线粒体mitotracker染色步骤求助

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我们用Mito-Tracker Green (线粒体绿色荧光探针)染色hela细胞线粒体的时候为什么激发出来的光是黄色的,并且还是整个细胞都是黄色的有没有做这个染色的大侠,请指教啊!

    不知道邀请谁试试他们

  • 政治敏感、违法虚假信息
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MitoTracker Green FM是线粒体绿色荧光染料,该染料在线粒体中的定位并不受线粒体膜电位的影响该染料可以染活细胞,但是在醛类固定剂固定之后会導致荧光信号丢失。

1、 传统线粒体探针的缺点:

传统线粒体探针如罗丹明123(Rhodamine 123)虽然可立即聚集在功能线粒体上然而,一旦线粒体膜电位喪失这些探针就能很容易清洗掉离开细胞。当碰到细胞需要进行醛类固定或细胞内含影响膜电位药物的实验中这些探针则受到限制,鈈可使用

Mitotracker正克服传统探针的缺点而被生产,其能够聚集在活线粒体上并且细胞固定中也能良好维持。其中Mitotracker orange,redand deep red这三种探针经透化(permeabilization)后仍能良好维持。在接下来免疫细胞化学(ICC)、原位杂交(ISH)或电镜实验的处理步骤中样本仍保留线粒体的活细胞染色形态另外,Mitotracker探針去除病原细胞线粒体染色可能遇到的一些问题因为一旦线粒体染色后,细胞即可被固定然后进行结果分析

我们提供7种Mitotracker探针,它们在咣谱特性、氧化态以及可否固定几个参数上有所差异具体见下表。

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