什么叫单染色？什么叫复染色？_百度知道
什么叫单染色？什么叫复染色？
染色是用一种染料使微生物染色。复染色法是用两种或两种以上染料，有协助鉴别微生物的作用，但不能鉴别微生物
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出门在外也不愁免疫染色_百度百科
关闭特色百科用户权威合作手机百科 收藏 查看&免疫染色本词条缺少概述、名片图，补充相关内容使词条更完整，还能快速升级，赶紧来吧！外文名immunol staining类别2免疫组化
免疫染色(immunol staining)包括免疫荧光(immunol fluorescence)、免疫组化(immunol histochemistry)，免疫组化又称免疫细胞化学(immunol cytochemistry)等，可以参考如下步骤进行操作。
对于贴壁细胞：
&O 可以直接用多孔板，例如6孔板、24孔板等，培养细胞，然后到预定时间时进行固定等后续操作。 &O 也可以用洁净的，70%乙醇中浸泡后，用无菌的镊子放置到6孔板内，然后用无菌的生理盐水、PBS或培养液洗去残留的乙
醇。这时就可以种入细胞进行培养，待细胞贴在盖玻片上生长良好后，即可进行固定等后续操作。
对于悬浮细胞：
&O 把细胞先在固定液中固定，然后把细胞滴加在上，干燥后细胞会紧贴在载玻片上。然后就可以进行后续操作。如果细胞的 粘附能力不佳，可以在载玻片上用PDL等物质进行处理，以增强载玻片的粘附能力。
对于冷冻切片：
切片放置在载玻片上后，可以直接进行固定等后续操作。
对于石蜡切片：
&O 脱蜡：切片在二甲苯中脱蜡5分钟，再换用新鲜的二甲苯脱蜡，共用二甲苯脱蜡3次。无水乙醇5分钟，两次。90%乙醇5分钟，两
次，70%乙醇5分钟，一次。蒸馏水5分钟，两次。
&O 抗原修复：根据不同的抗原和抗体，可以选择把切片放置在如下抗原修复液中，10mM柠檬酸钠，pH6.0，或1mM EDTA，pH8.0，
或10mM Tris, pH10.0，95℃加热12分钟，大约在30分钟内缓慢冷却至室温。&O 可以使用适当的固定液固定细胞或切片，例如碧云天生产的免疫染色固定液。固定完毕后，可以用免疫染色洗涤液洗涤两次，每 次5分钟。&O
加入免疫染色封闭液，封闭60分钟。如果背景较高，可以4℃封闭过夜。
从封闭开始所有的步骤，一定要注意样品的保湿，避免样品的干燥，否则极易产生较高的背景。
&O 在整个免疫染色过程中我们推荐使用碧云天的侧摆摇床，侧向摆动速度比较缓慢，而且也容易让溶液覆盖样品。如果样品比较容 易脱落，也可以把所有的步骤放置在桌面上静止进行，即封闭、抗体孵育、洗涤等步骤均不需摇动，但静止操作时宜适当延长作
用时间或次数。&O
参考一抗的说明书，按照适当比例用免疫染色一抗稀释液稀释一抗。
&O 用吸尽封闭液，立即加入稀释好的一抗，室温或4℃在侧摆摇床上缓慢摇动孵育一小时。如果一抗孵育一小时效
果不佳，可以4℃缓慢摇动孵育过夜。
&O 回收一抗。加入免疫染色洗涤液， 在侧摆摇床上缓慢摇动洗涤5分钟。吸尽洗涤液后，再加入洗涤液，洗涤5分钟。共洗涤3次。
如果结果背景较高可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。
5.二抗孵育(Secondary antibody inucubation)
&O 参考二抗的说明书，按照适当比例用免疫荧光染色二抗稀释液稀释荧光标记的二抗，或者用免疫染色(非荧光)二抗稀释液稀释辣 根过氧化物酶(HRP)或生物素(Biotin)或碱性磷酸酯酶(AP)标记的二抗。 &O
用微型台式真空泵吸尽洗涤液，立即加入稀释好的二抗，室温或4℃在侧摆摇床上缓慢摇动孵育一小时。
&O 回收二抗。加入免疫染色洗涤液， 在侧摆摇床上缓慢摇动洗涤5分钟。吸尽洗涤液后，再加入洗涤液，洗涤5分钟。共洗涤3次。
如果结果背景较高，可以适当延长洗涤时间并增加洗涤次数。&O
对于免疫荧光染色，此时已经可以直接到荧光显微镜下观察。
对于非免疫荧光染色可以选用DAB等适当的显色底物，或AB检测体系等进行后续检测。&O 如果进行的是免疫荧光染色，通常都可以进行多重染色。对于可以产生有色沉淀物的染色反应，例如DAB染色，一般不适合再进
行多重染色。
&O 多重荧光染色： 可以使用红色荧光、绿色荧光和蓝色荧光进行三重荧光染色。例如用免疫荧光染色试剂盒-抗小鼠Cy3进行红色荧光染色，随后可 以用免疫荧光染色试剂盒-抗兔Cy2进行绿色荧光染色，在完成上述两种染色后可以使用Hoechst染色试剂盒对细胞核进行染色，
染色后为蓝色荧光。
&O 用HE染色进行复染：
免疫荧光染色后可以用苏木素伊红(HE)染色试剂盒进行HE染色。
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收藏 查看&负染色法
负染色法（Negative stain）是一种染色方法，常用于不透光液体标本的镜检。由于其染色处理过程并非针对菌体本身，故又称“衬托染色法”、“间接染色法”[1]。在负染色法中，标本不需要热固定，细胞不会因为化学药物的影响而变形，对于不易染色的或也能观察[1]。外文名Negative stain其他名称衬托染色法，间接染色法解像力0.5以下最早使用时间1959年最早使用者S.Brenner和R.Horne
负染色法(negative staining)染色处理过程主要并非针对菌体本身，故又称“衬托染色法”。是一种易于在电子显微镜下观察试样的微细结构的方法。它是用磷钨酸钠、醋酸氧铀等电子密度高的物质，嵌入生物试样的间隙，根据产生的对比进行观察，而非原来意义上的物质染色。它与通常在电子显微镜中所得的阳面物像不同，而是阴面物像，因而有此名称。解像力可达0.5微米以下。
最早由S.Brenner和R.Horne，（1959）用于病毒粒子的观察，以后利用此法很快地积累了病毒、细菌以及分层蛋白质的微细结构等方面的知识。
负染色法需要使用来染色，如或。因为细菌体表面带负电，而酸性染料的色原也带负电，所以色原只能将背景染色。没有染色的细胞在染色背景下就能很容易的观察到。在负染色法中，标本不需要热固定，细胞不会因为化学药物的影响而变形，对于不易染色的或也能观察。
负染色法 此种染色法之染色处理过程主要并非针对菌体本身，故又称「间接染色法」。 所用之染剂系因阴离子呈色，所以无法对同样带阴电荷之细胞呈色，而于时会在细胞周围形成沉淀，这种情形即称为阴性或间接染色。又称背景染色法就透射电子显微镜来说，原子所带电子的不透明度与其原子序数有关，也就是和核外电子数有关。所以应选择有较强的电子散射能力且易被生物吸附的试剂作为负染色剂，一些常用的负染色剂有钼酸铵、乙酸铀酰、甲酸铀酰（英语：Uranyl formate）、磷钨酸、四氧化锇、锇铁氰化钾等[2]。使用负染色法可以看到普通光学显微镜下无法看清的结构。该方法主要用于观察病毒、细菌、细菌鞭毛、生物膜等结构，这些结构的电子散射能力均较低[3]。试剂：苯胺黑染色液 或 伊红染色液 等酸性染料
器材：酒精灯（或本生灯）、接种环、染色盘、玻片、拭镜纸及显微镜。①取一小滴苯胺黑染色液，滴于洁净玻片之一端。
②以无菌操作取一接种环之培养，置入苯胺黑染色液中，混匀。
③取另一玻片（或盖玻片）其一端置于苯胺黑色液之前，并呈 30 度状态，向他端推去，使混和液成一薄涂膜。
④将玻片置空气中干燥，不宜以热固定。
⑤以油镜观察之。
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什么叫单染色？什么叫复染色？
染色是用一种染料使微生物染色，有协助鉴别微生物的作用。复染色法是用两种或两种以上染料，但不能鉴别微生物
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