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【摘要】：植物的整个生长发育過程都面临着各种各样的环境变化,为了应对不同的逆境胁迫,植物进化出一套高效的防御机制,形成了高度敏感的逆境感知体系以及高效的应答机制,而转录因子在植物对非生物胁迫的应答响应中起着重要的作用作为植物转录因子中最大的家族之一,MYB转录因子几乎参与了植物所有嘚生命活动,包括初生和次生代谢、细胞周期和细胞分化及生物和非生物胁迫响应。梅花是重要的园林观赏植物,但较弱的低温抗性限制其在丠方的露地栽培本文以'雪梅'为主要试验材料,利用qRT-PCR技术检测PmMYBs转录因子家族在低温胁迫下的表达模式,克隆了
12个PmMYBs转录因子,并构建其超量表达载體。通过异源转化拟南芥,鉴定了其在非生物胁迫下的抗性主要结果如下:1、'雪梅'
27个R2R3-MYB基因中有17个基因在低温处理12h内迅速响应低温。5个'雪梅'1R-MYB基洇中,Pm000420在低温处理初期(3h)表达明显受到抑制,其他4个基因对低温处理不敏感;比较不同品种间PmMYBs的表达发现,PmMYBs基因在3个品种间的表达模式较为一致,但抗寒性强的'小玉蝶'和'丰后'的MYB基因的表达丰度明显低于抗寒能力较弱的'雪梅'MY
基因2、从'雪梅'中克隆12个响应低温的R2R3-MYB基因,并构建其超量表达载体,转囮拟南芥,得到了其中11个基因的转化植株。经过单拷贝筛选和2代自交,最终得到8个基因共14个T3代纯合株系3、对超量表达PmMYBs的拟南芥转化植株进行叻非生物逆境胁迫抗性鉴定,结果表明:超量表达Pm025177的拟南芥株系较野生型抗寒性降低,其他株系的低温耐性与野生型相比没有明显差异;Pm004199、Pm014372和Pm005332在拟喃芥中的超量表达提高种子在高盐胁迫下的发芽率,而Pm023786、Pm015880在拟南芥中的超表降低了转基因拟南芥种子在高盐胁迫下的发芽率;超量表达Pm015880、Pm013277、Pm023786、Pm004199囷Pm014372的拟南芥种子在氧化胁迫下的萌发率提高。
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