标准平板活菌计数法对食品中细菌菌落计数总数的测定txt——所有资料文档均为本人悉心收集全部是文档中的精品，绝对值得下载收藏！

• 全部按照10版国家标准进行比较.菌落总数平板法：培养基为PCA；培养条件为,36摄氏度48小时；计数有效范围,30—300CFU/皿；计数方法为,直接计数.大肠菌群平板法：培养基为VRBA；培养条件为,36摄氏度24小时；计数有效范围,15—150CFU/皿；计数方法为,需“证实实验”再计数.

  全部

• 选取菌落数在15 CFU～150 CFU 之间的平板分别计数平板上出现的典型和可疑大腸菌群菌落。

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　　即用血细胞计数器进行计数取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内，用显微镜观察计数由于计数室的容积是一定的(O.1mm3)，因而根据计数器刻度内的細菌数可计算样品中的含菌数。本法简便易行可立即得出结果。

　　本法不仅适于细菌计数也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。

　　2、电子计数器计数法:

　　电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化小孔仅能通过一个细胞，当一个细胞通过这个小孔时电阻明显增加，形成一个脉冲自动记录在电子记录装置上。

　　该法测定结果较准确但它只识别颗粒大小，而不能区分是否为细菌因此，要求菌悬液中不含任何碎片

　　常用的有平板菌落计数法，是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的取一定容量的菌悬液，作一系列的倍比稀释然后将定量的稀释液进行平板培养，根据培养出的菌落数可算出培养物中的活菌数。此法灵敏度高是一种檢测污染活菌数的方法，也是目前国际上许多国家所采用的方法使用该法应注意：①一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数，过多或過少均不准确；②为了防止菌落蔓延影响计数，可在培养基中加入O．001％23，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物

　　广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验，是最常用的活菌计数法　

　　比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比与光密度成正比，所以可用光电比色计测定菌液，用光密度(OD值)表示样品菌液浓度

　　此法简便快捷，但只能检测含有大量细菌的悬浮液得出相对的细菌数目，对颜色太深的样品不能用此法测定。

　　5、测萣细胞重量法

　　此法分为湿重法和干重法湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重；干重法系单位体积培养物经离心后，鉯清水洗净放人干燥器加热烘干使之失去水分然后称重。

　　此法适于菌体浓度较高的样品是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。

　　6、测定细胞总氮量或总碳量

　　氮、碳是细胞的主要成分含量较稳定，测定氮、碳的含量可以推知细胞的质量此法适于细胞浓度較高的样品。

这种方法通常用于很小用一般的比浊法无法计数的微生物，比如支原体等因为支原体的液体培养物是完全透明的，呈现為清亮透明红色因此无法用比浊法来计数，由于支原体固体培养很困难用cfu法也不容易计数，因此需要用特殊的计数方法即CCU法。它是鉯微生物在培养基中的代谢活力为指标来计数微生物的相对含量的，下面以解脲脲原体为例简单介绍其操作：

（1）.取12只无菌试管，每┅管装1.8ml解脲脲原体培养基

（2）.在第一管加入0.2ml待测解脲脲原体菌液，充分混匀从中吸取0.2ml加入第二管，依次类推10倍梯度稀释，一直到最末一管

（3）.于37度培养以培养基颜色改变的最末一管作为待测菌液的CCU，也就是支原体的最大代谢活力比如第六管出现颜色改变，他的相對浓度就是10的6次方CCU/ml.

一般来说比浊法和菌落计数法就可以满足绝大多数细菌的计数，但是对支原体这样比较特殊的微生物用CCU法比较合适。

　　测定微生物生长的方法很多各种方法均有其优缺点，也不是在任何情况下都适用在微生物学工作中一般常用的是平皿菌落计数法、计数器法和比浊法。至于哪种方法比较适合你得根据你的具体条件而定。