作为多种药剂抗性调节剂 的稠合嘚咪唑衍生物
本发明系关于具有多种药剂抗性调节性质的稠合咪唑衍生物及其制备方法,另外还关于含它们的组合物以及它们作为药劑的用途。
化疗为治疗癌症的最常使用形式之一且经发现在治疗几乎全部类型的癌症都有临床上的应用,在癌症化疗中的一个主要问题昰发展出对细胞毒性药剂的抗性对于第一次化疗有反应的病人经常因为肿瘤细胞似乎对化疗药剂产生抗性或对先前治疗使用的细胞毒性藥剂产生抗性而再度发病,肿瘤也会对先前没有暴露过的细胞毒性药剂显现抗性该药剂与先前用于治疗肿瘤的任何药剂没有结构或活性機转的相关性,这些效应的实例可见于例如血液性肿瘤(白血病、淋巴瘤)、肾癌及乳癌
同样地,某些病原可对先前治疗这些病原产生的疾疒或失调所使用的药剂产生抗性病原也会对先前没有暴露过地药剂显现出抗性,这些效应的实例包括多种药剂抗性形式之疟疾、结核病、利什曼病及阿米巴痢疾
癌症细胞或病原对于结构或活性机转几乎没有类似性的多种药剂显现抗性的上述现象,统称为多种药剂抗性(MDR)
茬本案中使用的具有MDR调节性质的MDR调节剂或化合物系定义为可降低、避免、消除、抑制或逆转多种药剂抗性的化合物。
因为MDR为化疗上述疾病嘚主要问题可以抑制或逆转多种药剂抗性的化合物将非常有用。
在1992年12月16日公告的EP-0,518,435及EP-0,518,434中揭示了具有抗过敏活性的稠合的咪唑化合物在1994年6朤23日公告的WO-94/13680揭示了具有抗过敏活性的取代的咪唑并[1,2-a](吡咯并、噻吩并及呋喃并)[2,3-d]吖庚因衍生物,在1995年1月26日公告的WO-95/02600也揭示了具有抗过敏活性的哌啶基-或亚哌啶基取代的咪唑并吖庚因衍生物
本发明化合物与所引用的先有技术中揭示的已知化合物在结构上的不同点是取代基位在哌啶基团的氮原子上,且在药理上的不同点是这些化合物具有出人意料的MDR调节性质
本发明系关于下式的化合物其N-氧化物形式,其药学上可被接受的加成盐类及立体化学异构物形式其中
R1为氢、卤素或甲酰基、C1-4烷基、被1至2个独立地选自羟基、C1-4烷氧基、C1-4烷羰氧基、咪唑基、噻唑基戓噁唑基的取代基取代的C1-4烷基;或为下式的基团:
其中每个R8彼此独立地为氢、卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、羟基C1-4烷基、羟基羰基C1-4烷基、甲酰基、羧基、被羧基取代的乙烯基、或被C1-4烷氧羰基取代的乙烯基;
Q为苯基、被一或两个选自包括氢、卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤代C1-4烷基的取玳基取代的苯基、萘基、被一个或两个选自包括氢、卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤代C1-4烷基的取代基取代的萘基、吡啶基、被一个或两个選自包括氢、卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤代C1-4烷基的取代基取代的吡啶基、喹啉基、被一个或两个选自包括氢、卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或卤代C1-4烷基的取代基取代的喹啉基;
Ar为苯基、或被1、2或3个彼此独立地选自包括氢、卤素、C1-4烷基或C1-4烷氧基的取代基取代的苯基;
在前述萣义及下文中使用的卤素是统称氟、氯、溴及碘;C1-4烷基定义为含1至4个碳原子的直链及支链饱和烃基,例如甲基、乙基、丙基、丁基、1-甲乙基、2-甲丙基、2,2-二甲乙基等;C1-6烷基包括C1-4烷基及其含5至6个碳原子的高级同系物例如戊基、己基、3-甲丁基、2-甲戊基等;C1-12烷基包括C1-6烷基及其含7至12個碳原子的高级同系物,例如庚基、辛基、壬基、癸基等;C1-4烷二基定义为含1至4个碳原子的二价直链及支链饱和烃基例如亚甲基、1,2-乙二基、1,3-丙二基、1,4-丁二基等;C1-5烷二基包括C1-4烷二基及其含5个碳原子的高级同系物,例如1,5-戊二基等;C1-6烷二基包括C1-5烷二基及其含6个碳原子的高级同系物例如1,6-己二基等;C2-6烯基定义为含一个双键及具有2至6个碳原子的直链或支链烃基,例如乙烯基、2-丙烯基、3-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、3-甲基-2-丁烯基等;C2-6烯二基定义为含一个双键及2至6个碳原子的二价直链或支链烃基例如乙烯二基、2-丙烯二基、3-丁烯二基、2-戊烯二基、3-戊烯二基、3-甲基-2-丁烯二基等;卤代C1-4烷基定义为经单一或多卤素取代的C1-4烷基;C1-6烷二基-氧基-C1-6烷二基定义为例如化学式-CH2-CH2-O-CH2-CH2-、-CH2-CH(CH2CH3)-O-CH(CH3)-CH2-、-CH(CH3)-O-CH2-等的二价基团。
当二价基团A1定义为C1-6烷二基羰基或C1-6烷二基氧基时该基团的C1-6烷二基基团优选连接至哌啶环的氮原子上。
当R1或R10定义为咪唑基、噻唑基或噁唑基时所述取代基优選经由碳原子连接至分子的其他部分。
不包括其中Z为-CH2-且任选的键存在的化合物因为此化合物的三环部分会自发性地芳香族化,因而丧失哆种药剂抗性调节的性质
上述提到的药学上可被接受的加成盐类系指包括式(Ⅰ)化合物可以形成的具有治疗活性的无毒酸加成盐类,后者鈳方便地得自将碱形式用适当的酸处理适当的酸包括例如无机酸类例如氢卤酸类,例如氢氯酸或氢溴酸;硫酸;硝酸;磷酸等;或有机酸类例如醋酸、丙酸、羟基醋酸、乳酸、丙酮酸、乙二酸、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、顺丁烯二酸、反丁烯二酸、羟基丁二酸、2,3-二羟基丁②酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、环己胺基磺酸、水杨酸、对氨基水杨酸、巴莫酸(pamoic)等
上述提到的药学上可被接受嘚加成盐类系指包括式(Ⅰ)化合物可以形成的具有治疗活性的无毒碱加成盐类,此种碱加成盐类形式的实例为例如钠、钾、钙盐以及与药學上可被接受的胺类例如氨、烷基胺类、苄星、N-甲基-D-葡糖胺、海巴明(hydrabamine)、氨基酸类例如精氨酸、赖氨酸的盐类。
相反地该盐类形式可用适當的碱或酸处理而转化成游离的酸或碱的形式。
在上文中使用的加成盐类之称呼也包括式(Ⅰ)化合物及其盐类可以形成的溶剂化物此种溶劑化物为例如水合物、醇化物等。
在上文中使用的立体化学异构物的称呼定义为式(Ⅰ)化合物可具有的不同异构物及构象形式除非另外提忣或指出,化合物的化学称呼代表所有可能的立体化学异构和构象异构物形式该混合物含基本分子结构的全部非对映异构物、对映异构粅及/或构象异构物,式(Ⅰ)化合物的纯形式或彼此间的混合物的全部立体化学异构物形式都包括在本发明的范围内
本发明的部分化合物可存在为不同的互变形式,且全部的这些互变形式都包括在本发明的范围内例如,其中Q为经羟基取代的吡啶基或喹啉基的式(Ⅰ)化合物可存在为其相对应的互变形式。
式(Ⅰ)化合物的N-氧化物形式系指包括式(Ⅰ)化合物其中一或多个氮原子被氧化成所谓的N-氧化物特别是其中哌啶氮被氧化的N-氧化物的那些化合物。
第一组令人感兴趣的化合物包括下列式(Ⅰ)化合物其中适用一或多个下列限制:
第二组令人感兴趣的化匼物包括下列式(Ⅰ)化合物,其中适用一或多个下列限制:
另一组特别的化合物为下列式(Ⅰ)化合物其中Q为2-喹啉基、1-萘基、2-萘基、苯基或2-吡啶基且该Q任选地被C1-4烷基、卤素、卤代C1-4烷基或C1-4烷氧基取代。
再一组特别的化合物为下列式(Ⅰ)化合物其中Q为2-喹啉基、1-萘基、2-萘基、6-甲基-2-喹啉基、6-氯-2-吡啶基、4-甲氧苯基、3,5-二甲氧苯基、3,5-二氟苯基或3,5-双(三氟甲基)苯基。
在下列段落中揭示式(Ⅰ)化合物的不同制备方法为了简化式(Ⅰ)化合粅及其制备过程间的中间物的结构式,稠合的咪唑基团在下文中将用称号T代表
制备本发明的化合物通常可用式(Ⅱ)的中间物将式(Ⅲ)的中间粅N-烷基化,其中W为适当的离去基团举例而言例如氯、溴、甲磺酰氧基或苯磺酰氧基,此反应是在反应惰性溶剂例如乙醇、二氯甲烷、甲基异丁基酮或N,N-二甲基甲酰胺中且在合适的碱例如碳酸钠、碳酸氢钠或三乙胺存在下进行。搅拌可增加反应速率此反应方便在室温及回鋶温度间进行。
制备本发明的化合物也可用式(Ⅳ)的中间物将式(Ⅴ)的中间物O-烷基化其中W1为适当的离去基团,举例而言例如氯、溴、甲磺酰氧基或苯磺酰氧基此反应在反应惰性溶剂例如N,N-二甲基甲酰胺中,且在合适的碱例如氢化钠存在下优选在室温及回流温度间进行。
制备其中-A1'-代表C1-6烷二基、C1-6烷二基氧基、C1-6烷二基氧基C1-6烷二基的式(Ⅰ)化合物该化合物用式(Ⅰ-i)代表,可用式(ⅩⅨ)的中间物将式(Ⅲ)的中间物还原性N-烷基化在中间物(ⅩⅨ)中,-A1″-代表一个直接键、C1-5烷二基、C1-5烷二基氧基或C1-6烷二基氧基C1-5烷二基其中甲酰基是连接在C1-5烷二基基团上。
该还原性N-烷基化的进行是在反应惰性溶剂例如二氯甲烷、乙醇、甲苯或其混合物中且在还原剂例如氢硼化钠、氰基氢硼化钠或三醋酰氧基氢硼化物存在下,也可方便地使用氢气作为还原剂并结合适当的催化剂举例而言例如Pd/C或Pt/C。在氢气作为还原剂的情形下较宜在反应混合物中添加脫水剂,举例而言例如叔丁氧基铝为了避免不希望的进一步氢化反应物及反应产物的某些官能基,也较宜在反应混合物中添加适当的催囮剂毒物例如噻吩或喹啉-硫,为了提高反应速率温度范围可增加至室温至反应混合物的回流温度之间。
在下列段落中揭示根据本领域Φ已知的步骤官能团转化方法将式(Ⅰ)化合物相互转化的不同方法为了简化式(Ⅰ)化合物之结构式,经取代的哌啶基团在下文中将用称号M代表
例如,其中R1为经羟基取代的C1-4烷基的式(Ⅰ)化合物该化合物用式(Ⅰ-a)代表,可根据本领域中已知的酯化方法例如在碱存在下用酰基卤处悝,以便中和在反应过程中释出的酸而转化成相对应的其中R1为C1-4烷羰氧基C1-4烷基的式(Ⅰ)化合物,该化合物用式(Ⅰ-b)代表
其中R1为CH2OH的式(Ⅰ-a)化合物,该化合物用式(Ⅰ-a-1)代表可用合适的试剂例如氧化锰(Ⅳ)之氧化反应,而转化成相对应的其中R1为CHO的式(Ⅰ)化合物该化合物用式(Ⅰ-c)代表。
另外其中R1含羧基的式(Ⅰ)化合物,该化合物用式(Ⅰ-d)代表可根据本领域中已知的方法,例如在酸或碱存在下用醇处理而转化成相对应的酯类。
式(Ⅰ-c)化合物在苄基三甲基氢氧化铵的存在下,用甲基甲硫甲基亚砜在反应惰性溶剂例如四氢呋喃中处理可转化成其中R1为甲氧羰基甲基的式(Ⅰ)化合物,该化合物用式(Ⅰ-f)代表
同样地,式(Ⅰ-c)化合物可在醋酸、MnO2及NaCN存在下用醇例如甲醇处理,而转化成其中X为一个直接键的式(Ⅰ-e)化合物该化合物用式(Ⅰ-e-1)代表。
其中Z2代表-C(=O)-CH2-的式(Ⅰ)化合物该化合物用式(Ⅰ-g)代表,可根据本领域中已知的还原步骤例如在合适的溶剂例洳甲醇中用氢硼化钠处理,而转化成相对应的醇类
起始物质及部分中间物为已知的化合物,可买到或根据本领域中一般常规的反应步骤淛备例如,许多式(Ⅲ)的中间物尤其是其中Z为Z2的化合物,为已知的化合物可根据揭示在EP-0,518,435-A、EP-0,518,434-A及WO-95/02600的本领域中已知的方法制备。
在下列段落Φ揭示在前述制备中使用的中间物之数种制备方法
制备式(Ⅱ)中间物可用其中W1为合适的离去基团例如卤素、甲磺酰氧基或苯磺酰氧基的式(Ⅳ)中间物,将中间物(Ⅵ)的芳族羟基O-烷基化随后例如用甲磺酰氧基氯或卤化剂例如POCl3处理中间物(Ⅶ),将中间物(Ⅶ)的羟基转化成离去基团W
该O-烷基化反应可方便地在反应惰性溶剂例如甲醇或N,N-二甲基甲酰胺中,在适当的碱例如碳酸钠或碳酸氢钠存在下优选在室温至反应混合物的囙流温度间,将反应物混合来进行
同样地,制备其中-A1-为C1-6烷二基氧基的式(Ⅱ)中间物该中间物用式(Ⅱ-a)代表,可用式(Ⅸ)中间物在适当的碱例洳碳酸钾存在下及任选地在反应惰性溶剂例如N,N-二甲基甲酰胺、乙腈或四氢呋喃存在下,与式(Ⅷ)中间物反应随后例如用甲磺酰氧基氯或鹵化剂例如POCl3处理,将羟基转化成离去基团W产生式(Ⅱ-a)中间物,有利地在室温和回流温度间进行该O-烷基化反应
在一具体实施方案中,本发奣也提供了新颖的式(Ⅱ)化合物用式(Ⅱ-b)的化合物代表,其中-A1'-基团代表C1-6烷二基、C1-6烷二基氧基或C1-6烷二基氧基C1-6烷二基且Q1代表未经取代的除苯基外的全部取代基Q
制备其中-A1'代表C1-6烷二基、C1-6烷二基氧基或C1-6烷二基氧基C1-6烷二基的式(Ⅴ)中间物,该中间物用式(Ⅴ-a)代表可用式(Ⅹ)中间物将式(Ⅲ)Φ间物还原性N-烷基化,式(Ⅹ)中间物可任选含一个被保护的羟基其可在还原性N-烷基化后,用本领域中已知的方法去除保护在该中间物(Ⅹ)Φ,-A1″-代表一个直接键、C1-5烷二基、C1-5烷二基氧基或C1-6烷二基氧基C1-5烷二基上其中甲酰基连接在C1-5烷二基基团上,该还原性N-烷基化反应可根据上述步骤进行
在反应式1中,式(Ⅻ)中间物可以类似于式(Ⅺ)中间物的方式环化得到式(ⅩⅢ)的醇,其可随后用本领域中已知的氧化方法氧化成式(ⅩⅣ)的酮制备式(ⅩⅥ)中间物可经由将其中PG为适当的保护基例如苄基的格利雅试剂(ⅩⅤ)加至在反应惰性溶剂例如四氢呋喃中的式(ⅩⅣ)的酮。制备式(Ⅲ-a)中间物可经由将中间物(ⅩⅥ)脱水随后再将中间物(ⅩⅧ)催化氢化,该脱水反应可方便地使用常规的脱水剂例如硫酸根据本领域中已知的方法进行,该催化氢化反应可根据本领域中已知的方法进行例如在反应惰性溶剂例如甲醇中,在合适的催化剂例如Pd/C及在氢气存在下搅拌任选地可将温度提高至室温和反应混合物的回流温度间,且必要时可增加氢气的压力。
此外制备其中R1为卤素的式(Ⅲ-a)中间粅,该中间物用式(Ⅲ-a-1)代表可将式(ⅩⅧ)中间物卤化,其中PG为保护基例如C1-6烷基且随后再去除保护。例如当PG为C1-6烷基时可用氯甲酸C1-4烷基酯羰基化,随后再用碱水解而将PG去除
进行该卤化反应可方便地用卤化剂例如N-氯代琥珀酰亚胺或N-溴代琥珀酰亚胺处理中间物(ⅩⅧ),在反应惰性溶剂例如二氯甲烷中任选地在引发剂例如过氧化二苯甲酰存在下进行。
同样地其中Z为Z1且虚线不是一个键的式(Ⅲ)中间物,该中间物用式(Ⅲ-b)的化合物代表通常可经由将式(Ⅺ)的中间物环化而制得。
进行环化反应可方便地用适当的酸处理式(Ⅺ)的中间物产生式(Ⅲ-a)的中间物,适當的酸为例如甲磺酸或三氟甲磺酸必须注意只有其中R1及R2在反应条件下是稳定的式(Ⅲ-a)的中间物,才可根据上述的反应步骤制备
式(Ⅰ)化合粅及部分中间物在结构中可有一或多个立体中心,以R或S构型存在
根据上述方法制备的式(Ⅰ)化合物可合成为立体异构物形式的混合物,尤其是对映异构物的外消旋混合物形式其可根据本领域中已知的拆分步骤彼此分离,式(Ⅰ)的外消旋化合物与合适的手性酸反应可转化成楿对应的非对映异构的盐的形式,随后例如选择性或分步结晶法将该非对映异构的盐形式分离并用碱从其中释出对映异构物。另外一种汾离对映异构物形式式(Ⅰ)化合物的方法包括使用手性固相的液相层析法该纯立体化学异构物形式也可衍生自相对应的纯立体化学异构物形式的适当起始物质,其条件是该反应系以立体专一性进行优选地当需要特定的立体异构物时,该化合物用立体专一性的制备方法合成这些方法有利地使用纯对映异构性的起始物质。
式(Ⅰ)化合物、N-氧化物形式、其药学上可被接受的加成盐类及立体异构物形式具有重要嘚药理性质,可抑制或逆转多种药剂抗性并可经由MDR在活体外的测试(实例C-1)及MDR在活体内的测试(实例C-2)得到的结果证实。
所称的多种药剂抗性(MDR)系敘述一种现象其中细胞尤其是癌症细胞、或病原对多种在结构或活性机理上很少有相同性的药剂显现抗性,MDR的主要原因是过度表达与细胞膜相关的运输体即P-糖蛋白其可与药剂结合及在细胞毒性达到临界浓度前,活性地将其从细胞内排出而降低细胞毒性药剂在细胞内的浓喥(Dalton W.S.,Seminarsin oncology,20:66-69,1993)
其他抗性机制包括改变局部同质异构酶(topoisomerase)、谷胱甘肽S-转移酶、核苷运输、胸苷酸合成酶、二氢叶酸还原酶及金属硫因。
而且式(Ⅰ)化合粅可用于抑制化疗药剂被与细胞膜相关的运输体输送透过细胞膜,尤其是与细胞膜相关的P-糖蛋白体运输因而保持此药剂的效应。
鉴于其MDR抑制或逆转活性式(Ⅰ)化合物适于作为药剂使用,特别是经由服用有效治疗剂量的式(Ⅰ)化合物减低、消除或逆转对化疗药剂的治疗产生或存在的抗性或避免产生此种抗性。可被多种药剂的抗性阻碍治疗的疾病、失调或征候为例如赘瘤(或肿瘤)生长造成的赘瘤症例如血液性肿瘤(白血病、淋巴瘤)、肾癌、卵巢癌、乳癌、黑瘤、结肠及肺的肿瘤等;及多种药剂抗性形式的疾病例如疟疾、结核病、利什曼病、阿米巴痢疾等;它们由对下列药剂产生抗性的病原造成所述药剂是例如对氯喹、乙胺嘧啶-周效磺胺、甲氟喹、卤芬川(halofantrine)、异烟肼、链霉素、利福平、吡嗪酰胺、萘啶酸、胺比西林等
式(Ⅰ)化合物可方便地与化疗药剂结合使用,本发明因此提供了一种结合物其中含本案所定义的组合粅及治疗活性药剂,尤其是抗肿瘤剂此结合物可分别、同时、并存或连续地经由上述任何方式用药,或此结合物也可以一个药物制剂的形式因此,含(a)式(Ⅰ)化合物及(b)上述定义的化疗药剂之药物产品作为结合的制剂供同时、分别或依次用于治疗或预防处理患有失调或征候嘚温血动物,其中多种药剂的抗性阻碍治疗此种产物可含一个套药(kit),它含一个容器其中含式(Ⅰ)化合物的药物组合物,及另一个容器其中含化疗药剂的药物组合物,产物中两种活性成分分开的优点是适量的各成分、及用药的时间与顺序可根据病人的情形而选择
适于在仩述定义的结合物中使用的化疗药剂包括例如抗肿瘤剂,例如供治疗肿瘤症的阿霉素、柔毛霉素、强力阿霉素、长春新碱、长春花碱、鬼臼乙叉甙、紫杉酚、大特利(taxotere)、更生霉素、米多安特(mitoxamtrone)、自力霉素、三麦吹(trimetrexate)等及供治疗由对多种药剂具有抗性的病原引起的疾病的药剂例如氯喹、乙胺嘧啶-周效磺胺、甲氟喹、卤芬川、异烟肼、链霉素、萘啶酸及胺比西林。
当式(Ⅰ)化合物与化疗药剂结合使用时化疗药剂的剂量可以与单独使用时的剂量不同,因此当式(Ⅰ)化合物与化疗药剂结合使用时后者的剂量可相同或在通常情形下低于当化疗药剂单独使用時的剂量,本领域内普通技术人员可容易地决定适当的剂量
鉴于式(Ⅰ)化合物的上述用途,本发明也提供一种治疗其中多种药剂的抗性阻礙治疗的疾病或征候的温血动物的方法该方法包括全身性地用药治疗量的式(Ⅰ)化合物,可有效地防止、抑制或逆转多种药剂抗性作用
夲发明提供了一种使用式(Ⅰ)化合物的方法,经由给予有效治疗剂量的式(Ⅰ)化合物供减低消除或逆转对抗肿瘤药剂的治疗产生或存在的抗性,或避免产生此种抗性
同时也提供了一种使用式(Ⅰ)化合物的方法,供治疗对药剂产生了抗性的病原造成的疾病或征候该方法包括全身性地给予治疗量的可有效地抑制或逆转多种药剂抗性的式(Ⅰ)化合物,及可治疗那些征候的药剂
为了用药的方便,本发明化合物可针对鼡药目的配制成不同的药剂形式为了制备本发明的药物组合物,一种作为活性成分的有效剂量的特定化合物以碱或酸加成盐的形式,與药学上可被接受的载剂紧密地混合在一起该载剂可根据用药所需的制剂形式而有多种不同的形式,这些药物组合物较宜为单位剂量形式优选地适合于经口服、直肠或不经肠道的注射用药,例如在制备口服剂量形式的组合物时可以使用任何常用的药物介质,在口服液體制剂例如悬浮液、糖浆、酏剂及溶液的情形下举例而言例如水、二醇类、油类、醇类等;或在粉剂、丸剂、胶囊及片剂的情形下,用凅体载剂例如淀粉类、糖类、高岭土、润滑剂类、粘着剂类、崩解剂类等因为用药的方便性,片剂及胶囊代表最有利的口服剂量单位形式其中明显地系使用固体药物载体。对于不经肠道的组合物载剂通常包括,至少为大部分无菌水,虽然也可包括其他的成分例如以便帮助溶解度例如制备注射用的溶液,其中载体包括盐水溶液、葡萄糖溶液或盐水及葡萄糖溶液的混合物也可制备注射用的悬浮液,其中也可使用适当的液体载体、悬浮剂等在适于皮下用药的组合物中,载剂任选地包括穿透增强剂及/或合适的润湿剂视需要结合少量仳例的合适天然添加剂,该添加剂不会对皮肤造成明显地有害效应该添加剂可促进对皮肤的用药及/或帮助制备所需的组合物,这些组合粅可以不同的方式用药例如皮肤药布、点剂(spot-on)、软膏。式(Ⅰ)的酸加成盐类因为比相对应的碱形式有较高的水溶性明显地较适于制备水性組合物。尤其适宜将上述药物组合物调配成剂量单位形式供方便用药及使剂量均匀,在本专利说明书及权利要求范围中所称的剂量单位形式系指实体上分离的单位适于作为单位剂量使用,每个单位含经过计算的可产生所需的治疗效应的预先确定量的活性化合物以及所需偠的药物载体此种剂量单位形式的实例为片剂(包括刻线或包衣的片剂)、胶囊、丸剂、粉剂包装、糯米纸囊剂、注射用的溶液或悬浮液、茶匙或汤匙等,及其分离的倍数量
本组合物有利地是以分离的剂量单位,尤其是单位剂量形式存在一种方便的单位剂量制剂含0.1至1000毫克嘚活性化合物,尤其是1至200毫克治疗时每日剂量所需的式(Ⅰ)化合物的量不只随着选定的化合物改变,也随着用药途径、需治疗的病况本质忣病人的年龄、体重情形而不同将由诊断医生做最后的决定,但是一般而言合适的每日剂量范围为每天约0.1至约5000毫克,尤其是每天约1至1000毫克更特别是每天约10至500毫克,供预防使用的合适每日剂量通常也在相同的范围内
以下“THF”代表四氢呋喃,“DIPE”代表二异丙醚“DCM”代表二氯甲烷,“DMF”代表N,N-二甲基甲酰胺且“CAN”代表乙腈
a)在室温下,将4-羟基苯乙醇(103.5克)在乙醇(1.5升)中搅拌逐滴加入氢氧化钾(84克)的乙醇(1.5升)溶液,曆时1小时分批加入2-(氯甲基)喹啉单盐酸盐,历时25分钟将反应混合物搅拌及回流12小时,将反应混合物倒入水(5升)中并激烈搅拌此混合物过濾除去沉淀物并用水(2升)清洗,加入甲苯并在旋转蒸发器中共沸将残留物干燥,产生187克(89%)4-(2-喹啉基甲氧基)苯乙醇(中间物1熔点144.8℃)。
b)将中间物(2.79克)及N,N-二乙基乙胺(1.2克)在DCM(50毫升)中的混合物在冰浴中搅拌在低于10℃的温度下逐滴加入甲磺酰氯(1.26克),使混合物上升至室温并搅拌1小时加入水并鼡DCM萃取混合物,有机层用水清洗、干燥、过滤并蒸发产生3.8克(100%)4-(2-喹啉基甲氧基)苯乙醇甲磺酸酯(中间物2),以相同的方式合成3-(2-喹啉基甲氧基)苯乙醇甲磺酸酯(中间物3)及4-〔(6-甲基-2-喹啉基)甲氧基〕苯乙醇甲磺酸酯(中间物4)。
a)将3-(2-喹啉基甲氧基)酚(12.5克)、碳酸钾(10.4克)及1,3-二噁烷-2-酮(44克)在100℃的油浴中加热2尛时使混合物冷却,倒入水中并用DCM萃取将有机层干燥、过滤并蒸发,用柱层析法在硅胶上将残留物纯化(洗脱剂:CH2Cl2/CH3OH 97/3)收集纯的洗脱部分並蒸发,残留物在DIPE中搅拌过滤沉淀物并干燥,得到11.9克(80.6%)2-〔3-(2-喹啉基甲氧基)苯氧基〕乙醇(中间物5)
b)将中间物5(2.95克)及N,N-二乙基乙胺(1.2克)在DCM(50毫升)中的混匼物在冰浴中搅拌,在低于5℃的温度逐滴加入甲磺酰氯(1.26克)使混合物上升至室温并搅拌1小时,加入水并搅拌混合物将混合物分离并用DCM萃取水层,合并的有机层用水清洗、干燥、过滤并蒸发产生4.5克(100%)2-〔3-(2-喹啉基甲氧基)苯氧基〕乙醇甲磺酸酯(中间物6),以相同的方式合成2-〔4-(2-喹啉基甲氧基)苯氧基〕乙醇甲磺酸酯(中间物7)。
将α-〔1-(苯甲基)-1H-咪唑-2-基〕-哌啶甲醇(5.4克)在三氟甲磺酸(25毫升)中的混合物在100℃下搅拌过夜使反应混合粅冷却,倒入冰中并用NaOH碱化用DCM萃取混合物,分离的有机层经干燥、过滤并将溶剂蒸干在玻璃过滤器中经硅胶纯化残留物(洗脱剂:CH2Cl2/(CH3OH/NH3)95/5,梯喥提高至90/10)收集纯的洗脱部分并将溶剂蒸干,得到2.5克(50%)5,10-二氢-10-(4-哌啶基)-咪唑并[2,1-b]异喹啉(中间物10)
a)将6,11-二氢-11-(1-甲基-4-亚哌啶基)-5H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因(28克)在DCM(500毫升)Φ搅拌直到完全溶解,加入过氧化二苯甲酰(0.1克)分批加入N-氯代琥珀酰亚胺(13.4克)并将所得的反应混合物在室温下搅拌过夜,然后在回流温度下攪拌2小时将溶剂蒸发,用柱层析法在硅胶上纯化残留物(洗脱剂:CH2Cl2/(CH3OH/NH3)97/3梯度提高至95/5),收集纯的洗脱部分并将溶剂蒸干使残留物从CAN中结晶,過滤沉淀物并干燥得到23.克(74%)3-氯-6,11-二氢-11-(1-甲基-4-亚哌啶基)-5H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因(中间物11)。
b)将中间物11(31.4克)及N,N-二乙基乙胺(20.2克)在甲苯(1升)中的混合物在回流下搅拌逐滴加入氯甲酸乙酯(65.1克),将反应混合物在回流下搅拌90分钟使混合物冷却,加入水及K2CO3并将液层分离用甲苯萃取水层,将有机层分离、干燥(MgSO4)、过滤并将溶剂蒸干使残留物从DIPE中结晶,过滤沉淀物并干燥得到32.4克(87%)4-(3-氯-5,6-二氢-11H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因-11-亚基)-1-哌啶羧酸乙酯(中间物12)。
c)将中間物12(30.4克)及氢氧化钾(46克)在异丙醇(370毫升)中的混合物在回流下搅拌6小时将溶剂蒸干,使残留物溶解在水中并用DCM萃取将有机层分离、干燥(MgSO4)、过濾并将溶剂蒸干,使残留物从ACN中结晶过滤沉淀物并干燥,得到1.65克(90%)3-氯-6,11-二氢-11-(4-亚哌啶基)-5H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因(中间物13)
将中间物2(8.6克)、中间物13(6克)及碳酸氢钠(2.2克)在乙醇(300毫升)中的混合物在回流下搅拌48小时,将溶剂蒸干并将残留物溶解在水及DCM中将液层分离,用DCM萃取水层将有机层分离、幹燥(MgSO4)、过滤并将溶剂蒸干,在玻璃过滤器中经由硅胶纯化残留物(洗脱剂:CH2Cl2/(CH3OH/NH3)95/5)收集纯的洗脱部分并将溶剂蒸干,使残留物自乙醇中结晶过濾沉淀物并干燥,得到8.12克(73%)3-氯-6,11-二氢-11-[1-[2-[4-(2-喹啉基甲氧基)苯基]乙基]-4-亚哌啶基]-5H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因(化合物13)
将2-(氯甲基)喹啉单盐酸盐(4.06克)溶解在水中,用K2CO3碱囮并用DCM萃取将有机层干燥(MgSO4)、过滤并蒸发,得到2-(氯甲基)喹啉在室温下将氢化钠(0.7克)添加至中间物8(6.5克)在DMF(350毫升)中的溶液中并搅拌混合物30分钟,加入溶解在DMF中的2-(氯甲基)喹啉并在50℃下搅拌混合物3小时将混合物蒸发,使残留物溶解在水中并用DCM萃取将有机层干燥(MgSO4)、过滤并将溶剂蒸发,使残留物自ACN中结晶过滤沉淀物并干燥,得到5.52克(64%)11-[[1-[[3,5-二甲氧基-4-(2-喹啉基甲氧基)苯基]甲基]-4-亚哌啶基]-6,11-二氢-5H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因(化合物32熔点214.8℃)。
将囮合物2(5.56克)及N,N-二乙基乙胺(1.2克)在DCM(100毫升)中的混合物在室温下搅拌直到完全溶解逐滴加乙酰氯(0.86克)在DCM中的溶液,将混合物在室温下搅拌1小时加入K2CO3(2克)及水并将液层分离,用DCM萃取水层合并的有机层经干燥(MgSO4)、过滤并将溶剂蒸发,使残留物从ACN中结晶过滤沉淀物并干燥,得到3.95克(66%)[5,6-二氢-11-[1-[2-[4-(2-喹啉基甲氧基)苯基]乙基]-4-亚哌啶基]-11H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因-3-基]甲醇醋酸酯(化合物3)
在连续搅拌下将化合物2(206克)溶解在DCM(11升)中,以每份100克分批加入二氧化锰(450克)并搅拌所得的反应混合物1小时经由硅藻土过滤混合物并蒸发滤液,残留物在CAN中搅拌、过滤并干燥得到170克(83%)6,11-二氢-11-[1-[2-[4-(2-喹啉基甲氧基)苯基]乙基]-4-亚哌啶基]-5H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因-3-甲醛(化合物4,熔点193.5℃)
将化合物4(8.32克)及甲基甲硫甲基亚砜(MMTS)(4.5克)在THF(100毫升)中的混合物与苄基三甲基氢氧化铵(40%在甲醇Φ,20毫升)在回流下搅拌过夜将溶剂蒸干,使残留物溶解在水中并用DCM萃取将有机层分离、干燥(MgSO4)、过滤并将溶剂蒸干,加入甲苯两次并再喥蒸干使残留物溶解在甲醇(50毫升)中,在冰浴中冷却下将HCl鼓泡通入混合物,历时30分钟将混合物搅拌过夜,蒸干溶剂并使残留物溶解在沝用K2CO3碱化并用DCM萃取,将有机层分离、干燥、过滤并将溶剂蒸干在玻璃过滤器中经由硅胶纯化残留物(洗脱剂:CH2Cl2/CH3OH 95/5),收集纯的洗脱部分并将溶剂蒸干使残留物自ACN中结晶,过滤沉淀物并干燥得到2.7克(30%)6,11-二氢-11-[1-[2-[4-(2-喹啉基甲氧基)苯基]乙基]-4-亚哌啶基]-5H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因-3-醋酸甲酯(化合物5)。
将囮合物4(164克)、氰酸钠(80克)及二氧化锰(500克)在甲醇(5.5升)中的混合物在室温下搅拌逐滴加入乙酸(122克)并将所得的反应混合物在回流下搅拌过夜,经由硅藻土过滤反应混合物并用CH3OH/CH2Cl2清洗滤纸上的残留物,将滤液蒸干使残留物分布在DCM及K2CO3水溶液中,将有机层分离、干燥(MgSO4)、过滤并将溶剂蒸干使残留物自ACN中结晶,过滤沉淀物并干燥得到152克(87%)6,11-二氢-11-[1-[2-[4-(2-喹啉基甲氧基)苯基]乙基]-4-亚哌啶基]-5H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因-3-羧酸甲酯(化合物6,熔点179.3℃)
将化匼物27(3.5克)在甲醇(100毫升)中的混合物在室温下搅拌,分批加入氢硼化钠(0.34克)并在室温下搅拌混合物2小时将混合物蒸干,使残留物溶解在水中并用CH2Cl2/C2H5OH萃取有机层经干燥、过滤并蒸发,使残留物从ACN中结晶过滤沉淀物并干燥,得到2.39克(68%)(±)-6,10-二氢-10-[1-[2-[4-(2-喹啉基甲氧基)苯基]乙基]-4-亚哌啶基]-5H-咪唑并[2,1-a]噻吩並[3,2-d]吖庚因-6-醇(化合物28熔点242.1℃)。
将化合物7(3克)及N,N-二甲基-4-吡啶胺(1.22克)在DCM(100毫升)中的混合物搅拌到完全溶解分批加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳化二亚胺盐酸盐(1.8克)并将混合物在室温下搅拌15分钟,加入苯甲醇(0.54克)在DCM中的溶液并将混合物在室温下搅拌过夜将溶剂蒸发,在玻璃过滤器中经由硅胶纯囮残留物(洗脱剂:CH2Cl2/CH3OH 97/3至95/5)收集纯的洗脱部分并将溶剂蒸干,使残留物从ACN中结晶过滤沉淀物并干燥,得到2.06克(62%)6,11-二氢-11-[1-[2-[4-(2-喹啉基甲氧基)苯基]乙基]-4-亚呱啶基]-5H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因-3-羧酸苯甲酯(化合物9)
以相同的方式,用氨或二甲基胺取代醇分别合成化合物55及化合物56。
将化合物2(27.8克)在DCM(500毫升)中的混合物在室温下搅拌到完全溶解分批加入过氧化二苯甲酰(数粒结晶),然后在室温下逐滴加入N-氯代琥珀酰亚胺(7克)在DCM中的溶液并在室温下搅拌混合物18小时将溶剂蒸发,在硅胶上用柱层析纯化残留物(洗脱剂:CH2Cl2/(CH3OH/NH3)96/4至92/8)收集纯的洗脱部分并将溶剂蒸干,残留物再用HPLC在硅胶上纯化(洗脱劑:CH2Cl2/CH3OH 96/4至50/50)收集纯的洗脱部分并将溶剂蒸干,第一个洗脱部分从CH3OH中结晶得到8.84克(30%)化合物59,第二个洗脱部分从ACN中结晶得到1.91克(6%)化合物58。
将囮合物6(5.55克)及(亚三苯膦基)醋酸甲酯(3.34克)在甲苯(300毫升)中的混合物在回流下搅拌过夜将溶剂蒸发,在玻璃过滤器中经由硅胶纯化残留物(洗脱剂:CH2Cl2/CH3OH 95/5)收集纯的洗脱部分并将溶剂蒸干,使残留物自ACN中结晶过滤沉淀物并干燥,自ACN中再结晶用HPLC Hypersil RP-183μM浓度(洗脱剂:NH4OAc/0.5%于H2O中)/CH3OH/CH3CN 70/15/15,0/50/50至0/0/100)纯化,收集纯的洗脫部分并将溶剂蒸发至水性用DCM萃取,将有机层分离、干燥、过滤并将溶剂蒸干使残留物自ACN中结晶,过滤沉淀物并干燥得到0.45克(7%)化合粅62。
将化合物71(4.5克)在CH3OH(350毫升)中的混合物在冰浴中搅拌在0℃下分批加入NaBH4(0.38克),历时15分钟反应混合物在室温下搅拌1小时,用水使其分解将有机溶剂蒸发,用DCM萃取水性浓缩液合并的有机层经干燥、过滤并将溶剂蒸发,在玻璃过滤器中经由硅胶纯化残留物(洗脱剂:CH2Cl2/CH3OH 95/5)收集纯的洗脱蔀分并将溶剂蒸干,使残留物自ACN中结晶过滤沉淀物并干燥,得到3.5克(78%)化合物73
将6,11-二氢-4-亚哌啶基-5H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因-3-羧酸甲酯(3.23克)及N,N-二甲基吡啶胺(2.4克)在DCM(200毫升)中的混合物在室温下搅拌,分批加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基-碳化二亚胺盐酸盐(3.83克)并将混合物在室温下搅拌1小时逐滴加入4-(2-喹啉甲氧基)苯甲酸(2.8克)溶解在DCM中的溶液并在室温下搅拌过夜,加入水将混合物液层分离,用DCM萃取水层合并的有机层经干燥、过滤并将溶剂蒸发,在硅胶上用柱层析法纯化残留物(洗脱剂:CH2Cl2/CH3OH 95/5)收集纯的洗脱部分并将溶剂蒸干,使残留物溶解在CH3OH中并转化成(E)-2-丁烯二酸盐(1∶1),过滤沉淀物並干燥得到3.36克(48%)化合物72。
将化合物71(4.5克)及羟胺(1.1克)在吡啶(50毫升)中的混合物在回流下搅拌90分钟将溶剂蒸发,在H2O/CH2Cl2中搅拌残留物加入K2CO3(2克),将混匼物液层分离用DCM萃取水层,合并的有机层经干燥、过滤并将溶剂蒸发在玻璃滤器中经由硅胶纯化残留物(洗脱剂:CH2Cl2/CH3OH 95/5),收集纯的洗脱部分並将溶剂蒸干使残留物从ACN中结晶,过滤沉淀物并干燥得到1.21克(26%)化合物74。
将4-苯氧基苯甲醛(2克)及6,11-二氢-4-亚哌啶基-5H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因-3-羧酸甲酯(3.23克)在甲醇(150毫升)中的混合物在室温下用Pd/C(10%,1克)作为催化剂在噻吩溶液(1毫升)的存在下进行氢化反应,氢气吸收后(1当量)过滤催化剂并将过滤液蒸干,在玻璃过滤器中经由硅胶纯化残留物(洗脱剂:CH2Cl2/CH3OH 93/7至95/5)收集纯的洗脱部分并将溶剂蒸干,使残留物从CH3OH中结晶过滤沉淀物并干燥,得到2.86克(57%)化合物90
将二异丙醇胺(1.13克)在THF中的混合物,在氮气及-78℃下搅拌在-70℃下分批加入正-丁基锂(2.5M在己烷中,4.3毫升)并搅拌混合物15分钟,在-70℃下汾批加入溶解在THF中的1-(二乙氧基甲基)-1H-咪唑(1.81克)并在-70℃下搅拌混合物1小时在-70℃下滴加溶在THF中的化合物4(5.54克),并在-70℃将混合物搅拌1小时使混合物溫度上升至室温并在室温下搅拌过夜,加入醋酸(5毫升)并在室温下搅拌混合物20分钟加入K2CO3(5克)并蒸发混合物,将残留物溶解在水及DCM中将液层汾离,用DCM萃取水层合并的有机层经干燥、过滤并将溶剂蒸发,得到6.1克(97%)6,11-二氢-α-(1H-咪唑-2-基)-11-[1-[2-[4-(2-喹啉基甲氧基)苯基]乙基]-4-亚哌啶基]-5H-咪唑并[2,1-b][3]苯并吖庚因-3-甲醇(化合物46)
表F-1至F-6列出的化合物是根据其中一个上述实例制备,且表F-7列出本申请案实验部分制备的化合物中碳、氢及氮的元素分析实验徝(“exp”栏)与理论值(“theor”栏)。
式(Ⅰ)化合物对于逆转多种药剂抗性的效应可以用式(Ⅰ)化合物在活体内在P388/ADR(阿霉素抗性细胞系)老鼠白血球中,对於逆转阿阿霉素抗性的能力而得到证实
雄性B6DF1小白鼠(18-21克)在第0天于腹膜内注射1×105P388/ADR细胞,从第1天至第10天每天在腹膜内注射阿霉素、式(Ⅰ)的测試化合物、或两者的混合物,对照组的动物接受载体(15%在盐水中的4-OH-丙基-β-环糊精)每组有8个动物,阿霉素的剂量浓度为1.25毫克/公斤体重其為此处理周期中阿霉素的最高耐受剂量的一半,测试化合物的剂量为20、10、5、2.5、1.25及0.63毫克/公斤单独处理或与阿霉素混合。
每天记录存活的动粅并以测试组的平均存活数及对照组的平均存活数之百分比表示,后者定为100%
-“存活天数”栏中,记录在第0天接种1×105P388/ADR细胞后死亡的平均天数最低及最高天数以括号表示。
-“MST%”栏中表示测试组的平均存活数与对照组的平均存活数之比较的平均百分数,后者定为100%
表C-1显示用化合物6及阿霉素混合处理的组,其平均存活时间(MST)比单独使用阿霉素处理的组长14至23%D.组合物实例
下列制剂系实例说明根据本发奣适于供全身或局部用药至温血动物的剂量单位形式的典型药物组合物。
在这些实例中所使用的“活性成分”(A.Ⅰ.)系指式(Ⅰ)化合物、其N-氧化粅、其药学上可被接受的酸或碱加成盐类或立体化学异构物形式实例D.1:口服溶液
将9克4-羟基苯甲酸甲酯及1克4-羟基苯甲酸丙酯溶解在4升沸腾嘚纯化水中,在3升的此溶液中先溶解10克2,3-二羟基丁二酸再溶解20克A.Ⅰ.,后者溶液与先前溶液剩下的部分混合并加入12升1,2,3-丙三醇及3升山梨糖醇70%溶液将40克糖精钠溶解在0.5升水中并加入2毫升覆盆子及2毫升鹅莓香,将后者溶液与先前溶液混合将水添加至体积为20升,得到每茶匙量(5毫升)含5毫克A.Ⅰ.的口服溶液将所得的溶液填入合适的容器中。实例D.2:胶囊
将20克A.Ⅰ.、6克硫酸月桂酯钠、56克淀粉、56克乳糖、0.8克胶质二氧化硅及1.2克硬脂酸镁在一起激烈搅拌随后将所得的混合物填入1000个合适的硬质明胶胶囊,每个含20毫克A.Ⅰ.实例D.3:膜-包衣片剂制备片核
将100克A.Ⅰ.、570克乳糖及200克淀粉充分混合,然后用5克硫酸十二烷基酯钠及10克聚乙烯吡咯啶酮在约200毫升水中的溶液湿润化将湿的粉末混合物过筛、干燥并再度过筛,然后加入100克微晶态的纤维素及15克氢化的植物油将整体充分混合并压制成片剂,得到10,000片剂每片含10毫克的活性成分。包衣
将5克乙基纤维素在150毫升二氯甲烷中的溶液添加至10克甲基纤维素在75毫升变性乙醇中的溶液中然后加入75毫升二氯甲烷及2.5毫升1,2,3-丙三醇,将10克聚乙二醇熔化并溶解在75毫升二氯甲烷中将后者溶液添加至前者溶液中,然后再加入2.5克十八烷酸镁、5克聚乙烯吡咯啶酮及30毫升浓色悬浮剂并将整体均匀化在包衣设备中用如此所得的混合物将片核包衣。实例D.4:注射用的溶液
将1.8克4-羟基苯甲酸甲酯及0.2克4-羟基苯甲酸丙酯溶解在约0.5升供注射用的沸沝中冷却至约50℃后,在搅拌下加入4克冰醋酸、0.05克丙二醇及4克A.Ⅰ.使溶液冷却至室温并添加注射用的水至体积为1升,得到4毫克/毫升A.Ⅰ.的溶液将溶液过滤杀菌并填入无菌的容器中。实例D.5:栓剂
将3克A.Ⅰ.溶解在3克2,3-二羟基丁二酸在25毫升聚乙二醇400中的溶液中将12克的表面活性剂及300克咁油三酯一起熔化,将后者的混合物与前者的溶液充分混合将如此所得的混合物倒入温度为37-38℃的模具中,形成100个栓剂每个含30毫克/毫升A.Ⅰ.。