XK-SOP-12 ABO血型反定型为什么用o细胞型用红細胞质量控制（国产试剂） 29-29 XK-SOP-13 配血、血型试验标记规定 30-33 XK-SOP-14 标准A、B红细胞制备 医院logo xxx医院血库 编号：XK-SOP 版次：1 实验SOP文件 生效日期： 第1页 共3页 ABO血型正定型 实验目的 用盐水介质法进行ABO血型系统正定型的鉴定 实验原理 红细胞作为一种颗粒性抗原，在液体介质中和电解质的参与下可直接与楿应抗体结合，出现肉眼可见的凝集现象用已知IgM类特异性标准抗血清与被检红细胞在盐水介质中反应，若出现凝集现象表明被检红细胞膜上有与血型抗体所对应的抗原，从而判断和鉴定被检者的ABO血型 标本采集 3.1、采血管：应采用EDTA抗凝的采血管采集血标本，标本中不可有血凝块 3.2、标本接收：接收标本时应该对标本标签信息与申请单信息是否相符，填写是否完整；所采用血管是否正确；标本是否符合要求（无溶血无乳糜，无杂物） 3.3、标本处理：接收标本后尽快分离血浆或血清立即进行检测，如暂时不用可放1-10℃范围的标本冰箱保存3天 4、试剂及被检细胞 4.1、抗A、抗B标准血清。 4.2、35%-45%被检红细胞 4.3、2%-4%被检红细胞。 5、设备 5.1、血型血清学试验离心机：久保田公司、Diana公司产品 5.2、eppendorf多功能离心机。 5.3、振荡器 6、实验操作 6.1、玻片法 6.1.1、取一张破片，分区标注-A、-B及被检者编号、血型 6.1.2、载玻片上-A、-B区域分别加入1滴（-50微升）相应-A、-B标准血清及1滴（-50微升）35%-45%被检红细胞。 6.1.3、摇动玻片放置约2分钟 6.1.4、观察并记录结果。 6.2、试管法 医院logo xxx医院血库 编号：XK-SOP 版次：1 实验SOP文件 生效日期： 第2页 共3页 6.2.1、取2只试管分区标注-A、-B及被检者编号、血型。 6.2.2、在-A、-B试管内分别加入1滴（-50微升）相应-A、-B标准血清及1滴（-50微升）2%-4%被检红细胞 6.2.3、离心，1000rcf/15s 6.2.4、肉眼观察并记录结果。 6.3、微板法 6.3.1、取一准备完毕的微板取合适的两孔分别标注-A、-B及被检者编号、血型。 6.3.2、在-A、-B区域分别加入1滴（-50微升）相应-A、-B标准血清及1滴（-50微升）2%-4%被检红细胞 6.3.3、轻摇微孔板，混匀孔中液体 6.3.4、400g离心30s。 6.3.5、用震荡仪震荡微量板震动能使阳性反应出现凝集细胞扣，而若是阴性反应细胞扣则很快消除 6.3.6、判读并记录结果。 7、结果判定 正定型 反定型为什么用o细胞型 血型 抗A 抗B A1细胞 B細胞 O细胞 + – – + – A – + + – – B – – + + – O + + – – – AB -A侧凝集-B侧不凝集，为A型 -A侧不凝集、 -B侧凝集，为B型 -A、-B侧均凝集，为AB型 -A、-B侧均不凝集，为O型 8、臨床意义 8.1、用于临床输血：严重贫血，各种急慢性失血的患者以及手术前需要备的病人，都必须提前检查血型和交叉配血因血型不符嘚输血会造成严重的溶血性输血反应，所以必须要坚持同型输血 8.2、新生儿溶血症：当母亲与胎儿血型不合时，可能会引起胎儿或新生儿嘚免疫溶血性疾病多发生于O型母亲孕育A型或B型胎

ABO血型鉴定正反定型为什么用o细胞型试验方法

(一)单克隆抗A、抗B试剂(由试剂厂家提供)

(三)A型、B型红细胞(本实验室制备的5%混悬液)

(四)EDTA抗凝的待测红细胞全血

1.在一块干净的玻片上,间隔┅定距离做好标记,分别滴一滴抗A和抗B试剂;

2.在每滴试剂中加一滴待测红细胞全血;

3.用竹签混匀试剂和红细胞,并使混合物直径>15mm;

4.轻摇玻片,两分钟内觀察结果,必要时可以在低倍镜下观察;

5.判读、解释并记录反应结果

1.在玻片上间隔一定距离标明Ac和Bc字样。分别滴加5%的A型红细胞悬液、B型红细胞悬液各一滴;

2.在玻片每滴红细胞悬液上滴加待测血清各一滴;

3.混匀(同正定型);

4.轻摇玻片,两分钟内观察结果,必要时可以在低倍镜下观察;

5.判读、解釋并记录反应结果

6.结合正反定型为什么用o细胞型反应结果、判定血型,见表1

表1 ABO血型正反定型为什么用o细胞型试验结果判定

血型抗体试剂+红細胞标本红细胞试剂+血清标本

(一)表中“O”表示无凝集,“+”表示凝集,一般都是3-4个+的强凝集反应;

(二)2分钟后红细胞仍呈均匀混悬状态是阴性反应;

(彡)若得到弱的或可凝集反应结果,该标本应用试管法重新试验;

(四)由于新生儿在出生4~6个月内,血浆中的ABO抗体活动太弱,并且含有来自母亲的抗体,故噺生儿血型只能由检测红细胞抗原的正定型来测定其ABO血型;

(五)做正定型时,还可加一抗A、B血清(O型人血清),以检测ABO弱抗原;做反定型为什么用o细胞型時可以加试一O型红细胞,借以证实是否有不规则抗体的存在。