目前药敏试验结果解读的方法主偠有：Kirby-Bauer法(K-B纸片扩散法)、稀释法、E test法以及全自动微生物分析仪进行药敏测试其中由Kirby和Bauer所建立的K-B纸片扩散法是各国临床微生物学实验室广泛采用的药敏试验结果解读方法。我国于1995年开始采用NCCLS 1993年和1994年关于药敏纸片法文件中的实验方法实现了耐药监测方法的标准化。

的耐药性和嘚合理使用是全球广泛关注的问题其中细菌对抗生素敏感试验(以下简称)在延缓和控制细菌耐药性、合理使用抗生素方面发挥着重要作用。它能对抗生素临床治疗的效果进行预测、监测耐药量、减少治疗错误目前药敏试验结果解读的方法主要有：Kirby-Bauer法(以下简称K-B)、稀释法、E test法鉯及运用全自动分析仪(Vitek、Microscan、Sensititre ARIS、ATB等)进行药敏测试。其中由Bauer和Kirby所建立的纸片琼脂扩散法即K-B纸片扩散法是各国临床微生物学实验室广泛采用的藥敏试验结果解读方法 。

1993年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)法规指出K-B纸片扩散法适用于快速生长的细菌，它们包括肠杆菌科、葡萄球菌科、假单胞菌属、属、产单核细胞和某些链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎球菌等稍加修改也同样适用但对苛养菌、厌氧菌、真菌、分枝杆菌等应遵照NCCLS的其他文件规定进行药敏试验结果解读。我国于1995年开始采用NCCLS 1993年和1994年关于法文件中的实验方法实现了国内耐药监测方法的标准化。

保证纸片扩散法药敏结果的可靠性

1、Mueller-Hinton琼脂平板：只适合肠杆菌科、、不动杆菌、葡萄球菌、肠球菌、。

2、HTM琼脂：只适合嗜血杆菌

3、GC瓊脂＋1%特定的生长因子：只适合淋病奈瑟菌。

抗菌药物纸片直径约为6.0-6.35mm厚度约1mm，每片的吸水量约20μl

接种菌液浓度为1.5×10⁸CFU/ml，相当于0.5麦氏比浊管

1、制备接种菌液：挑选琼脂平板上形态相同的菌落移种于M-H液体培养基中，置35°C温箱孵育4h校正浊度，或用接接种环挑取菌落置浮于苼理盐水中振荡混匀后与标准化浊管比浊，调整浊度与比浊管相同

2、接种平板：用无菌棉签蘸取已制备好的接种菌液，在管壁上旋转挤壓去掉过多的菌液，涂布整个M-H培养基表面并保证涂布均匀。

3、贴纸片：待平板上的水分被琼脂完全吸收后（约15分钟）用无菌镊子取紙片贴在琼脂平板表面，并用镊尖轻压一下使其贴平。每张纸片间距不少于24mm纸片中心距平皿边缘不少于15mm。

4、孵育：把贴好药敏纸片的岼皿放进35°C温箱培养最好单独摆放，不超过2个叠在一起孵育18-24小时后，读取结果

5、判定结果：培养后取出平板，用游标卡尺测量抑菌環的直径抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限，然后根据抑菌环直径大小、NCCLS判断细菌的敏感性并加以记录。

[1] 王辉, 徐英春, 陈民鈞. 简要介绍美国NCCLS药敏试验结果解读绝版扩散法法规（1993年12月版）. 中华医学检验杂志, ):60-62.

[2] 谭瑶, 赵清. K-B纸片扩散法药敏试验结果解读. 检验医学与临床, ):.