用的试剂盒加样途中不能中断

校准多道枪检查吸嘴是否套紧,确保吸液量一致

检查洗涤系统保持良好运行

板与板之间孵育时间相差太大

独立计时,确保一致的孵育时间

板与板之间不一致的洗涤过程

确保相同的洗涤次數保证洗涤系统正常运作

检查移液枪,确保吸取相同液量

ELISA常用的试剂盒和样品处于不同温度

确保盒内ELISA常用的试剂盒和样品液等充分回温如果ELISA常用的试剂盒体积较大则需要回温较长时间。不能用温水浴回温样品

不同批次的ELISA常用的试剂盒混用或ELISA常用的试剂盒盒过期

ELISA常用的試剂盒不要混用,通常0标准品的OD值小于0.5显示ELISA常用的试剂盒质量下降

多个标准品数据点超出曲线范围

标准品添加顺序混乱或者放置于错误位置

按照说明要求重复实验,保证标准品添加正确

标准品被污染或与其他标准品混淆

改用新的标准品按照由低浓度到高浓度的顺序添加標准品

洗涤不一致或者洗涤系统失灵

遵循一如既往的洗涤方式,检查洗涤系统

加入标准品和ELISA常用的试剂盒的时间不一致

由低到高浓度依次添加标准品使用多道枪移液

校准多道枪,检查吸嘴是否套紧确保吸液量一致

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