进行转录的trizol法提取rna总量量为什么要一致

点击联系发帖人 时间：2016-04-07 06:48

trizol法提取rna总量

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我一般念作：chui- zou/（吹奏,一二声）

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Trizol提取RNA时异丙醇放入过量一倍,会造成什么影响,能否补救

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异丙醇是沉淀核酸用的,作用和乙醇一样.只不过用量少一点,0.6V~1V就够了,不像乙醇沉淀需要至少2V,一般需要2.5倍体积.在水相很多,离惢管容积有限,加不下太多乙醇的时候一般会用异丙醇沉淀.
异丙醇的作用是通过-OH的疏水作用使得RNA 或者DNA链中的亲水基团受到保护,等同于沉淀,加哆就加多了,不需要补救

没有影响的仅仅起到沉淀作用

作用是沉淀RNA，无影响

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1,裂解组织或者细胞使用的TRIzol量偏少； 2使用的组织材料中含有大量的有机溶剂（如：乙醇/异丙醇等）、高纯度的Buffer、碱性溶剂等； 3，如果提取的RNA中含有DNA时也可以使用DNase I进行DNA消囮。

这个如果你做反转录的话只能是用PCR检测了。电泳基本检测不出来象现在的试剂盒或者TRIZOL提的RNA，除质量太差一般含基因组很少。如果RT－PCR发现结果不对可以用那种不含RNA酶的DNA酶处理一下。如果引物能避开的话有点DNA也没关系。

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