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PCR做出加药后上调的趋势但是Western却昰下调。
如果能附上相关文献的检索就更好了
在回答这个问题前,请楼主回答几个问题:
1、你的“PCR和Western的结果不相符”这个结论是重复幾次试验后,观察到的结果
2、你的PCR样品和WB样品来自体外还是来自体内?
3、你的PCR是常规PCR还是定量PCR,还是定量RT-PCR
4、你的PCR和WB中,阳性和阴性對照分别是什么
5、你的药物,可能在哪个水平发挥作用
6、你的药物做了几个稀释度,做了几个时间点
生物学实验的两大基本准则是“对照”和“重复”,你都没有交代清楚谁也无法答复你的问题。
LZ的问题似乎更关注寻找结果不符的依据 多过对实验本身可信度的分析
如果是这样的话,不就是自己查文献嘛,谁知道你做的是什么东西
我做的PCR是半定量的反转录PCR
刚开始做 技术不好 可能结果不准……
谈点看法楼主说PCR做的是半定量,我不太知道什么叫半定量可能就是普通的PCR啊,理论上来说普通的PCR是没有办法达到定量的目的的因为进入平台期以后,产物量和初始标本量是不成正比的这就是为什么要使用荧光PCR定量的目的。
抛开可能存在的技术问题不谈对于某个基因的调节吔存在post-transcription的调节,也就是说绝对不是转录水平和翻译水平是完全一致的不是说一个分子mRNA上调,那么蛋白肯定上调因为存在mRNA的修饰,运输降解和其他一些samll RNA,比如miRNA的调节因此理论上mRNA水平和蛋白水平也不一定是一致。
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外显子和内含子子定义是隔断基因线性表达的序列。关于外显子和内含子子的功能有两种不同看法。一种见解认为外显子和内含子子是在进化中出现和消失的,外显子和內含子子如有功能只不过是有利于物种的进化选择。另一些学者则力图证明外显子和内含子子在基因表达中有调控功能-参考《生物囮学(第五版)》
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