君，已阅读到文档的结尾了呢~~
【医学医药资料 医院 课件 ppt】精美完整 欢迎下载
扫扫二维码，随身浏览文档
手机或平板扫扫即可继续访问
细胞复苏与冻存【医学医药资料】
举报该文档为侵权文档。
举报该文档含有违规或不良信息。
反馈该文档无法正常浏览。
举报该文档为重复文档。
推荐理由：
将文档分享至：
分享完整地址
文档地址：
粘贴到BBS或博客
flash地址：
支持嵌入FLASH地址的网站使用
html代码：
&embed src='/DocinViewer-4.swf' width='100%' height='600' type=application/x-shockwave-flash ALLOWFULLSCREEN='true' ALLOWSCRIPTACCESS='always'&&/embed&
450px*300px480px*400px650px*490px
支持嵌入HTML代码的网站使用
您的内容已经提交成功
您所提交的内容需要审核后才能发布，请您等待！
3秒自动关闭窗口细胞复苏步骤和注意事项_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
细胞复苏步骤和注意事项
阅读已结束，下载文档到电脑
想免费下载本文？
定制HR最喜欢的简历
你可能喜欢查看: 714|回复: 10
liuwei291009
不知你说的什么培养基 xiaosigou123|四级 CMC-Na固体培养基（CMC平板）g/l：CMC-Na 20；Na2HPO4 2.5；KH2PO4 1.5；蛋白胨 2.5；琼脂 20；蒸馏水 1000ml；pH 7.0～7.5[10]即可评论|赞同0
19:14lyw1986111|五级动物细胞的完全培养基就
冻存液就用新鲜的细胞培养基，加DSMO至终浓度达5—20%。
螺旋藻具有高蛋白、低脂肪、低糖、低胆固醇的特点，并含有多种维生素、矿物质、微量元素等生理活性物质，是一种理想的纯天然生物活性健康食品。 一克螺旋藻的营养价值等于一千克蔬菜和水果的营养总和。 螺旋藻所含营养物质特别丰富、优质、齐全
博凌科为解答：没有用过BD公司的胶原，但使用过Sigma的I型胶原(固体)，一般是自己配制成液态，然后根据需要按一定比例添加10x浓缩培养基及血清(保证 细胞的营养)，用1M浓度的NaOH调节pH值约7.2，再和细胞混合均匀后添加到培养器皿中，直接放到37
幸福小馒头
我们配制完培是按照基培：血清：双抗=500:55:5.5的比例来配的，具体的还是要根据你培养的细胞种类来决定，建议你请教你们实验室的师兄师姐们，或者跟你养同样的细胞的人
最简单的方法，逐渐减少血清含量，比如10%养一段时间，5%在养一段时间，3%，1% ···· 还有你如果换无血清培养基，可以用你现在的培养基加一定比例的无血清培养基，无血清培养基的比例逐渐增加，逐步适应 驯化是个漫长的过程，需要耐心，祝你成功。
郑州公积金代缴1
Zarrouk氏培养基:(g/L) 碳酸氢钠―――――――16.80 磷酸氢钾―――――――― 0.5 硝酸钠――――――――2.5 氯化钠――――――――1.00 硫酸镁――――――――0.20 硫酸铁―――――――― 0.01 硫酸钾 ――――――――1.00 一水氯化钙―――――― 0.04 EDTA―――――――― 0.08 pH 8-10 缺氮培养基（Zarrouk
会不会有可能是细胞状态不好，在面临脂质体转染的压力时容易死亡。转染完四至六小时换液了没？ 另外可能是培养基配制时间较长，谷氨酰胺分解了，那就要补加谷氨酰胺。
细胞培养技术也叫细胞克隆技术，在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术，还是其中之一的生物克隆技术来说，细胞培养都是一个必不可少的过程，细胞培养本身就是细胞的大规模克拢 无血清培养基 无血清培养基(serum free m细胞RAW264.7培养中，黑色游走的小虫哪里来的怎么除去 (血清,培养箱,细胞培养,培养液) - 细胞实验 - 生物秀
标题: 细胞RAW264.7培养中，黑色游走的小虫哪里来的怎么除去 (血清,培养箱,细胞培养,培养液)
摘要: [细胞RAW264 7培养中，黑色游走的小虫哪里来的怎么除去 (血清,培养箱,细胞培养,培养液)] 细胞培养近半年了，也曾遇到这样的问题，近来发现的细胞中有一种黑色的线条状小虫非常的猖狂，使得细胞培养进行不下去了（附图）， 长短不一，在细胞培养液中游动，随着细胞培养时间的延长，他会增长繁殖，多的时候看上去黑压压一片像个毛团团，长的比较长的游动起来很像蝌蚪，尾巴是摆动的，可以从视野的一端游动道另一端去，这些小虫子是什么？哪里来的？怎么避免他们的出现？？有说是黑胶虫的，但是黑胶虫是个什么东西，这真的 关键词:[血清 细胞培养 培养箱 培养液 黑胶虫 细菌污染 滤器]……
细胞培养近半年了，也曾遇到这样的问题，近来发现的细胞中有一种黑色的线条状小虫非常的猖狂，使得细胞培养进行不下去了（附图）， 长短不一，在细胞培养液中游动，随着细胞培养时间的延长，他会增长繁殖，多的时候看上去黑压压一片像个毛团团，长的比较长的游动起来很像蝌蚪，尾巴是摆动的，可以从视野的一端游动道另一端去，这些小虫子是什么？哪里来的？怎么避免他们的出现？？有说是黑胶虫的，但是黑胶虫是个什么东西，这真的是吗？应该不是细菌污染，因为培养基的颜色不会变的那么黄，而且细菌污染会有难闻的气味，这个没有怪味我对此采取了如下措施，以期找到他的来龙去脉：1.首先，细胞培养箱进行的彻底的清理，换了新的空气过滤器，全部清理了一遍（原来的培养箱的滤器里面藏了那么多的脏东西，脏死了，全部用酒精棉擦了，臭氧发生器熏了）2..排除培养液、完全培养液、血清的问题 跟培养细胞同时操作的 同时放入到培养箱中培养，观察同时进行之前的一瓶血清，在进行上述操作的时候被发现 也会张这样的小虫子，被我停用了，换了新的血清，放到培养箱中养了3天了，未出现这样的小虫！细胞培养的操作问题、细胞所用的一切用具，我自以为没有大的问题】问题排除了差不多的时候我开始复苏细胞，复苏3瓶（不同时间冻存的）一瓶第一天就出现小虫了（复苏细胞时，我只加了基础培养液1640，血清都没加，因为我们冻存细胞用了血清：DSMO=9;1)另外两瓶生长非常好，但是在今天传代一次，共8瓶细胞全部长满了小虫子。而其他的血清、完培，基培都是正常的我要哭了，折腾这么久了，问题排查也拍不出来了，我不知道还能是什么原因？只能怀疑到细胞本身的问题了，，细胞本身问题到也不那么可怕买就是了，就怕不是细胞本身的问题到时候买来新的细胞在给养成这样子，那要怎么交代哦，老板会骂死我的，那位高手，救救我吧！谢谢你了！
回复图中除了亮亮的细胞你那些沙粒样的东西就是那些个小虫再附图一张回复他们会游动，不是布朗运动，他们是活的有生命的，游动的回复他们的生长会让细胞失去光泽，变的不再透亮嘿嘿的没有生命力了回复多发几张图片了哈，对不住了，请高手们帮帮我看看回复最后一张回复它们的运动幅度很大吗？回复我现在养的细胞里也出现这样的情况，后来全扔了……昨天重新复苏的细胞养到今天又出现了这样的小黑点，郁闷ing……据有经验的童鞋们说在传代之前800转离心5分钟后情况会有所改观，准备试试看。回复游动的幅度蛮大的，可以从视野的一端游到另一端去回复我现在养的细胞里也出现这样的情况，后来全扔了……昨天重新复苏的细胞养到今天又出现了这样的小黑点，郁闷ing……据有经验的童鞋们说在传代之前800转离心5分钟后情况会有所改观，准备试试看。 我的是线状的小黑虫不是黑点，用800转离心是可以优选细胞的，如果是细胞中有这种的小黑点，不生长、是可以通过优选来提高细胞的生长状态的！这方法我也试过了，不适合我的细胞状况，因为我的小黑虫是可以生长的，有生命力的回复游动的幅度蛮大的，可以从视野的一端游到另一端去黑点一般两种情况，一种是黑胶虫，一种是细菌污染。根据你说的它的活动能力判断，你的细胞是污染了。有根据你说离心后情况会好些判断，你的细胞应该是真菌污染。对于污染的细胞我们一般不作处理，扔掉。如果你的细胞很金贵，比较少。你可以用加了双抗的PBS每天洗3次，或许能救回来。但是我不建议你处理，因为有时可能抗生素(antibiotic)仅仅是抑制了它的生长，并没有完全处理干净。结果过一阵又重新出现了。希望我的回答对你有所帮助。回复黑点一般两种情况，一种是黑胶虫，一种是细菌污染。根据你说的它的活动能力判断，你的细胞是污染了。有根据你说离心后情况会好些判断，你的细胞应该是真菌污染。对于污染的细胞我们一般不作处理，扔掉。如果你的细胞很金贵，比较少。你可以用加了双抗的PBS每天洗3次，或许能救回来。但是我不建议你处理，因为有时可能抗生素(antibiotic)仅仅是抑制了它的生长，并没有完全处理干净。结果过一阵又重新出现了。希望我的回答对你有所帮助。谢谢你的回答，我的细胞可以扔掉，再次复苏，细菌污染的话，表现的会很快，我复苏过两次了 都是在传代一次后，大约是养个5-7天的样子就全体出现这样的情况！中邪了，再有细菌污染一般好像有很难闻的气味，这个虫子没有，培养基也只是轻度变黄！我也期望是细菌污染，可是真的找不到原因，是什么时候那个操作引起的细菌污染，为什么我同时做的完全培养液（没加细胞的）就不这样呢，真的觉得我挺背的回复细胞没得救了！我们过去和它斗争了好几个月，最后还是放弃了。不知道何方小妖。不过有一点是确定的，他来自于水中，所用的水必须高压消毒，这家伙好像是异养的，所以和细胞同生共死的。最后也就知道这么多了，连请来的水处理专家都不认识。但是按照上述原则后来就在呀没有出现过了。Good Luck!回复细胞没得救了！我们过去和它斗争了好几个月，最后还是放弃了。不知道何方小妖。不过有一点是确定的，他来自于水中，所用的水必须高压消毒，这家伙好像是异养的，所以和细胞同生共死的。最后也就知道这么多了，连请来的水处理专家都不认识。但是按照上述原则后来就在呀没有出现过了。Good Luck! 多谢回答！我也发现了，貌似是水中的东西！再确证一下回复最后一张你这是多少倍镜看到的？回复你这是多少倍镜看到的？nikon的，物镜10倍的，目镜不晓得是多少倍的！我看到有的朋友400倍的是不是目镜是10倍的，我只知道我的物镜10倍的回复谢谢你的回答，我的细胞可以扔掉，再次复苏，细菌污染的话，表现的会很快，我复苏过两次了 都是在传代一次后，大约是养个5-7天的样子就全体出现这样的情况！中邪了，再有细菌污染一般好像有很难闻的气味，这个虫子没有，培养基也只是轻度变黄！我也期望是细菌污染，可是真的找不到原因，是什么时候那个操作引起的细菌污染，为什么我同时做的完全培养液（没加细胞的）就不这样呢，真的觉得我挺背的你们的细胞我确定是污染。而且应该是真菌污染。如果培养液没问题，那就是你的细胞冻存时就已经污染了。希望我的回答对你有所帮助。回复细胞没得救了！我们过去和它斗争了好几个月，最后还是放弃了。不知道何方小妖。不过有一点是确定的，他来自于水中，所用的水必须高压消毒，这家伙好像是异养的，所以和细胞同生共死的。最后也就知道这么多了，连请来的水处理专家都不认识。但是按照上述原则后来就在呀没有出现过了。Good Luck!我还想问一下这位朋友，处理这种小妖我需要多培养间再次做甲醛熏蒸不，或者只是酒精棉擦拭一下培养箱，照个紫外就可以了呢？它是和细胞共生长，只要把染了这东西的细胞扔掉就可以呢？我被多次的污染搞怕了，现在对每个操作都很小心！回复细胞没得救了！我们过去和它斗争了好几个月，最后还是放弃了。不知道何方小妖。不过有一点是确定的，他来自于水中，所用的水必须高压消毒，这家伙好像是异养的，所以和细胞同生共死的。最后也就知道这么多了，连请来的水处理专家都不认识。但是按照上述原则后来就在呀没有出现过了。Good Luck!难道是培养箱用水传染的吗？用高压后应该能避免吧？回复这应该是污染吧，加点双抗可能还有机会把细胞救回来。祝你好运！回复怎么办呢
相关热词：
..........
生物秀是目前国内最具影响力的生物医药门户网站之一，致力于IT技术和BT的跨界融合以及生物医药领域前沿技术和成功商业模式的传播。为生物医药领域研究人员和企业提供最具价值的行业资讯、专业技术、学术交流平台、会议会展、电子商务和求职招聘等一站式服务。
官方微信号：shengwuxiu
电话：021-}