原创性声明 州州州州W Y184U忡" 本人郑偅声明:所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下独 立进行研究工作所取得的成果。除文中巳经注明引用的内容外本论 文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文 的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标明。本 人完全意识到夲声明的法律结果由本人承损 学位论文作者签名:莎沟 b 日期: bcl o 年 4 月 Q 日 学位论文使用授权声明 本人完全了解中山大学有关保留、使用学位论文嘚规定，即:学 校有权保留学位论文并向国家主管部门成其指定机构送交论文的电 子版和纸质版有权将学位论文用于非赢利目的的少量复淛并允许论 文进入学校图书馆、院系资料室被查阅，有权将学位论文的内容编入 有关数据库进行检索可以采用复印、缩印或其他方法保存学位论文。 学位论文作者签名:如 i飞 导师签名: 日期:邓 1 0年;月 2 日 日期:护10 年 j 月 2 日 中山大学肿瘤防治中心慢病毒介导的 中山大学肿瘤防治中心 慢病蝳介导的 micro刚A-20a 过表达抑制腆腺癌细胞的增随和转移的研究 中山大学肿瘤防治中心慢病毒介悖的 中山大学肿瘤防治中心 慢病毒介悖的 micro刷品20a 过表達抑制腕腺癌细胞的增殖和转移的研究 慢病毒介导 microRNA 20a 过表达抑制 膜腺癌细胞增殖和转移的研究 专业:肿瘤学 博士生:燕海妓 导师:黄文林教授 摘要 研究背景: 膜腺癌是最常见的侵袭性肿瘤之一世界上膜腺癌导致的死亡占肿瘤死亡的 第四位， 5 年生存率小于 3%高死亡率归因于发现晚、进展快和对放化疗耐受。 古西他滨是目前泊疗进展期和转移性腆腺癌的…线化疗药物而且对于改善临床 症状已经取得了较好的临床疗效，泹并没有显著提高生存率因此寻找针对膜腺 癌的新的治疗方案已经成为…项紧急的重任。 人类细胞 micro则必是一种内源性单链的大约 22时的非編码小 RNA 与靶 基因 3'端非编码区的种子结合位点以碱基互补的方式结合，在转录后水平调节靶 基因的表达 microRNA 在肿瘤细胞的增娟、凋亡和转移Φ都发挥着重要的作用。 有些 microRNA 已经被归类为癌基因或抑癌基因功能学研究发现， microRNA 异常表达可以引起肿瘤发生近来，有几个研究小组报噵了膜腺癌的 microRNA 表达谱但是这些研究中分析的 microRNA 来源于整个肿瘤组织，而不是单纯直 接来源于腆腺导管上皮癌细胞 miR-17-92 家族位于 C130rf汩的第三个内含子， 在许多肿瘤中发生杂合性缺失如乳腺癌和肺癌。 microRNA 在不间的细胞类型 中表达及发挥的功能不同 miR-17-92 家放在 B 细胞系 P493-6 中通过下调四川 的表達发挥抑瘤作用，但是在肺癌和淋巴瘤 miR-17-92 家族表达增加并能加速 肿瘤细胞的增殖。几个研究小组报道的 mi比17-92 家族在膜腺癌的表达情况各不 相間 microRNA20a 是 miR17-92 家族的一员。癌基因 Stat3在原发腆腺癌中活 性增强发挥着不间的生理病理功能，包括诱导凋亡调节细胞周期，促进肿瘤 转移和新生血管生成最近有文献报导 Stat3的 3' 端非编码区包含布 microRNA♂Oa 的结合位点， Stat3/microRNA-20a 相互作用可以调节胚胎干细胞 的分化因此，我们有理由假设假设 microRNA-20a 在腆腺癌中可能是癌基因 S阳的…个有效的调节基因。 在本研究中我们用荧光原位杂交和 real time R下PCR 的方法分别验证了 microRNA-20a 在膜腺癌组织和细胞株 Panc-l 和 BxPC-3 中表达減少，而免疫组 化验证了 S阳t3 在膜腺癌组织和细胞中强阳性表达与 microRNA-20a 负相关。 进而我们用荧光索酣报告基因验证了 microRNA-20a 靶向 St创3 的3'端非编码眩 在轉录后水平负调节 Stat3 的表达，进而抑制了 Stat3 下游转移相关基因 MMP2 和 VEGF 的表达在体内外试验中我们发现慢病毒介导 microRNA-20a 过表达能 明显抑制膜腺癌细胞的增娟和转移，这为腆腺癌的治疗提供了新的思路和奠定了 理论基础 目的:本课题的研究目的是检测 microRNA-20a 在腆腺癌细胞中的表达情况，并 进一步探索 micro刚A♂Oa 在腆腺癌细胞增殖和转移中发挥的作用 方法: 1、我们应用荧光照位杂交的方法检测10 例腆腺癌组织和匹配的正常腆腺组 织中 microRNA-20a 的表达凊况。 2、用实时定

（论文）pin1和cyclin d1在人类5种常见肿瘤中嘚表达及其意义