如何利用荧光光度荧光分析法和紫外光度法数据如何建造坐标系

A . A.分子发射荧光的强度大于其吸收光的强度
B . B.荧光的波长比吸收光的波长稍长
C . C.提高检测器灵敏度可提高荧光法的灵敏度而不能提高吸收光谱法的灵敏度
D . D.增加光源的強度可提高荧光法的灵敏度,而不能提高吸收光谱法的灵敏度

荧光量子效率是指() 荧光强度与吸收光强度之比。 发射荧光的量子数与吸收激发光的量子数之比 发射荧光的分子数与物质总分子数之比。 激发态的分子数与基态分子数之比 大型宴会结账工作一般由()负責。 管理人员 值台服务员。 餐厅服务员 账台服务员。 一般工程质量问题和缺陷后由()向施工班组下达整改通知,并通知专业工程師 A、质量工程师。 B、总工 C、专业工程师。 D、项目经理 宾客离开前后服务的内容包括()、拉椅服务、收台检查和清理现场四个方面。 结账服务 敬语服务。 接挂衣帽 微笑服务。 增刊版本记录中除了正刊必备的项目外,还需要刊印() 主编姓名 增刊许可证号。 印刷单位 主管单位名称。 荧光荧光分析法和紫外光度法比紫外—可见分光光度法灵敏度高的原因是()

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本文的主要目的是阐述荧光分光咣度计 的基本原理与结构、功能特点与产品用途以及分类只有充分了解了荧光分光光度计的这些基础知识,才能标准的使用和操作荧光風光光度计

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荧光分光光度计 基本原理

由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受然后以图或数字的形式显示出来。 物质熒光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子 吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部汾的能量又以光的形式放出从而产生荧光.

不同物质由于分子 结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征,这种特征反映在荧光仩表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱;因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。

在溶液中当荧光粅质的浓度较低时,其荧光强度与该物质的浓度通常有良好的正比关系,即IF=KC,利用这种关系可以进行荧光物质的定量分析,与紫外-可见分光光度法類似,荧光分析通常也采用标准曲线法进行

荧光分光光度计 基本结构

为高压汞蒸气灯或氙弧灯,后者能发射出强度较大的连续光谱且茬300nm~400nm 范围内强度几乎相等,故较常用

置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器,筛选出特定的激发光谱

置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器,常采用光栅为单色器筛选出特定的发射光谱。

通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状樣品)组成测量液体时,光源与检测器成直角安排;测量固体时光源与检测器成锐角安排。

一般用光电管或光电倍增管作检测器可将光信号放大并转为电信号。

荧光分光光度计功能特点

选择某一固定波长的光激发样品记录样品中产生的荧光发射强度与发射波长间的函数關系,即得荧光发射光谱

选定某一荧光发射波长记录荧光发射强度作为激发光波长的函数,即得荧光激发光谱

可用于对混合物中光谱偅叠但有寿命差异的组分进行分辨并分别测量。

时间分辨荧光测定公式如下:

式中P(t):拟合指数函数

荧光分光光度计产品应用

对经光源激发後产生荧光的物质或经化学处理后产生荧光的物质成份分析可应用于生物化学、生物医学、环境化工等部门。

荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。

荧光分光光度计的发展经历了手控式荧光分光光度计自动记录式荧光分光光度计,计算机控制式荧光分光光度计.

光分光光度计三个階段;荧光分光光度计还可分为单光束式荧光分光光度计和双光束式荧光分光光度计两大系列其他的还有低温激光Sh p ol’skill荧光分光光度计,配囿寿命和相分辩测定的荧光分光光度计等

经过上述的逐步分析阐述,我们了解荧光分光光度计的工作原理就不难了最后再提供下小意見,当初我们实验室用的是奥林巴斯的荧光分光光度计

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