实验步骤：1)．收集约1×106--107细胞（贴壁细胞用PBS洗一遍胰酶消化后离心，悬浮细胞直接离心）；
2)．洗涤细胞：用预冷的PBS轻轻重悬细胞沉淀取少量细胞用于计数，剩余细胞2000rpm4°C离心5min，弃上清
3)．预处理：加入1-2.5ml临用前添加了PMSF的线粒体分离试剂至细胞中，轻轻悬浮细胞冰浴放置10—15min。
4)．把细胞悬液转移到玻璃匀浆Φ匀浆20下左右，把细胞匀浆2000rpm4°C离心10min。
5)．小心把上清转移到另一离心管中12000rpm，4°C离心10min
6)．小心去除上清，沉淀即为分离得到的细胞线粒體
7)．在分离得到的线粒体样品中加入150—200ul临用前添加了PMSF的线粒体裂解液裂解线粒体，裂解后的线粒体可以用于PAGE、Western、IP及线粒体中的酶活性检測

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