用于免疫组织化学的固定剂种类較多性能各异，在固定半稳定性抗原时尤其重视固定剂的选择，介绍如下

1．醛类固定剂　　双功能交联剂，其作用是使组织之间相互交联保存抗原于原位，其特点是对组织穿透性强收缩性小。有人认为它对IgM、IgA、J链、K链和λ链的标记效果良好，背景清晰，是常用的固定剂。

（1）10%钙-福尔马林液（浓甲醛10ml饱和碳酸钙90ml）。

合加热至60℃搅拌并滴加1N NaOH至清晰为止，冷却后加PBS液至总量1000ml）

（4）戊二醛-甲醛液（戊二醛1ml，浓甲醛10ml蒸馏水加至100ml）。

戊二醛是二醛基化合物交联结合力比甲醛大，Bullock认为交联过强可出现组织改变和空间遮蔽现象，影响組织的抗原性但McDonald等认为，该试剂用于PAP法免疫酶标记效果仍满意

（5）甲醛升汞固定液（即B5固定液。浓甲醛10ml氯化汞6g,醋酸钠1.25g ,蒸馏水90ml）。

有囚认为此固定液悬液是较理想的固定液标记IgA、IgM、IgG等抗原效果良好。也有人认为它减弱细胞的抗原性上皮细胞可产生非特异性荧光，故鈈宜用于免疫荧光标记氯化汞是一种强蛋白凝固剂，但对组织穿透性弱且使组织收缩，故与甲醛混合使用

（6）醋酸-甲醛液（浓甲醛10ml，冰醋酸3ml生理盐水加至100ml）。

Bullock等认为此液固定效果良好组织可不经消化，胞浆IgA、IgG、IgM、IgD和K、λ、J链标记均呈阳性，且背景染色极淡。如标记IgG用PAP法第一抗体仅为甲醛升汞液的1/10此液内醋酸既可防止组织收缩，又可暴露胞浆免疫球蛋白抗原决定簇

该固定液为组织学、病理学常鼡固定剂之一，对组织穿透力较强而收缩性较小比单独醛类固定更适合免疫组化染色。Kayhko认为用于标记B细胞的J链较好但Bullock则认为它可导致IgG γ重链变性，故必需加大第一抗体的浓度。

该固定液可用于电镜免疫细胞化学对超微结构的保存优于纯甲醛，也适用于光镜免疫细胞化学研究采用2.5%多聚甲醛和30%饱和苦味酸，更可增加对组织穿透力和固定效果以保存更多的组织抗原。固定时间6-18h

（9）PLP液（过碘酸盐-赖氨酸-多聚甲醛固定液）。

该固定剂适用于富含糖类的组织对超微结构及许多抗原的抗原性保存较好。其机制是过碘酸氧化组织中的糖类形成醛基通过赖氨酸的双价氧基与醛基结合，从而与糖形成交联组织抗原大多数是由蛋白质和糖两部分构成，抗原决定簇位于蛋白部分故該固定液有选择性地使糖类固定，既稳定缺的又不影响其在组织中的位置（固定剂7-9配制法见附录1）。