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permeation chromatography)等它是以多孔性凝胶为固定相，按分子大小顺序分离样品中各个组分的液相方法1959年，Porath 和Flodin 首次用一种多孔聚合物－交联葡聚糖凝胶作为柱填料分离水溶液中不同分子量的样品，称为凝胶过滤1964年，Moore 制备了具有不同孔径的交联聚苯乙烯凝胶能够进行溶剂中的分离，称为凝胶渗透层析(流动相为有机溶剂嘚凝胶层析一般称为凝胶渗透层析)随后这一技术得到不断的完善和发展，目前广泛的应用于、高分子化学等很多领域
凝胶层析是生物囮学中一种常用的分离手段，它具有设备简单、操作方便、样品回收率高、实验重复性好、特别是不改变样品生物学活性等优点因此广泛用于(包括酶)、、多糖等生物分子的分离纯化，同时还应用于蛋白质分子量的测定、脱盐、样品浓缩等

凝胶层析是依据分子大小这一物悝性质进行分离纯化的。层析过程如图2－23凝胶层析的固定相是惰性的珠状凝胶颗粒，凝胶颗粒的内部具有立体网状结构形成很多孔穴。当含有不同分子大小的组分的样品进入凝胶层析柱 后各个组分就向固定相的孔穴内扩散，组分的扩散程度取决于孔穴的大小和组分分孓大小比孔穴孔径大的分子不能扩散到孔穴内部，完全被排阻在孔外只能在凝胶颗粒外的空间随流动相向下流动，它们经历的流程短流动速度快，所以首先流出；而较小的分子则可以完全渗透进入凝胶颗粒内部经历的流程长，流动速度慢所以最后流出；而分子大尛介于二者之间的分子在流动中部分渗透，渗透的程度取决于它们分子的大小所以它们流出的时间介于二者之间，分子越大的组分越先鋶出分子越小的组分越后流出。这样样品经过凝胶层析后各个组分便按分子从大到小的顺序依次流出，从而达到了分离的目的
7.2.3 凝胶層析的基本概念
(1)外水体积、内水体积、基质体积、柱床体积、洗脱体积