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钙离子信号与细胞凋亡
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Doxycycline对人肝癌细胞系HepG2增殖及凋亡的体外实验研究
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内容提示：Doxycycline对人肝癌细胞系HepG2增殖及凋亡的体外实验研究
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Doxycycline对人肝癌细胞系HepG2增殖及凋亡的体外实验
官方公共微信关于annexin V/pi调补偿问题(对照组,单阳)
21:16:17&&&来源：&&&评论：&&
[关于annexin V/pi调补偿问题(对照组,单阳)] 我要做annexin V/pi双染检测凋亡，但搞不清楚如何调补偿。实验总共分三组：a 对照组 b 实验一组c 实验二组 ，三组细胞加药处理后，检测凋亡情况。但如何调补偿没搞明白，我想这样做不知对不对？1 空白对照组（不加药）2 pi单阳（不加药）3 annexin V单阳（不加药）4 对照组双阳（加药）5 实验一组双阳 6 实验二组双阳想问大家2，3单阳管是应该用不加药处理的细胞还是加药处理的细胞 关键词:[对照组 单阳]…
我要做annexin V/pi双染检测凋亡，但搞不清楚如何调补偿。实验总共分三组：a 对照组 b 实验一组c 实验二组 ，三组细胞加药处理后，检测凋亡情况。但如何调补偿没搞明白，我想这样做不知对不对？1 空白对照组（不加药）2 pi单阳（不加药）3 annexin V单阳（不加药）4 对照组双阳（加药）5 实验一组双阳 6 实验二组双阳想问大家2，3单阳管是应该用不加药处理的细胞还是加药处理的细胞调节补偿？调补偿的目的是什么？另外还有一个问题，我想检测t cell的凋亡要做cd3/annexin V双标，以前没这样做过，想问一下是怎样的操作步骤？请大家帮帮忙，万分感谢！
回复顶起来，请大家帮忙啊回复1.首先补偿是只将荧光染料发射光谱的重叠干扰去掉.
Annexin V-FITC对PI的干扰会小些, 而PI的发射光谱较宽,会对FITC有干扰. 因此必须做补偿. 但如果用PI单阳做补偿,必须将细胞固定(处死),否则PI染料无法进入细胞内.如果实验条件(上机检测电压条件)不变, 加药或不加药都行. 2.如果用Annexin V-FITC, 7AAD检测, 不用做补偿.3.检测T- cell的凋亡: 用CD3圈门, 但也需要做补偿,也要用Annexin V + PI(7AAD).建议组合:
a) Annexin V-FITC
b) Annexin V-FITC + CD3PE + 7AAD回复1.首先补偿是只将荧光染料发射光谱的重叠干扰去掉.
Annexin V-FITC对PI的干扰会小些, 而PI的发射光谱较宽,会对FITC有干扰. 因此必须做补偿. 但如果用PI单阳做补偿,必须将细胞固定(处死),否则PI染料无法进入细胞内.如果实验条件(上机检测电压条件)不变, 加药或不加药都行. 2.如果用Annexin V-FITC, 7AAD检测, 不用做补偿.3.检测T- cell的凋亡: 用CD3圈门, 但也需要做补偿,也要用Annexin V + PI(7AAD).建议组合:
a) Annexin V-FITC
b) Annexin V-FITC + CD3PE + 7AAD我的CD3是PE标记的，而PI也是PE标记的，所以我想只用annexin检测凋亡，不知行不行？我想这样做，不知对不对？请各位给些建议！1 加IgG PE2 加annexin 3 加annexin FITC和CD3 PE 请大家帮忙！谢谢！回复如果用BeckmanCoulter的做检测, PI和PE可以同时用, Annexin V-FLTC用荧光1(FL1, 525nm))通道, CD3-PE用FL2(575nm)通道,
PI用FL3(620nm) 通道检测.如果用BD的检测, CD3 用PE标记(用FL2). PI 用FL3通道. 但补偿非常大,很难做. (因为BD仪器所用的滤光片接收的光谱较宽).如果只看CD3细胞的凋亡(不分早期和晚期),你的想法是可以的.回复如果用BeckmanCoulter的仪器做检测, PI和PE可以同时用, Annexin V-FLTC用荧光1(FL1, 525nm))通道, CD3-PE用FL2(575nm)通道,
PI用FL3(620nm) 通道检测.如果用BD的仪器检测, CD3 用PE标记(用FL2). PI 用FL3通道. 但补偿非常大,很难做. (因为BD仪器所用的滤光片接收的光谱较宽).如果只看CD3细胞的凋亡(不分早期和晚期),你的想法是可以的.请问sherrie660117: 如果我想同时做CD3-PE,Annexin V-FLTC和PI,而流式又是BD的仪器,我应该怎样分组?请高手给予详细说明!我有点糊涂了,谢谢!!!回复请各位高手帮忙啊！！！谢谢！
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